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医学分子生物学杂志2023 Vol.20 按期号、起始页码排序 Please wait a minute... 选择: 下载引用 EndNote Reference Manager ProCite BibTeX RefWorks 显示/隐藏图片 Select 1. 基于毛细管电泳的单基因病扩展性携带者筛查技术的建立及临床评估 谭建新, 邵彬彬, 蒋祝, 张菁菁, 王艳, 罗春玉, 胡平, 许争峰 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 1-6.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.001 摘要 （390）      PDF （3935KB）（711）    可视化    收藏 目的 建立并评估一种基于毛细管电泳技术的单基因病扩展性携带者筛查方法。 方法 采用多个基于毛细管电泳的技术检测 1 099 例样本中 24 个基因相关的 20 种疾病中的 448 个致病变异并进行验证。 结果 毛细管电泳检测结果与其他方法验证的结果完全一致。 在 1 099 例受检者中, 检出 190 例携带者, 总体携带率为17. 3 % (190 / 1 099), 检出变异个数最多的是 GJB2 基因。 在检测的1 075 例女性样本中, 共 检出 8 例为 X 连锁遗传病致病基因的携带者, 携带率为 7. 4 ‰ (8 / 1 075)。 结论 成功建立了一种基于毛 细管电泳的扩展性携带者筛查技术。 相关文章 | 多维度评价 Select 2. 沉默 HOXA11-AS 靶向 miR-766-3p 对 ox-LDL 诱导的血管内皮细胞损伤的影响 庄媛 , 黄莺 , 李延辉 , 李悦 , 王位坐 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 7-13.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.002 摘要 （279）      PDF （3505KB）（234）    可视化    收藏 目的 探讨长链非编码 RNA (lncRNA) 同源异形盒基因 A11 反义 RNA (HOXA11-AS) 靶向微小 RNA-766-3p (miR-766-3p) 对氧化低密度脂蛋白 ( ox-LDL) 诱导的血管内皮细胞损伤的影响。 方法 以 100 μg / mL 的 ox-LDL 处理人脐静脉血管内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cell, HUVEC) 24 h 建立 细胞损伤模型。 将 HUVEC 分为对照 (con) 组、 ox-LDL 组、 ox-LDL + si-NC 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS 组、 ox-LDL + miR-NC 组、 ox-LDL + miR-766-3p 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-NC 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-766-3p 组。 RT-qPCR 检测 HOXA11-AS 和 miR-766-3p 表达。 流式细胞术分析细胞凋亡。 试剂盒检测 LDH 释放量、 胞内 SOD 活性。 ELISA 法检测培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平。 双荧光素酶报告实 验确定 HOXA11-AS 和 miR-766-3p 的靶向关系。 结果 与 con 组比较, ox-LDL 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量、 HOXA11-AS 表达量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著升高 (P< 0. 05), SOD 活性、 miR-766-3p 表达量显著降低 (P< 0. 05)。 与 ox-LDL + si-NC 组比较, ox-LDL + si-HOXA11-AS 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著降低 (P< 0. 05), SOD 活性显著升高 (P< 0. 05)。 与 ox-LDL + miR-NC 组比较, ox-LDL + miR-766-3p 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著降低 (P< 0. 05), SOD 活性显著升高 (P< 0. 05)。 miR-766-3p 是 HOXA11-AS 的直接靶点。 与 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-NC 组比较, ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-766-3p 组 HUVEC 细胞凋亡 率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著升高 (P< 0. 05), SOD 活性显著降低 (P< 0. 05)。 结论 沉默 HOXA11-AS 通过靶向上调 miR-766-3p 表达能够抑制 ox-LDL 诱导的血管内皮细胞凋亡、 氧化应 激和炎性反应。 相关文章 | 多维度评价 Select 3. miR-144 在慢性阻塞性肺疾病患者外周血血清和单核细胞中的表达及其临床意义 李力 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 14-19.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.003 摘要 （264）      PDF （1104KB）（211）    可视化    收藏 目的 探究 miR-144 在慢性阻塞性肺疾病 ( chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 患者外 周血血清和单核细胞中的表达及其临床意义。 方法 选取 2020 年 3 月至 2021 年 6 月内江市第二人民医院 收治的 58 例 COPD 稳定期患者为观察组, 另选取同期 45 例健康体检者为对照组。 收集所有患者的一般临 床资料。 采用实时荧光定量 PCR 法 (qRT-PCR) 检测所有患者外周血血清和单核细胞中 miR-144 的表达水 平。 分析 COPD 患者外周血血清及单核细胞中 miR-144 表达水平与肺功能的关系。 Pearson 相关性分析 COPD 患者外周血血清及单核细胞 miR-144 表达水平与一秒用力呼气容积 ( forced expiratory volume in first second, FEV1) 的相关关系。 ROC 曲线分析患者外周血血清和单核细胞 miR-144 水平对 COPD 的诊断价值。 结果 与对照组相比, COPD 患者外周血血清及单核细胞中 miR-144 的表达水平均明显升高, 其差异具有 统计学意义 (P< 0. 05)。 COPD 患者外周血血清及单核细胞中 miR-144 的表达水平均随着肺功能严重程度 的加重而依次升高, 其差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 Pearson 相关性分析结果显示, COPD 患者外周血 血清及单核细胞 miR-144 表达水平与 FEV1 均呈负相关关系 (r = - 0. 517, r = - 0. 463, P< 0. 05)。 ROC 曲 线分析结果显示, 外周血血清和单核细胞 miR-144 水平对 COPD 诊断价值的 ROC 曲线下面积 (AUC) 分别 为 0. 857、 0. 849, 截断值为 1. 371、 1. 890, 敏感度为 84. 50 % 、 84. 50 % , 特异性为 80. 00 % 、 88. 90 % 。 结论 COPD 患者外周血血清和单核细胞 miR-144 水平显著上调, 且参与调节疾病的发展程度, 对发生 COPD 具有一定的诊断价值。  相关文章 | 多维度评价 Select 4. lncRNA CERS6-AS1 通过调控 miR-138-2-3p 抑制人胶质瘤细胞系增殖  黄琦, 翟海程 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 20-25.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.004 摘要 （244）      PDF （4673KB）（192）    可视化    收藏 目的 探讨 lncRNA CERS6-AS1 对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。 方法 qRT-PCR 法检测胶质瘤组织、 癌旁组织中 CERS6-AS1 和 miR-138-2-3p 的表达量; Pearson 法分析胶质瘤组织中 CERS6-AS1 与 miR-138-2-3p 表达量的相关性; 体外培养人胶质瘤细胞 T98G, 将 si-NC、 si-CERS6-AS1、 miR-NC、 miR-138-2-3p mimics、 si-CERS6-AS1 与 anti-miR-NC、 si-CERS6-AS1 与 anti-miR-138-2-3p 分 别 转 染 至 T98G 细胞; CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 Transwell 小室实验分别检测细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭 能力; 双荧光素酶报告基因实验检测 CERS6-AS1 和 miR-138-2-3p 的靶向关系。 结果 与癌旁组织比较, 胶 质瘤组织中 CERS6-AS1 的表达量升高 (P< 0. 05), miR-138-2-3p 的表达量降低 (P< 0. 05); CERS6-AS1 与 miR-138-2-3p 呈负相关 (r = - 0. 8899, P< 0. 001); si-CERS6-AS1 组细胞活力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵 袭细胞数均低于 si-NC 组 (P< 0. 05); CERS6-AS1 可靶向调节 miR-138-2-3p 的表达; miR-138-2-3p 组细胞活 力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵袭细胞数均少于 miR-NC 组 (P< 0. 05); si-CERS6-AS1 + anti-miR-138-2-3p 组细胞活力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵袭细胞数均比 si-CERS6-AS1 + anti-miR-NC 组增多 (P< 0. 05)。 结论 干扰 CERS6-AS1 表达可通过调控 miR-138-2-3p 而抑制胶质瘤细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭。 相关文章 | 多维度评价 Select 5. lncRNA PSMA3-AS1 靶向 miR-3619-5p 调控宫颈癌 SiHa 细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究 鲁慧玲, 闫飞艳 , 常丽花 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 26-33.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.005 摘要 （295）      PDF （5845KB）（159）    可视化    收藏 目的 探讨 lncRNA PSMA3-AS1 调控宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭的分子机制。 方法 收集 2020 年 3 月至 2021 年 6 月西安医学院第二附属医院收治的 42 例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测宫颈癌组织、 癌旁组织、 人宫颈上皮永生化细胞 H8、 与人宫颈癌细胞系 SiHa、 HeLa、 Caski 中 lncRNA PSMA3-AS1、 miR-3619-5p 的表达量; 以 SiHa 细胞为研究对象, 分组为: si-NC 组、 si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 miR-NC 组、 miR-3619-5p 组、 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组; MTT 法与 Transwells 实验分别检测每组 SiHa 细胞的增殖活力、 迁移及侵袭能力; 双 荧光素酶报告实验检测 miR-3619-5p 过表达对野生型载体 lncRNA PSMA3-AS1-WT、 突变型载体 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 荧光素酶活性的影响; Western 印迹检测 MMP2、 MMP9 蛋白表达量。 结果 宫颈癌组织中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量比癌旁组织增加 ( P < 0. 01), miR-3619-5p 的表达量比癌旁组织减少 ( P < 0. 01); 与 H8 细胞比较, SiHa、 HeLa、 Caski 细胞中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量升高 (P< 0. 01), miR-3619-5p 的表达量降低 (P< 0. 01); 与 si-NC 组比较, si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋 白水平降低 (P< 0. 05), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-3619-5p 组细胞活力 和 MMP2、 MMP9 蛋白水平降低 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); miR-3619-5p 过表达可抑 制 lncRNA PSMA3-AS1-WT 的荧光素酶活性 (P< 0. 01), 而未能影响 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 的荧光素酶活 性; 与 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组比较, anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋白水平升高 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数增多 (P< 0. 01)。 结论 干扰 lncRNA PSMA3- AS1 表达可通过促进 miR-3619-5p 而降低宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭能力。  相关文章 | 多维度评价 Select 6. 结肠癌免疫相关 lncRNA 风险预测模型的建立 杨永勤 , 路宁 , 张明鑫, 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 34-39.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.006 摘要 （310）      PDF （3302KB）（215）    可视化    收藏 目的 分析影响结肠癌预后的免疫相关 lncRNA, 并构建预测结肠癌患者预后的相关预测模型。 方法 下载 TCGA 数据库中的结肠癌 lncRNA 表达谱, 数据经 TPM 标准化后分析所有 lncRNA 的差异性表 达, 其中缺失值的补充采用 KNN 法, 通过共表达方法提取并鉴定免疫相关 lncRNA, 然后对差异性表达的 lncRNA 进行 LASSO 回归分析, 再进行单因素和多因素 COX 回归分析。 最后使用 R 4. 0. 2 统计学软件的 ggplot2 包基于 lncRNA 风险评分与基因表达关系, 构建风险因子关联图、 KM 曲线及评价模型预测价值的 ROC 曲线。 结果 经过表达差异性分析发现, 共有 2 258 个 lncRNA 在癌和癌旁组织中差异性表达, 其中上 调的有 1 648 个, 下调的有 610 个。 选取差异表达前 100 位的免疫相关 lncRNA 进行 LASSO 回归分析, 共筛 选出 12 个 lncRNA, 再进行单因素和多因素 COX 回归分析后显示 AC092723. 1、 AC007182. 1 和 AC004947. 1 与预后明显相关, 使用 R 4. 0. 2 统计学软件构建预后风险因子关联图, ROC 曲线显示其预测 1 年、 3 年和 5 年的预测价值均较高, 其 AUC 分别为 0. 79 (95 % CI: 0. 67 ~ 0. 91), 0. 78 (95 % CI: 0. 66 ~ 0. 9), 0. 7 (95 % CI: 0. 51 ~ 0. 9)。 结论 研究使用 TCGA 公共数据库进行生物信息学分析并构建的预后模型显示有 较高的预测价值, 除具有一定的临床意义外, 对未来 lncRNA 相关结肠癌的研究也提供了一定的方向。 相关文章 | 多维度评价 Select 7. IDO1 高表达与肺鳞癌临床分期及不良预后相关  赵肖灵 , 郭军 , 雷秋香 , 刘丹丹 , 张树森 , 廖勇 , 刘登湘 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 40-44.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.007 摘要 （328）      PDF （2078KB）（342）    可视化    收藏 目的 探讨不同分期肺鳞癌组织中 IDO1 的表达情况及与预后的关系。 方法 纳入河北医科大学 附属医院邢台市人民医院胸外科自 2017 年 1 月至 2019 年 1 月开展手术根治的肺鳞癌患者, 留取患者术中 癌组织标本, 用免疫组织化学染色法检测 IDO1 的表达情况, 并对患者进行术后随访。 结果 肺鳞癌组织 中有 IDO1 蛋白表达, 且临床Ⅱ ~ Ⅲ期阳性细胞数显著高于Ⅰ期。 截止随访结束时, 30 例患者中 28 例存 活, 2 例死亡, 疾病稳定 22 例 (73. 3 % ), 疾病进展 8 例 (26. 7 % )。 IDO1 高表达组和低表达组的无进展 生存期 (PFS) 分别为 26 个月和 40 个月, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05); 高临床分期和低临床分期 PFS 分别为 33 个月和 40 个月, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 结论 IDO1 在肺鳞癌中表达量与临床分期有 关, 临床分期越高表达量越高, 患者预后也越差; IDO1 能指导临床分期和预后。 相关文章 | 多维度评价 Select 8. 口腔癌患者中 SOX9、 Beclin1 的表达与预后转归的关系 王小苗, 张岩 , 李少鹏 , 庞真贞 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 45-48.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.008 摘要 （214）      PDF （1337KB）（276）    可视化    收藏 目的 探讨口腔癌患者中性别决定基因盒 9 ( sex-determining region Y box 9, SOX9)、 自噬基因 (Beclin1) 的表达与预后转归的关系。 方法 选取 2017 年 5 月至 2018 年 5 月河北省保定市第一中心医院口 腔科收治的 38 例口腔癌患者, 取其口腔癌组织标本 38 份和癌旁组织标本 30 份, 检测患者口腔癌组织中 SOX9、 Beclin1 的表达情况。 分析 SOX9、 Beclin1 阳性表达与临床病理因素的关系, 采用 COX 分析影响口腔 癌预后转归的危险因素, 分析 SOX9、 Beclin1 与预后转归的关系。 结果 口腔癌组织中 SOX9 和 Beclin1 阳 性表达率显著高于癌旁正常组织 (P< 0. 05), SOX9、 Beclin1 阳性表达与年龄、 性别无关 (P > 0. 05), 与 肿瘤分期、 分化程度和淋巴转移相关 (P< 0. 05)。 对口腔癌预后影响因素采取 Cox 逐步回归分析, 结果显 示肿瘤分期、 淋巴转移、 SOX9、 Beclin1 是影响口腔癌患者预后转归的独立危险因素 (P< 0. 05)。 SOX9 阳 性及阴性表达患者无进展生存期分别为 10 ~ 18 月 [平均 (12. 5 ± 2. 4) 月]、 14 ~ 23 月 [平均 (17. 5 ± 3. 1) 月]; Beclin1 阳性及阴性表达患者无进展生存期分别为 11 ~ 18 月 [平均 (13. 7 ± 2. 4) 月]、 13 ~ 22 月 [平均 (15. 7 ± 3. 1) 月]。 SOX9、 Beclin1 阳性表达患者无进展生存期显著低于阴性表达患者 (c2=7.969、3.315，P＜0.05）。结论 口腔癌患者中 SOX9、 Beclin1 呈阳性表达, 其表达与预后转归密切相关, 口腔癌患者 SOX9、 Beclin1 表达越高预后转归越差。 相关文章 | 多维度评价 Select 9. 基于 TCGA 数据库筛选、 分析并验证宫颈癌生物标志物  熊嘉璐∗, 杨浩∗, 周斌权∗, 吴朝妍, 黄金玲, 周莹 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 49-55.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.009 摘要 （582）      PDF （2077KB）（318）    可视化    收藏 目的 基于生物信息学筛选分析宫颈癌差异表达基因 ( differentially expressed gene, DEGs) 及差 异表达 miRNA, 并进一步对差异基因和蛋白进行验证, 以期寻找潜在的生物标志物和治疗靶点。 方法 从 肿瘤基因组图谱 (the cancer genome atlas, TCGA) 数据库获取宫颈癌相关数据, edgeR 算法筛选 DEGs 和差 异 miRNAs。 利用 Cytoscape3. 8. 2 软件构建 mRNA-miRNA 共表达网络。 利用 DAVID 软件对 DEGs 和通过 miRWalk 网站预测的差异 miRNA 的目标基因进行 GO 富集分析和 KEGG 富集分析。 利用 qPCR 和 Western 印 迹技术对 DEGs 进行进一步验证。 结果 筛选出 149 个上调的 DEGs 和 171 个下调的 DEGs, 以及 46 个上调 的差异 miRNAs 和 64 个下调的差异 miRNAs。 DEGs 和 miRNA 目标基因在细胞组成上的富集具有一致性, 都富集在胞质、 核和核质中。 但共表达网络发现 DEGs 和差异 miRNAs 之间不存在明显的调控关系。 因此, 后续实验重点放在了对 DEGs 的验证上, 对差异表达性较为显著的 TCEAL6、 CLEC3B、 LMOD1、 CNN1 进行 了验证。 qPCR 显示它们在宫颈癌中表达量均显著降低, 符合预期, 对 CNN1 进行的 Western 印迹也显示其 在宫颈癌中的低表达。 结论 TCEAL6、 CLEC3B、 LMOD1、 CNN1 在宫颈癌中均显著低表达, 有望成为宫颈 癌生物标志物。 相关文章 | 多维度评价 Select 10. 幽门螺杆菌感染通过 MDM2 / P53 通路调控食管癌细胞凋亡的作用及机制 沈晓雯, 黄琳玲, 蒋林燕, 沈红梅, 王健 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 56-62.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.010 摘要 （395）      PDF （3756KB）（406）    可视化    收藏 目的 研究幽门螺杆菌 (helicobacter pylori, Hp) 感染通过 MDM2 / P53 通路调控食管癌细胞凋 亡的作用及机制。 方法 收集手术切除的食管癌组织, 检测 Hp 感染情况及 MDM2、 P53 的表达水平。 培养 食管癌 TE-1 细胞株, 给予 Hp 感染、 生理盐水 (NS) 或泛素-蛋白酶体抑制剂 PS341 干预、 转染阴性对照 (NC) siRNA 或 MDM2 siRNA, 检测细胞活力、 凋亡率、 MDM2 及 P53 的表达水平、 P53 的泛素化水平。 结果 Hp 阳性的食管癌组织中 MDM2 的表达水平高于 Hp 阴性的食管癌组织、 P53 的表达水平低于 Hp 阴性 的食管癌组织 (P< 0. 05); Hp 组 TE-1 细胞的细胞活力、 MDM2 表达水平、 P53 泛素化水平高于对照组, 凋亡率、 P53 表达水平低于对照组; PS341 + Hp 组 TE-1 细胞的 P53 的表达水平高于 NS + Hp 组 (P< 0. 05); si-MDM2 + Hp 组 TE-1 细胞的细胞活力、 MDM2 的表达水平、 P53 的泛素化水平均低于 si-NC + Hp 组, 凋亡 率、 P53 的表达水平高于 si-NC + Hp 组 (P< 0. 05)。 结论 Hp 感染抑制食管癌细胞凋亡的作用与增加 MDM2 表达、 促进 P53 的泛素化降解有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 11. CHRDL1 调节结直肠癌增殖、 迁移和侵袭 郁昊 , 万炳年 , 刘艳萍 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 63-69.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.011 摘要 （350）      PDF （5615KB）（269）    可视化    收藏 目的 探讨腱蛋白样蛋白 1 (chordin-like 1, CHRDL1) 对结直肠癌 (colorectal cancer, CRC) 进 展的调节作用。 方法 数据库分析 CHRDL1 与 CRC 进展、 预后关系, 构建 CHRDL1 过表达 SW480、 HT29 细胞系并检测细胞增殖、 迁移和侵袭, 体外移植瘤实验检测肿瘤生长, 分析 CHRDL1 过表达对 CRC 细胞迁 移和侵袭作用机制。 结果 CHRDL1 在 CRC 进展中呈高表达且可影响预后。 CHRDL1 过表达可促进细胞增 殖、 迁移、 侵袭和移植瘤生长, 促进 Vimentin、 N-Cadherin、 snail 表达, 抑制 E-Cadherin 表达, CHRDL1 与 snail 存在互作关系, 干扰 snail 表达可逆转上述指标趋势。 结论 CHRDL1 可促进 CRC 细胞增殖, 还可通 过 Snail 促进 CRC 细胞上皮间质转化来发挥促进细胞迁移、 侵袭作用。 相关文章 | 多维度评价 Select 12. HBV HBx 蛋白调控肝癌细胞增殖的机制研究 宋平辉 , 张毅 , 吴忠坤 , 李春博 , 李勤新 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 70-77.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.012 摘要 （338）      PDF （3128KB）（598）    可视化    收藏 目的 探讨 HBV HBx 蛋白调控肝癌细胞增殖的潜在机制。 方法 过表达 HBx 后, 检测肝癌细胞 HepG2 的增殖水平。 在过表达 Flag-HBx 的肝癌细胞 HepG2 中免疫共沉淀 HBx 后进行蛋白质质谱鉴定, Score 阈值设定为大于 50, Coverage 阈值设定为大于 10。 过表达 HBx 的肝癌细胞 HepG2 中, 使用 siRNA 敲 低质谱鉴定的相应基因, 检测 HepG2 的增殖水平。 结果 过表达 Flag-HBx 后, 肝癌细胞 HepG2 的增殖水 平上升 (P< 0. 05)。 与对照组比较, 敲低 MCUR1 后肝癌细胞 HepG2 的增殖水平下降 (P< 0. 05)。 与对照 组比较, 同时过表达 MCUR1 和 HBx 能够促进肝癌细胞 HepG2 的增殖 (P< 0. 05), 而仅过表达 MCUR1 对 肝癌细胞 HepG2 的增殖无显著影响。 与过表达 HBx 组比较, 过表达 HBx 的同时敲低 MCUR1 时肝癌细胞 HepG2 的增殖水平下降 (P< 0. 05)。 与对照组比较, 过表达 HBx 后肝癌细胞 HepG2 的 ROS 水平上升 (P< 0. 05); 与对照组比较, 过表达 HBx 的同时敲低 MCUR1 时肝癌细胞 HepG2 的 ROS 水平无显著变化。 与对 照组或过表达 HBx 组比较, 同时过表达 MCUR1 和 HBx 能够增加肝癌细胞 HepG2 的 ROS 水平 (P< 0. 05)。 与过表达 HBx 组比较, 过表达 HBx 的同时敲低 MCUR1 时肝癌细胞 HepG2 的增殖水平下降 (P< 0. 05), 但 这种下降能被 H2O2恢复。 与对照组比较, 过表达 HBx 后肝癌细胞 HepG2 中转录因子 Nrf2 在细胞核中的定 位增加 (P< 0. 05), 而过表达 HBx 的同时敲低 MCRU1 后 Nrf2 在细胞核中的定位无显著变化。 与对照组比 较, 过表达 HBx 后肝癌细胞 HepG2 中转录因子 Notch 的激活形式 NICD1 在细胞核中的定位增加 ( P< 0. 05), 而过表达 HBx 的同时 Nrf2 抑制剂 ML385 处理后 NICD1 在细胞核中的定位无显著变化。 与过表达 HBx 组比较, 过表达 HBx 的同时 ML385 处理后肝癌细胞 HepG2 的增殖水平下降 (P< 0. 05)。 与过表达 HBx 组比较, 过表达 HBx 的同时 Notch 抑制剂 IMR-1 处理后肝癌细胞 HepG2 的增殖水平下降 (P< 0. 05)。 结论 HBx 促进 HepG2 细胞增殖与 MCUR1 / ROS / Nrf2 / Notch 轴有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 13. 连翘苷对肥胖症大鼠脂代谢紊乱和氧化应激的影响及机制研究  郑桃, 田雪飞, 胡青松, 刘念娇 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 78-83.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.013 摘要 （333）      PDF （2192KB）（218）    可视化    收藏 目的 探究连翘苷对肥胖症大鼠模型脂代谢紊乱和氧化应激的影响。 方法 采用高脂饲料喂养 建立肥胖症大鼠模型 (将大鼠随机分为 6 组: 对照组、 模型组、 连翘苷 5 mg / kg 组、 连翘苷 10 mg / kg 组、 连翘苷 20 mg / kg 组和二甲双胍组); 检测大鼠体重; 卷尺测量肛鼻长计算 Lee’s 指数; 血糖仪检测血糖水 平; 油红 O 染色检测脂质蓄积程度; 全自动生化分析仪检测 TC、 TG、 LDL-C 和 HDL-C 水平; 试剂盒检测 ALT、 AST、 ALP 水平和 SOD、 MDA、 GSH-Px 含量。 Western 印迹检测 p-Nrf2、 Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平。 结果 与对照组相比较, 模型组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平升高, TC、 TG 和 LDL-C 水平升高, HDL-C 水平降低, ALT、 AST 和 ALP 水平升高, SOD、 GSH-Px 含量降低, MDA 含量升高, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平降低, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 与模型组相比较, 连翘苷 10、 20 mg / kg 组和 二甲双胍组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平降低, 脂质蓄积程度明显改善, TC、 TG 和 LDL-C 水平降低, HDL-C 水平升高, ALT、 AST 和 ALP 水平降低, SOD、 GSH-Px 含量升高, MDA 含量降低, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平升高, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 结论 连翘苷可改善肥胖症大鼠模型氧化应激 及脂代谢紊乱, 这可能是通过活化 Nrf2 / HO-1 信号通路实现的。  相关文章 | 多维度评价 Select 14. 多指 (趾) 致病基因研究进展 文龙 , 刘福云 , 夏冰 , 董延召 , 段世超 , 胡伟明 , 屈玉冉 , 王骄阳 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 84-89.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.014 摘要 （474）      PDF （809KB）（630）    可视化    收藏 多指 (趾) 畸形是最常见肢体畸形之一, 具有遗传性, 分为综合征型和非综合征型两大类型。 非综合征型按照解剖位置可分为轴前、 轴后及中央型多指, 综合征型多指 (趾) 是指除多指表型以外, 还 伴随其他症状。 近些年, 多用连锁分析、 全外显子测序等对相关致病基因的定位及突变进行分析, 并通过 分析突变的基因所表达的蛋白, 了解其对相关信号通路可能产生的影响。 通过总结多指 (趾) 畸形主要致 病基因最新研究及影响肢体前后模式主要通路, 旨在了解多指 (趾) 致病基因的研究方向和热点, 为今后 能在胚胎阶段阻断多指 (趾) 形成的研究提供依据和思路。 相关文章 | 多维度评价 Select 15. TRPC6 突变致足细胞病变机制的研究进展  蒲金赟, 周建华 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 90-96.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.015 摘要 （379）      PDF （1233KB）（1267）    可视化    收藏 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 (transient channel receptor potential cation 6, TRPC6) 是肾脏足细 胞裂孔隔膜 (slit diaphragm, SD) 的重要组成蛋白之一, 与肌动蛋白、 足细胞表面蛋白以及其他裂孔隔膜 蛋白分子相互作用, 共同维持足细胞的正常功能。 TRPC6 过表达或过度活动导致细胞内钙超载而损伤足细 胞。 目前报道 TRPC6 基因致病突变可导致局灶节段性肾小球硬化症。 近来研究发现, TRPC6 与以蛋白尿为 主要表现的肾小球疾病的发生发展密切相关, 但尚无特效靶向药物应用于临床。 文章主要对 TRPC6 基因突 变致足细胞病变的分子机制以及 TRPC6 基因型与临床表型之间的关系进行了综述。  相关文章 | 多维度评价 Select 16. 肿瘤相关成纤维细胞来源的趋化因子在肺癌中的作用研究进展 徐新佳, 俞万钧, 王华英 医学分子生物学杂志    2023, 20 (1): 97-102.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.01.016 摘要 （420）      PDF （800KB）（671）    可视化    收藏 肺癌是全球癌症相关死亡的首要病因, 其 5 年生存率仅约 16 % 。 肿瘤相关成纤维细胞 ( cancer-associated fibroblasts, CAFs) 作为肿瘤微环境 (tumor microenvironment, TME) 中的主要宿主细胞, 在肺癌 发生和进展中起着重要调控作用。 CAFs 来源的趋化因子通过与受体结合激活下游信号通路在肿瘤增殖、 侵 袭、 转移、 血管生成、 耐药、 放疗抵抗、 免疫逃逸等方面发挥作用。 文章归纳了 CAFs 来源的趋化因子在 肺癌中的作用研究最新进展, 探讨了其在肺癌诊治中的潜力, 为未来肺癌诊治提供新的靶点和方向。 相关文章 | 多维度评价 Select 17. 基于 Wnt 信号通路探讨原花青素改善骨质疏松症的作用与分子机制 冯阳阳, 赵程锦, 周煜虎, 曹博, 段明明, 张亮亮 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 103-109.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.001 摘要 （541）      PDF （2815KB）（310）    可视化    收藏 目的 基于 Wnt 信号通路探讨原花青素改善骨质疏松症的作用与分子机制。 方法 取 50 只 SD 雌性大鼠通过卵巢切除术构建骨质疏松症大鼠模型, 将建模成功的大鼠随机分为模型组、 阿仑膦酸钠组和 原花青素低、 中、 高剂量组。 另取 10 只 SD 大鼠记为对照组, 对照组仅翻动双侧卵巢不做切除。 阿仑膦酸 钠组按 1 mg / kg 灌胃给予阿仑膦酸钠; 原花青素低、 中、 高剂量组分别按 15、 25、 35 mg / kg 灌胃给予原花 青素; 对照组、 模型组分别灌胃给予等量生理盐水。 酶联免疫测试法 (ELISA) 测定各组大鼠血清氧化应 激相关指标 [丙二醛 (MDA)、 超氧化物歧化酶 (SOD)、 谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)] 水平和骨代谢 指标 [抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)、 Ⅰ型胶原羧基末端肽 (PICP)、 血清骨钙素 (BGP)] 含量; 骨密度 扫描仪扫描检测各组大鼠股骨的骨密度 (BMD) 值; 苏木素-伊红 (HE) 染色观察各组大鼠骨组织形态学 变化; 实时荧光定量聚合酶链式反应 (RT-PCR) 和蛋白免疫印迹法 (WB) 检测骨组织 Wnt、 β-连环蛋白 (β-catenin)、 成骨标志蛋白 [Runt 相关转录因子 2 (Runx2)、 Osterix] mRNA 和蛋白表达。 结果 与对照 组比较, 模型组、 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠血清 MDA、 TRAP 升高, SOD、 GSH-Px、 PICP、 BGP 降低 (P< 0. 05); 与模型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠股骨血清 MDA、 TRAP 降低, SOD、 GSH-Px-PICP、 BGP 升高 (P< 0. 05)。 对照组大鼠骨小梁呈网状排列、 连接紧 密。 模型组骨小梁数量降低、 排列稀疏紊乱、 连续性差。 与模型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组骨小梁数量及结构上均存在不同程度的改善。 与对照组比较, 模型组、 阿仑膦酸钠组和原花青素 低、 中、 高剂量组大鼠骨组织 Wnt、 β-catenin、 Runx2、 Osterix mRNA 及蛋白表达均降低 (P< 0. 05), 与模 型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠骨组织 Wnt、 β-catenin、 Runx2、 Osterix mRNA 及蛋白表达均升高 (P< 0. 05)。 结论 原花青素能有效改善骨质疏松症大鼠氧化应激和骨代谢指标, 发挥 治疗骨质疏松症的作用, 推测是通过调控 Wnt 通路抑制过氧化应激反应, 促进 Wnt、 β-catenin 及成骨标志 蛋白 Runx2、 Osterix 的表达实现此作用的。 相关文章 | 多维度评价 Select 18. 敲低 CXCL8 抑制口腔鳞癌的细胞增殖和转移  邓亮亮, 张先梅, 黄婧, 朱彬, 周奇 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 110-116.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.002 摘要 （318）      PDF （3972KB）（260）    可视化    收藏 目的 探究在 CXC 基序趋化因子配体 8 (CXC motif chemokine ligand 8, CXCL8) 在口腔鳞癌 (oral squamous cell carcinoma, OSCC) 中的作用。 方法 实时荧光定量 PCR (quantitative real-time PCR, RT-qPCR) 和 Western 印迹检测 OSCC 组织和细胞中 CXCL8 的表达; 分析 CXCL8 表达与 OSCC 患者临床病理特 征的相关性; 细胞计数试剂盒 8 (cell counting kit-8, CCK-8), 克隆形成、 流式细胞术、 划痕实验、 Transwell 实验和 Western 印迹检测 CXCL8 敲低对细胞增殖、 凋亡、 迁移、 侵袭和上皮间质转化 (epithelial-mesenchymal transition, EMT) 的影响。 结果 CXCL8 在 OSCC 组织和细胞中的表达显著上调。 CXCL8 高水平 与肿瘤大小、 TNM 分期和远处转移显著相关。 CXCL8 的敲低可以抑制 SCC9 细胞增殖、 迁移、 侵袭和 EMT, 促进细胞凋亡。 结论 CXCL8 在 OSCC 中高表达, 敲低其表达可抑制 SCC9 细胞的增殖和转移。 相关文章 | 多维度评价 Select 19. HIF-1α 基因干扰缓解高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡、炎症和细胞外基质沉积 杨小华, 肖健, 王波, 李蓉 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 117-122.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.003 摘要 （405）      PDF （1767KB）（878）    可视化    收藏 目的 探讨缺氧诱导因子 1α (hypoxia inducible factor 1α, HIF-1α) 基因干扰对高糖 (HG) 诱导 的肾小管上皮细胞 (HK-2) 凋亡、 炎症和细胞外基质 (ECM) 沉积的影响。 方法 将 HK-2 细胞分为 4 组: 对照组; HG 组; HG + shRNA-NC 组; HG + HIF-1α-shRNA 组。 按分组处理细胞后, 实时定量聚合酶链 反应检测 HIF-1α 和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (NGAL) 的表达水平; 细胞计数试剂盒 8、 流式 细胞术和酶联免疫吸附试验分别检测细胞增殖、 凋亡和炎性因子的含量; 免疫印迹检测蛋白表达。 结果 与 HG 组相比较, HG + HIF-1α-shRNA 组 HIF-1α 和 NGAL mRNA 和蛋白表达水平降低, 细胞增殖倍数升高, 细胞凋亡率降低, 白细胞介素-6 (IL-6) 和肿瘤坏死因子-α 水平降低, IL-10 水平升高, 组织金属蛋白酶抑 制物 l 和 I 型胶原蛋白表达水平降低, 基质金属蛋白酶 9 蛋白表达水平升高 (P< 0. 01)。 结论 HIF-1α 基 因干扰缓解 HG 诱导的 HK-2 细胞凋亡、 炎症和 ECM 沉积。  相关文章 | 多维度评价 Select 20. PTEN-Long 在胃癌细胞中的表达及其过表达对 PI3K/ AKT 信号 通路及细胞生长和凋亡的影响 周巧辉, 艾耀伟, 李玲, 颜学良 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 123-128.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.004 摘要 （215）      PDF （5115KB）（301）    可视化    收藏 目的 探讨 PTEN-Long 在胃癌细胞中的表达及其对胃癌细胞 ( SGC-7901) 增殖、 凋亡的影响。 方法 RT-qPCR 与 Western 免疫印迹检测胃癌细胞中 PTEN-Long mRNA 及蛋白表达水平, 选择最佳干预细 胞系, 将携带 PTEN-Long 基因的重组慢病毒载体转染 SGC-7901 细胞 (PTEN-Long 组), 转染空载慢病毒作 为 NC 组, 未转染细胞作为 Control 组, 检测转染效率; MTT 法与 Edu 染色检测细胞增殖; 流式细胞仪检测 细胞周期与细胞凋亡; Western 免疫印迹检测 P27、 cyclin D1 及 PI3K/ AKT 通路相关蛋白表达。 结果 PTEN-Long mRNA 及蛋白在胃癌细胞表达水平显著降低 (P< 0. 05), 在 SGC-7901 细胞中表达水平最低, 选 择 SGC-7901 细胞进行后续实验; RT-qPCR 与 Western 免疫印迹证实慢病毒转染成功; 与 Control 组和 NC 组 相比, PTEN-Long 组细胞增殖活性显著降低, G0 / G1 期的细胞比例显著升高, G2 / M、 S 期细胞比例显著降 低 (P< 0. 05), 细胞凋亡率显著升高, P27 蛋白表达水平显著升高, p-PI3K、 p-AKT、 Cyclin D1 蛋白表达 水平显著降低 (P< 0. 05)。 结论 PTEN-Long 在胃癌中下调表达, 过表达 PTEN-Long 可通过抑制 PI3K/ AKT 信号通路激活抑制胃癌细胞增殖, 促进细胞凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 21. PD-L1 失调介导了埃克替尼对 EGFR 突变晚期非小细胞肺癌的影响  贾瑞, 王超, 李健 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 129-134.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.005 摘要 （339）      PDF （3764KB）（392）    可视化    收藏 目的 利用表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor, EGFR) 突变非小细胞肺癌 (non-small cell lung cancer, NSCLC) 细胞探究程序性细胞死亡配体 1 (programmed cell death ligand 1, PD-L1) 在埃克替尼抗性中的潜在作用。 方法 采用实时荧光定量 PCR ( qRT-PCR) 和 Western 印迹检测 A549、 HCC827 和 PC-9 细胞中 p-EGFR 和 PD-L1 的表达水平。 MTT 方法评估 HCC827 和 PC-9 细胞对埃克替 尼的敏感性。 采用 PD-L1 敲除来评估对埃克替尼敏感性的影响, 并使用小鼠异形移植模型进行体内实验。 结果 与 A549 细胞比较, HCC827 和 PC-9 细胞中 p-EGFR 和 PD-L1 水平较高。 埃克替尼对 HCC827 和 PC-9 细胞增殖有显著的抑制作用, 并激活细胞凋亡。 敲除 PD-L1 显著降低了埃克替尼对 HCC827 和 PC-9 细胞的 抑制作用。 与 sh-NC + 埃克替尼组比较, PD-L1 敲除在体内降低对埃克替尼的敏感性。 结论 埃克替尼对 EGFR 突变 NSCLC 细胞有抑制作用, PD-L1 有助于 EGFR 突变 NSCLC 细胞对埃克替尼的敏感性。 相关文章 | 多维度评价 Select 22. miR-3682-3p 通过调控 PI3K/ AKT 信号通路影响 SMMC-7721 人 肝癌细胞的增殖、 侵袭和凋亡 利民 , 韩思源 , 李苏明 , 郑超 , 舒苗江 , 龚祖元 , 张涛 , 杨森 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 135-140.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.006 摘要 （389）      PDF （3532KB）（245）    可视化    收藏 目的 分析 miR-3682-3p 与 PI3K/ AKT 信号通路在肝细胞癌发展中的关系, 以期为肝细胞癌的治 疗提供新的思路。 方法 通过 qRT-PCR 分析 MIHA 人正常肝细胞和 SMMC-7721 人肝癌细胞中 miR-3682-3p 与 PI3K/ AKT 的表达水平。 通过转染不同质粒将 SMMC-7721 人肝癌细胞分为 miR-3682-3p mimic 组、 miR-3682-3p mimic NC 组、 miR-3682-3p inhibitor 组和 miR-3682-3p inhibitor NC 组, 采用双荧光素酶报告基因实验 分析 miR-3682-3p 与 PI3K 的相互作用关系。 采用蛋白免疫印迹、 qRT-PCR、 流式细胞术、 细胞划痕和 Transwell 实验分析不同实验组细胞的增殖、 侵袭和凋亡情况。 结果 miR-3682-3p 能够靶向调控 PI3K/ AKT 信号 通路, miR-3682-3p 表达能够激活 PI3K/ AKT 信号通路, 肝癌细胞的增殖、 迁移和侵袭能力增强, 凋亡减 少。 而抑制 miR-3682-3p 表达后, PI3K/ AKT 通路受到抑制, 肝癌细胞的增殖、 迁移和侵袭能力减弱, 凋亡 增加。 结论 PI3K 是 miR-3682-3p 的直接靶点, miR-3682-3p 通过激活 PI3K/ AKT 通路促进 SMMC-7721 人肝 癌细胞的体外转移活性。 相关文章 | 多维度评价 Select 23. PCA3 调控 miR-185 对霍奇金淋巴瘤细胞 L428 增殖和凋亡的影响 刘慧 , 王佳 , 张虹丽 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 141-147.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.007 摘要 （224）      PDF （2463KB）（195）    可视化    收藏 目的 探讨 PCA3 对霍奇金淋巴瘤细胞 L428 增殖和凋亡的影响及可能机制。 方法 收集 39 例霍 奇金淋巴瘤患者淋巴瘤组织和正常瘤旁组织, RT-qPCR 检测组织中 PCA3 和 miR-185 表达水平。 体外培养 淋巴瘤 L428 细胞, 分为 si-NC 组、 si-PCA3 组、 si-PCA3 + NC 组、 si-PCA3 + miR-185 inhibitor 组, CCK-8 法 检测细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡, RT-qPCR 法检测 PCA3 和 miR-185 表达水平。 双荧 光素酶报告基因实验验证 PCA3 和 miR-185 的调控关系。 结果 淋巴瘤组织中 PCA3 的表达升高, miR-185 的表达降低 (P< 0. 05); 转染 si-PCA3 可抑制细胞增殖, 阻滞细胞周期, 促进细胞凋亡。 PCA3 靶向负调控 miR-185 表达。 共转染 si-PCA3、 miR-185 inhibitor 可降低转染 si-PCA3 对细胞增殖、 细胞周期、 凋亡的作 用。 结论 干扰 PCA3 表达可靶向负调控 miR-185 抑制淋巴瘤细胞 L428 增殖, 并促进 L428 细胞凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 24. 佛手苷内酯下调 miR-503 表达抑制高糖诱导的肾小管上皮 细胞炎性因子表达和细胞凋亡 杨玉玺 , 李雪梅 , 吉黎 , 黄俊 , 尉冬英 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 148-153.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.008 摘要 （231）      PDF （3270KB）（147）    可视化    收藏 目的 考察佛手苷内酯 ( bergapten, BG) 是否通过下调 miR-503 表达抑制高糖 ( high glucose, HG) 诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。 方法 将肾小管上皮细胞分为正常对照 (Con) 组、 高糖 (HG) 组、 高糖 + BG 低、 中、 高浓度 (HG + BG-L、 -M、 -H) 组、 HG + inhibitor-NC 组、 HG + miR-503 inhibitor 组、 HG + BG + miR-NC 组、 HG + BG + miR-503 组。 利用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 测 定炎性因子肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、 白细胞介素-6 (IL-6) 表达, 流式细胞术测定细胞凋亡, Western 印 迹测定凋亡蛋白裂解天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 ( cleaved-caspase) 3、 cleaved-caspase 9 表达, qRTPCR 测定 miR-503 表达。 结果 HG 组肾小管上皮细胞的 TNF-α、 IL-6 表达、 凋亡率、 cleaved-caspase 3、 cleaved-caspase 9 蛋白、 miR-503 表达量均比 Con 组增加 (P均< 0. 05)。 HG + BG-L 组、 HG + BG-M 组、 HG + BG-H 组肾小管上皮细胞的 TNF-α、 IL-6 表达、 凋亡率、 cleaved-caspase 3、 cleaved-caspase 9 蛋白、 miR-503 表达量均比 HG 组减少 (P均< 0. 05), 且 BG 的抑制作用呈现浓度依赖性。 干扰 miR-503 表达后, HG + miR-503 inhibitor 组肾小管上皮细胞的 miR-503 表达量、 TNF-α、 IL-6 表达、 凋亡率、 cleaved-caspase 3 蛋白、 cleaved-caspase 9 蛋白均比 HG + inhibitor-NC 组降低 (P均 < 0. 05)。 HG + BG + miR-503 组肾小管上皮细胞的 miR-503 表达量、 TNF-α、 IL-6 表达、 凋亡率、 cleaved-caspase 3 蛋白、 cleaved-caspase 9 蛋白表达量均高于 HG + BG + miR-NC 组 (P均 < 0. 05)。 结论 BG 通过下调 miR-503 的表达, 以浓度依赖方式抑制高糖诱导的 肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 25. 基于 NLRP3 / caspase-1 通路研究木犀草素对脂多糖诱导的肠上皮细胞焦亡的影响 李红心 , 张玉枝 , 刘静 , 李涓 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 154-159.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.009 摘要 （403）      PDF （1206KB）（329）    可视化    收藏 目的 探讨木犀草素对脂多糖 (LPS) 诱导的肠上皮细胞焦亡及核苷酸结合寡聚化结构域样受体 家族吡啉结构域蛋白 3 (NLRP3) / 半胱氨酸蛋白酶 1 (caspase-1) 通路的影响。 方法 体外培养人肠上皮 细胞 HIEC-6, 对其进行 (1. 0 μg / mL) LPS 诱导, 并将细胞分为对照组、 LPS 组、 LPS + (25、 50、 100 μmol / L) 木犀草素组、 木犀草素 + NLRP3 激活剂尼日利亚菌素钠盐 (NSS) 组, 除对照组外均添加 1. 0 μg / mL 的 LPS。 MTT 法检测各组细胞活力; 电阻仪检测单层上皮跨膜电阻 ( TEER); 酶联免疫吸附 (ELISA) 法检测各组细胞上清液乳酸脱氢酶 (LDH)、 肿瘤坏死因子 α (TNF-α)、 白介素-6 ( IL-6) 水平; 蛋白免疫印迹 (WB) 法检测各组细胞焦亡相关蛋白 (GSDMD、 GSDMD-N) 及 NLRP3、 caspase-1、 IL-1β 的表达。 结果 与对照组比较, LPS 组 HIEC-6 细胞活力、 TEER 值显著降低, 细胞上清液 LDH 水平、 TNF-α、 IL-6、 蛋白 GSDMD、 GSDMD-N、 NLRP3、 caspase-1、 IL-1β 表达显著升高 (P< 0. 05); 与 LPS 组比较, LPS + (25、 50、 100 μmol / L) 木犀草素组 HIEC-6 细胞活力、 TEER 值显著升高, 细胞上清液 LDH 水平、 TNF-α、 IL-6、 GSDMD、 GSDMD-N、 NLRP3、 caspase-1、 IL-1β 表达显著降低 ( P < 0. 05 ); 与 LPS + 100 μmol / L 木犀草素组比较, 木犀草素 + NSS 组 HIEC 细胞活力、 TEER 值显著降低, 细胞上清液 LDH 水平、 TNF-α、 IL-6、 GSDMD、 GSDMD-N、 NLRP3、 caspase-1、 IL-1β 表达显著升高 (P< 0. 05)。 结论 木犀草素 能够减轻 LPS 诱导的人肠上皮细胞 HIEC-6 焦亡和细胞炎性损伤, 可能与 NLRP3 / caspase-1 信号通路的抑制 有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 26. 肉桂醛调节 IL-6 / JAK2 / STAT3 信号通路对变应性鼻炎大鼠鼻 黏膜细胞凋亡的影响 谷牧, 杨丽辉 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 160-165.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.010 摘要 （335）      PDF （4715KB）（214）    可视化    收藏 目的 探讨肉桂醛对变应性鼻炎 (allergic rhinitis, AR) 大鼠鼻粘膜细胞凋亡的影响及机制。 方 法 构建大鼠 AR 模型, 并随机分为 AR 组、 肉桂醛低、 中、 高剂量组和氯雷他定组, 另选 10 只大鼠为假 手术组 (sham 组)。 检测大鼠血清 IL-6 水平、 鼻粘膜组织细胞凋亡和 IL-6、 JAK2、 STAT3 mRNA 表达以及 JAK2、 p-JAK2、 STAT3、 p-STAT3、 Bcl-2 及 Bax 蛋白表达。 结果 与 sham 组比, AR 组大鼠血清 IL-6 水平、 鼻粘膜组织 IL-6 mRNA 及 p-JAK2 / JAK2、 p-STAT3 / STAT3 和 Bcl-2 蛋白表达均升高 (P< 0. 05), 细胞凋亡 指数 (AI) 和 Bax 蛋白表达降低 (P< 0. 05); 与 AR 组比, 肉桂醛低、 中、 高剂量组和氯雷他定组大鼠血 清 IL-6 水平、 鼻粘膜组织 IL-6 mRNA 及 p-JAK2 / JAK2、 p-STAT3 / STAT3 和 Bcl-2 蛋白表达均降低 ( P < 0. 05), AI 和 Bax 蛋白表达升高 (P< 0. 05)。 结论 肉桂醛可促进 AR 大鼠鼻粘膜细胞凋亡, 其机制可能与 抑制 IL-6 / JAK2 / STAT3 通路有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 27. 鼠李黄素保护糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑损伤  张萍, 苟芳, 任嵘 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 166-172.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.011 摘要 （272）      PDF （3475KB）（208）    可视化    收藏 目的 探究鼠李黄素 (Rhamnetin) 保护糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑损伤的可能机制。 方法 构 建糖尿病大鼠模型, 以线栓法建立脑缺血再灌注, 予以 50、 100 及 200 mg / kg Rhamnetin 灌胃, 给药 14 d 后 检测脑组织含水率、 脑指数、 细胞凋亡、 血清炎性因子、 凋亡及炎性反应标志物、 Notch1 及 P38 丝裂原活 化蛋白激酶 (P38 MAPK) 蛋白表达。 并添加 Notch1 激活剂 Jagged1, 观测各组 Notch1、 P38 MAPK 蛋白表 达。 结果 Rhamnetin 中、 高剂量干预后, 大鼠跳台错误次数、 脑指数、 脑组织含水率、 细胞凋亡率、 IL-6、 IL-1β、 TNF-α、 cleaved caspase-3 / caspase-3、 cleaved caspase-9 / caspase-9、 p-Notch1 / Notch1 及 p-P38 MAPK/ P38 MAPK 减少, 进入新异臂次数和 IL-10 增加 (P< 0. 05); 且 Rhamnetin 可抑制 Jagged1 对 Notch1- P38 MAPK 信号轴的激活 (P< 0. 05)。 结论 鼠李黄素可保护糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤, 可能 与下调 Notch1-P38 MAPK 信号轴, 减轻炎性反应有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 28. 蜘蛛香总黄酮调控 miR-4429 影响胃癌 AGS 细胞的增殖、 迁移及侵袭 赵伟军, 苗艳凌, 斯日古楞, 李玉石 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 173-178.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.012 摘要 （269）      PDF （6830KB）（253）    可视化    收藏 目的 探讨蜘蛛香总黄酮 (total flavonoids from Valeriana jatamansi Jones, TFV) 对胃癌 AGS 细胞 增殖、 迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。 方法 体外培养人胃癌细胞 AGS, 随机分为 Con 组、 TFV-L 组、 TFV-M 组、 TFV-H 组、 miR-NC 组、 miR-4429 组、 TFV + anti-miR-NC 组、 TFV + anti-miR-4429 组。 qRT-PCR, CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 划痕实验和 Transwell 实验分别检测 miR-4429 表达, 细胞增殖、 克隆形成能力、 细胞迁移和侵袭情况; Western 免疫印迹检测 E-cadherin、 N-cadherin 蛋白表达量。 结果 与 Con 组比较, TFV-L 组、 TFV-M 组、 TFV-H 组细胞 E-cadherin 蛋白水平、 增殖抑制率和 miR-4429 的表达 量升高 (P< 0. 05), N-cadherin 蛋白水平和划痕愈合率降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减 少 (P< 0. 05), 且呈剂量依赖性; 与 miR-NC 组比较, miR-4429 组细胞增殖抑制率和 E-cadherin 蛋白水平升 高 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平降低 (P < 0. 05); 与 TFV + anti-miR-NC 组比较, TFV + anti-miR-4429 组细胞增殖抑制率和 E-cadherin 蛋白水平降低 (P<0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多 (P<0. 05), 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05)。 结论 蜘蛛香总黄酮可抑制胃癌 AGS 细胞增殖、 迁移及侵袭, 其抗肿瘤机制与上调 miR-4429 表达有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 29. 机械敏感离子通道 Piezo2 与疼痛相关性研究与应用展望 金漪澜 , 徐瑶瑶 , 李熳 , 方铁根 , 吴偲 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 179-183.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.013 摘要 （828）      PDF （811KB）（5738）    可视化    收藏 Piezo2 作为 Piezo 通道家族的一员, 是一种表达于背根神经节的感觉神经元亚群的能快速适应、 机械激活的阳离子通道, 它能够将机械性刺激转化为机械敏感性电流, 以控制体表本体觉、 触觉和痛觉的 产生。 如今越来越多的研究表明 Piezo2 在多种痛觉的产生与传导方面有着重要作用。 文章总结整理了机械 敏感离子通道 Piezo2 的结构、 功能及其参与疼痛相关性疾病的发生过程, 以展望其作为可能的干预靶点在 疼痛的治疗思路中的应用。 相关文章 | 多维度评价 Select 30. 多发性骨髓瘤免疫微环境的研究进展 吴秀英, 常进 医学分子生物学杂志    2023, 20 (2): 184-188.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.014 摘要 （477）      PDF （810KB）（1316）    可视化    收藏 多发性骨髓瘤 (multiple myeloma, MM) 作为血液系统第二大常见的恶性肿瘤, 尽管在近几十年 其疗效取得了重大提升, 然而目前仍无法治愈。 研究发现这与免疫微环境中细胞与非细胞成分, 如间充质 基质细胞介导免疫逃逸, 破骨细胞活性增高, 成骨细胞分化受损及免疫细胞、 细胞因子的免疫功能异常促 进骨髓瘤细胞的增殖、 存活和耐药密切相关, 与此同时还伴随许多新型治疗工具的产生。 因此, 深入探究 上述成分与骨髓瘤细胞相互作用, 有望为 MM 的临床治疗提供新思路和策略。  相关文章 | 多维度评价 Select 31. 胆绿素还原酶在巨噬细胞分化模型中表达情况 胡芝芝, 裴广畅, 曾锐, 徐钢 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 188-195.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.001 摘要 （460）      PDF （3017KB）（501）    可视化    收藏 目的 探讨巨噬细胞分化模型中 BVR 的表达情况 方法 体外培养 L929 细胞 2 d, 收集 L929 细 胞上清, 用此培养基来体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞 7 d, 分别用 LPS 100 ng / mL 和 IFN-γ 100 ng / mL、 IL-4 10 ng / mL 和 IL-13 10 ng / mL 刺激 24 h 后收集细胞。 用 Western 印迹检测 INOS 和 ARG-1 的表达; 用流 式细胞术检测 CD45、 F4 / 80、 CD11b、 CD86 和 DECTIN-1 的表达; 用 RT-PCR 检测 INOS、 ARG-1、 FN 和 FIZZ1 的表达来判断 M1 和 M2 的模型是否建立成功, 然后在巨噬细胞模型中检测 BVR 的表达。 同时在 RAW264. 7 细胞系构建的巨噬细胞分化模型中检测 BVR 的表达。 结果 ① Western 印迹发现 LPS 和 IFN-γ 组 (M1 巨噬细胞) INOS 表达增加, IL-4 和 IL-13 组 (M2 巨噬细胞) ARG-1 表达增加; ② 流式细胞术发 现 LPS 和 IFN-γ 组巨噬细胞中 CD86 表达增加, IL-4 和 IL-13 组巨噬细胞中 DECTIN-1 表达增加; ③ RT-PCR 发现 LPS 和 IFN-γ 组巨噬细胞中 INOS 和 TNF-α 表达增加; IL-4 和 IL-13 组巨噬细胞中 ARG-1、 FN 和 FIZZ1 表达增加; ④ RT-PCR 发现在小鼠骨髓来源的巨噬细胞和 RAW264. 7 细胞系巨噬细胞分化模型中 BVR 均在 M1 表达降低, 在 M2 中表达增加。 结论 ① LPS 和 IFN-γ, IL-4 和 IL-13 刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞构建 M1 和 M2 模型成功; ② BVR 在小鼠骨髓来源巨噬细胞和小鼠单核巨噬细胞系构建的巨噬细胞分化模型中 均在 M1 中表达降低, 在 M2 中表达增加。 相关文章 | 多维度评价 Select 32. miR-485 缓解脑缺血再灌注损伤和 OGD/ R 诱导的 BV2 细胞凋亡 谢艾伶, 张敏, 唐月月, 赵莉, 吴雨娟, 王亚梅 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 196-201.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.002 摘要 （453）      PDF （2335KB）（857）    可视化    收藏 目的 探讨 miR-485 对脑缺血再灌注损伤 (CI/ R) 和氧糖剥夺/ 复供 (OGD/ R) 诱导 BV2 细胞 凋亡的影响。 方法 在体实验: 通过线栓法制备大鼠 CI/ R 损伤模型, 给予尾静脉注射 agomir-485 干预, 观 察大鼠再灌注 24 h 时脑损伤情况。 离体实验: 构建 miR-485 过表达 BV2 细胞系并给予 OGD/ R 诱导, 观察 细胞凋亡、 氧化应激情况。 结果 在体实验结果显示, CI/ R 大鼠脑组织 miR-485 表达水平降低, agomir-485 干预可降低 CI/ R 大鼠神经损伤、 Bax / Bcl-2 水平和 LDH、 GSH-px 活性, 提高 SOD 活性。 离体实验结果 显示, OGD 诱导会降低 miR-485 表达, miR-485 过表达可提高细胞 SOD 活性, 降低细胞凋亡率和 LDH、 GSH-px 活性。 结论 miR-485 过表达可缓解 CI/ R 损伤、 降低 OGD/ R 所致神经细胞凋亡率, 可能与调节氧 化应激反应有关。  相关文章 | 多维度评价 Select 33. miR-27b-3p 靶向 HOXB8 调节口腔鳞癌耐药细胞的增殖、凋亡和顺铂耐药性  周金阔, 史晓晶, 刘倩峰, 刘广顺, 姜磊, 张晋弘 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 202-208.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.003 摘要 （272）      PDF （3827KB）（274）    可视化    收藏 目的 探究 miR-27b-3p 在口腔鳞癌 (oral squamous cell carcinoma, OSCC) 耐药细胞增殖、 凋亡和顺铂 (cisplatin, DDP) 耐药性中的作用及潜在的机制。 方法 RT-qPCR 检测 miR-27b-3p 和 HOXB8 mRNA 的表达; Western 印迹分析 HOXB8 及耐药蛋白 MRP1 的表达; CCK-8 分析细胞活力, 克隆形成实验分析 细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞凋亡。 miR-27b-3p 和 HOXB8 之间的相互作用通过在线软件 Targetscan 预测 并通过双荧光素酶报告基因分析证实。 裸鼠异种移植模型测试 miR-27b-3p 在体内 OSCC DDP 耐药中的作 用。 结果 miR-27b-3p 在 DDP 耐药 OSCC 组织和 OSCC 细胞系中明显低表达, 且在 DDP 耐药 OSCC 细胞系 (CAL-27 / DDP) 中的表达明显低于正常 OSCC 细胞系 (CAL-27) (P< 0. 05); 而 HOXB8 mRNA 在 DDP 耐药 OSCC 组织和 OSCC 细胞系中明显高表达, 在 DDP 耐药 OSCC 细胞系 (CAL-27 / DDP) 中的表达明显高于正 常 OSCC 细胞系 (CAL-27) (P< 0. 05)。 miR-27b-3p 模拟物可明显抑制 CAL-27 / DDP 细胞活力、 克隆形成能 力和耐药蛋白 MRP1 的表达, 促进细胞凋亡 (P< 0. 05); 而 HOXB8 过表达可部分逆转 miR-27b-3p 模拟物 对 CAL-27 / DDP 细胞增殖、 凋亡以及耐药性的影响 (P< 0. 05)。 HOXB8 与 miR-27b-3p 存在靶向调控作用。 瘤内注射 miR-27b-3p agomir 显著缓解了体内异种移植耐药细胞的生长, 同时降低了 HOXB8 和 MRP1 的表 达 (P< 0. 05)。 结论 miR-27b-3p 可能通过靶向 HOXB8 调节 OSCC 耐药细胞的增殖、 凋亡和 DDP 耐药性。 相关文章 | 多维度评价 Select 34. 罗哌卡因通过抑制 MAPK/ NF-κB 通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤  石磊, 史静, 刘祥, 张琦, 赵海涛, 李浩 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 209-214.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.004 摘要 （360）      PDF （2588KB）（163）    可视化    收藏 目的 研究罗哌卡因对脑缺血再灌注 (CI/ R) 大鼠脑损伤和海马神经元凋亡的缓解作用及其相 关通路。 方法 Sprague-Dawley (SD) 大鼠分组: 对照组, CI/ R 模型组, 罗哌卡因治疗组 [低浓度 (0. 5 mg / kg)、 中浓度 (1 mg / kg)、 高浓度 (2 mg / kg)]。 跳台实验和 Y 迷宫实验评价各组大鼠行为学; Longa 法 评价大鼠神经功能损伤; HE 染色观察脑组织病理损伤; TUNEL 染色检测海马区组织凋亡; Western 印迹检 测相关蛋白的表达。 结果 与对照组比较, CI/ R 组大鼠跳台试验犯错次数显著增加, 新异臂进入次数显著 降低, 脑指数和神经功能缺损评分显著升高; 脑组织出现明显的病理损伤, 海马区神经元明显凋亡; BDNF 和 NGF 蛋白表达显著降低, Bax / Bcl-2 和 cleaved Caspase-3 / Caspase-3 比值显著升高, P38MAPK 和 NF-κB P65 磷酸化水平显著提升。 与 CI/ R 组比较, 罗哌卡因治疗改善了 CI/ R 损伤引起的行为学偏差; 显著降低 脑指数和神经功能缺损评分; 缓解脑组织损伤和海马体神经元凋亡; 抑制了 P38MAPK/ NF-κB P65 通路的 活化。 结论 罗哌卡因治疗可缓解 CI/ R 大鼠脑损伤和海马神经元凋亡, 其潜在机制或与抑制 MAPK 通路 的活化有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 35. LncRNA OSTN-AS1 下调 miR-4461 表达促进前列腺癌 LNCaP 细胞增殖、 迁移和侵袭 田莉, 赵济华, 徐晋珩, 胡月明, 崔海军, 曹渤海 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 215-220.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.005 摘要 （209）      PDF （1104KB）（358）    可视化    收藏 目的 探究长链非编码 RNA (long non-coding RNA, lncRNA) OSTN 反义 RNA1 (OSTN antisense RNA1, OSTN-AS1) 对前列腺癌 LNCaP 细胞增殖、 迁移和侵袭的影响及其机制。 方法 以前列腺上皮细胞 RWPE-1 为对照, 实时荧光定量 PCR ( qRT-PCR) 法检测 LNCaP 细胞中 OSTN-AS1、 miR-4461 表达。 转染 OSTN-AS1 小干扰 RNA (si-OSTN-AS1) 或 miR-4461 模拟物、 或共转染 si-OSTN-AS1 与 miR-4461 抑制剂至 LNCaP 细胞, 细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 法、 划痕实验、 Transwell、 蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、 迁 移、 侵袭及相关蛋白 [Ki-67、 基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinase, MMP) -2、 MMP-9] 表达。 双荧 光素酶报告基因实验验证 OSTN-AS1 与 miR-4461 的调控关系。 结果 LNCaP 细胞中 OSTN-AS1 表达量较 RWPE-1 细胞升高 (3. 38 ± 0. 26 vs. 1. 00 ± 0. 00, P< 0. 05), miR-4461 表达量较 RWPE-1 细胞降低 (0. 46 ± 0. 04 vs. 1. 00 ± 0. 00, P< 0. 05)。 干扰 OSTN-AS1 或过表达 miR-4461 后, LNCaP 细胞增殖活性、 划痕愈合 率、 侵袭数降低, 同时细胞中 Ki-67、 MMP-2、 MMP-9 蛋白表达量也降低 (P均 < 0. 05)。 OSTN-AS1 靶向结 合 miR-4461, 且干扰 OSTN-AS1 表达的 LNCaP 细胞中 miR-4461 表达量增加 (P< 0. 05)。 下调 miR-4461 逆 转了干扰 OSTN-AS1 对 LNCaP 细胞增殖、 迁移、 侵袭及相关蛋白表达的影响。 结论 干扰 OSTN-AS1 可通 过靶向上调 miR-4461 抑制前列腺癌 LNCaP 细胞增殖、 迁移和侵袭。 相关文章 | 多维度评价 Select 36. miR-340 对脑胶质瘤中 GLUT1 / 6 表达及细胞增殖、 迁移的影响 乔晓龙, 王子轩, 陈一楠, 程传东 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 221-226.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.006 摘要 （275）      PDF （4207KB）（428）    可视化    收藏 目的 探究脑胶质瘤微小核糖核酸 microRNA-340 (miR-340) 与 IDH1、 P53、 CD34、 Ki-67 表达 的关系以及初步探索 miR-340 对胶质瘤细胞功能和葡萄糖转运蛋白 1 / 6 ( glucose transporter 1 / 6, GLUT1 / 6) 表达的影响。 方法 采用实时荧光定量 PCR ( qRT-PCR) 法检测脑胶质瘤组织标本及胶质瘤细胞系 miR-340 的表达水平; 细胞功能试验检测 miR-340 对胶质瘤的影响; qRT-PCR、 蛋白质免疫印迹检测转染 miR-340 对 GLUT1 / 6 表达的影响。 结果 miR-340 在正常脑组织中高表达, 胶质瘤组织中低表达 (P< 0. 001); miR-340 mimics 可以抑制 U87、 U251 细胞增殖、 增加凋亡、 减弱迁移侵袭。 miR-340 mimics 可以显著抑制 胶质瘤细胞中 GLUT1 / 6 的表达 (P< 0. 001)。 结论 胶质瘤 miR-340 水平降低, 且与 Ki-67 表达呈明显负相 关。 miR-340 通过降低胶质瘤中 GLUT1 / 6 表达从而影响胶质瘤葡萄糖转运以抑制增殖, 降低恶性程度。 相关文章 | 多维度评价 Select 37. 甘草酸通过抑制自噬对脑缺血再灌注后神经元损伤的保护作用 张印松, 李光杰, 相毅 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 227-231.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.007 摘要 （375）      PDF （1788KB）（343）    可视化    收藏 目的 探究甘草酸对脑缺血再灌注神经元损伤的保护作用。 方法 通过在大鼠原代神经元中进 行氧糖剥夺再灌注 (oxygen glucose deprivation reperfusion, OGD/ R) 构建体外脑缺血再灌注模型。 显微镜观 察细胞形态学变化, 免疫荧光染色观察神经元特异性烯醇化酶 (neuron-specific enolase, NSE) 的表达。 使 用甘草酸对损伤神经元进行治疗, CCK-8 法检测神经元细胞的活力变化, 乳酸脱氢酶 (LDH) -细胞毒性检 测试剂盒检测神经元释放的 LDH 水平。 使用 AMPK 激活剂 AICAR 对神经元 AMPK/ mTOR 通路进行激活, Western 印迹检测 AMPK/ mTOR 通路相关蛋白及自噬相关蛋白的表达。 结果 甘草酸抑制 OGD/ R 诱导的神 经元 LDH 水平升高、 细胞活力下降及自噬相关蛋白 Beclin 1、 LC3-Ⅱ的增加, 并抑制 AMPK/ mTOR 通路的 激活。 结论 甘草酸介导 AMPK/ mTOR 通路抑制神经元自噬从而对脑缺血再灌注后神经元发挥保护作用。 相关文章 | 多维度评价 Select 38. FTO 调控 FBXW7 的 m6A 甲基化修饰促进宫颈癌放化疗抵抗的机制研究 高辉, 曲冬颖 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 232-236.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.008 摘要 （259）      PDF （3749KB）（356）    可视化    收藏 目的 探讨肥胖相关蛋白 (obesity-associated protein, FTO) 和 F 框/ WD-40 域蛋白 7 (F-box and WD-40 domain protein 7, FBXW7) 在宫颈鳞状细胞癌 (cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 放化疗抵抗 中的作用。 方法 实时荧光聚合酶链反应 (real-time polymerase chain reaction, RT-PCR) 和 Western 印迹检 测 CSCC 细胞中 FTO 和 FBXW7 表达。 TCGA (The Cancer Genome Atlas) 数据分析 FTO 和 FBXW7 表达及相 关性。 在 CSCC 细胞中过表达 FTO, 免疫沉淀检测 FBXW7 的 mRNA 的 m6A 表达变化。 四甲基偶氮唑盐比 色法 [3- (4, 5-dimethylthiazol-2-yl) -2, 5-diphenyltetrazolium bromide, MTT] 检测 FTO 和 FBXW7 在 CSCC 细胞放化疗抵抗中的作用。 结果 与人正常宫颈上皮细胞 (HUCEC) 比较, FTO 和 FBXW7 在 CSCC 细胞 (SiHa, c-33a) 中弱表达 (P< 0. 05); FTO 调控 FBXW7 的 mRNA 的 m6A 甲基化水平。 过表达 FTO 的 CSCC 细胞在经过照射和顺铂处理后, 细胞存活比例下降, 放化疗抵抗减轻 ( P< 0. 05); 而在此基础上抑制 FBXW7, 治疗后的细胞存活比例增加, 诱导了 CSCC 放化疗抵抗 (P< 0. 05)。 结论 FTO 可以去除 FBXW7 的 m6A 甲基化修饰, 上调 FBXW7 的表达, 抑制 CSCC 对放化疗的抵抗。 FTO 对 CSCC 恶性表型的影响是通 过 FBXW7 实现的。  相关文章 | 多维度评价 Select 39. 胃癌组织中 RPN2 的表达及其临床意义 陈茜, 杨莉, 彭勇, 张子龙 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 237-242.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.009 摘要 （336）      PDF （3748KB）（452）    可视化    收藏 目的 探讨核糖体结合蛋白 2 (Ribophorin Ⅱ, RPN2) 在胃癌组织中的表达和对患者生存的影 响。 方法 应用胃癌公共芯片数据、 RT-PCR、 Western 印迹以及免疫组化方法从 mRNA 和蛋白水平检测 RPN2 在胃癌组织中的表达, 分析 RPN2 的表达与胃癌患者的预后和临床病理参数的关系。 结果 公共芯片 数据分析和临床样本 PCR 验证发现, 与癌旁组织相比, 胃癌组织中 RPN2 mRNA 的表达均明显升高 (P< 0. 05); Western 印迹和免疫组化检测发现, RPN2 蛋白在胃癌组织中表达明显上调; 进一步分析发现, 胃 癌组织中 RPN2 高表达与肿瘤分化程度 (P = 0. 005)、 淋巴结转移 (P = 0. 043)、 TNM 分期 (P = 0. 002)、 脉管浸润 (P = 0. 015) 和神经侵犯 (P = 0. 046) 相关; RPN2 高表达胃癌患者的总生存期显著少于低表达 组 (χ 2 = 9. 296, P = 0. 002); RPN2 高表达是胃癌患者总生存期的影响因素之一 ( HR = 1. 763, 95 % CI: 1. 106 ~ 3. 956, P = 0. 014)。 结论 RPN2 在胃癌中表达显著升高, RPN2 的高表达与胃癌的进展和预后相 关, 有望成为评估胃癌预后的标志物。 相关文章 | 多维度评价 Select 40. 细胞色素 C 氧化酶 COX7B2 在转移性卵巢癌的表达及临床意义  刘翠, 李美艳, 王菊荣 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 243-248.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.010 摘要 （371）      PDF （4319KB）（249）    可视化    收藏 目的 检测 COX7B2 在转移性卵巢癌中的表达, 探究其表达模式, 判断 COX7B2 对卵巢癌预后 的影响, 分析其作为卵巢癌诊断标志物的潜在价值。 方法 挖掘 TCGA 数据库中 COX7B2 的 RNA 表达数 据, 对邯郸市中心医院卵巢癌样本组织蜡块进行免疫组织化学染色, 分析蛋白表达。 结合生存数据进行临 床分期和预后分析。 分析 COX7B2 表达与免疫细胞浸润的相关性。 结果 COX7B2 在卵巢癌组织中高表达, 且转移性卵巢癌的表达更为显著。 COX7B2 的表达与患者组织学分级、 病理分期、 淋巴结转移、 远端转移 相关, 与患者生存时间呈负相关。 COX7B2 对于卵巢癌的诊断具有较高的准确性。 COX7B2 抑制 T 细胞、 NK 细胞、 DC 细胞在肿瘤微环境中的浸润。 结论 COX7B2 在卵巢癌中的高表达, 影响患者的预后, COX7B2 有望作为卵巢癌的诊断标志物, 以及卵巢癌转移的特征性标志物。  相关文章 | 多维度评价 Select 41. 抑制下丘脑 TLR4 表达对肥胖相关代谢状态的影响 晏建英, 赖秀蓝, 陈叶 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 249-253.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.011 摘要 （227）      PDF （1178KB）（175）    可视化    收藏 目的 研究抑制下丘脑 TLR4 表达对肥胖相关代谢状态的影响。 方法 40 只 4 周龄雄性 C57BL/ 6 小鼠 (SPF 级), 适应性喂养 1 周后, 随机分成 2 组, 分别饲喂正常饮食 (NCD)、 高脂饮食 (HFD) 4 周, 喂养期间, 每周测量体重 1 次。 9 周龄时, shRNA-TLR4 慢病毒颗粒及对照病毒颗粒分别注射正常饮食组和 高脂饮食组小鼠。 13 周龄时处死小鼠, 并采用实时荧光定量 qPCR 方法, 检测 TLR4 在下丘脑中的表达水 平; 血糖仪检测小鼠空腹血糖; ELISA 法检测血清 TNF-α、 IL-6; 应用自动生化分析仪检测血清低密度脂蛋 白-胆固醇、 高密度脂蛋白-胆固醇、 甘油三脂及总胆固醇水平; 脂肪组织 HE 染色。 结果 TLR4-shRNA 慢 病毒干预后, 下丘脑组织中 TLR4 的表达显著减少, 差异有统计学意义 (P< 0. 05); 高脂喂养的 C57BL/ 6 小鼠的体重增长量、 能量摄入量均明显降低, 差异有统计学意义 (P< 0. 05); 高脂喂养的 C57BL/ 6 小鼠的 炎性因子、 甘油三酯、 空腹血糖明显下降, 差异有统计学意义 (P< 0. 05)。 脂肪细胞肥大现象缓解。 结论 通过有效干预下丘脑组织中 TLR4 的表达水平, 可显著改善肥胖相关的炎性反应、 糖、 血脂等代谢紊乱。  相关文章 | 多维度评价 Select 42. RABL6 高表达促进口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭 吴红琴 , 王曦 , 谭云清 , 杨清 , 张静 , 臧兴双 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 254-259.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.012 摘要 （282）      PDF （3220KB）（195）    可视化    收藏 目的 口腔鳞状细胞癌 (oral squamous cell carcinoma, OSCC) 是一种复发率高、 转移率高、 预 后差的常见癌症, 研究旨在深入了解 RABL6 在 OSCC 肿瘤发生和发展及预后中的作用。 方法 采用定量逆 转录聚合酶链反应 (qRT-PCR) 和 Western 印迹检测 37 例冷冻临床样本和 OSCC 细胞中 RABL6 的表达。 分析 RABL6 的表达及其与临床病理特征的相关性。 通过 CCK-8、 克隆形成、 流式细胞术、 细胞划痕和 Transwell 实验, 研究 RABL6 基因敲低对 OSCC 细胞增殖、 凋亡和迁移能力的影响。 结果 与癌旁组织相比, RABL6 在 OSCC 组织中高表达, 与预后不良相关; 与正常口腔角质形成细胞相比, RABL6 在 OSCC 细胞中 高表达; 与 si-NC 组比较, 敲低 RABL6 抑制了 OSCC 细胞的增殖、 迁移和侵袭, 还能诱导细胞凋亡。 结论 RABL6 在 OSCC 中作为肿瘤癌基因发挥作用。 提示可作为预测预后的潜在生物标志物, 也是 OSCC 治疗 的新靶点。 相关文章 | 多维度评价 Select 43. 翠云草总黄酮通过调控 miR-3662 表达抑制喉鳞癌 TU177 细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究 李新华, 李军, 裴卓, 栾红娟 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 260-266.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.013 摘要 （251）      PDF （4158KB）（269）    可视化    收藏 目的 探讨翠云草总黄酮 ( total flavonoids from Selaginella uncinata, TFS) 对喉鳞癌 TU177 细胞 增殖、 迁移和侵袭的影响及可能机制。 方法 体外培养 TU177 细胞, 分为对照组、 不同剂量 (5、 15、 25 μg / mL) TFS 组, CCK-8 法和克隆形成实验检测细胞增殖, 划痕实验检测细胞迁移, Transwell 检测细胞侵 袭, Western 印迹检测细胞中上皮型钙粘蛋白 (E-Cadherin)、 神经型钙粘蛋白 (N-Cadherin) 表达, RT-qPCR 法检测 miR-3662 表达。 收集 35 例喉鳞癌患者的癌组织及癌旁组织, RT-qPCR 法检测组织中 miR-3662 表达。 另取 TU177 细胞, 分为 miR-3662 组、 miR-NC 组、 25 μg / mL TFS + anti-miR-3662 组和 25 μg / mL TFS + anti-miR-NC, CCK-8 法和克隆形成实验检测细胞增殖, 划痕实验检测细胞迁移, Transwell 检测细胞侵袭, Western 印迹检测细胞中 E-Cadherin 和 N-Cadherin 蛋白表达。 结果 与对照组比较, 不同剂量 TFS 组 TU177 细胞抑制率升高 (P< 0. 05), 克隆形成数、 划痕愈合率和侵袭数及细胞中 N-Cadherin 蛋白表达降低 (P< 0. 05), E-Cadherin 蛋白和 miR-3662 表达升高 (P< 0. 05), 且呈剂量依赖性。 喉鳞癌组织中 miR-3662 的表 达较癌旁组织显著降低 (P< 0. 05)。 与 miR-NC 组比较, miR-3662 组喉鳞癌 TU177 细胞抑制率和细胞中 E-Cadherin 蛋白表达升高 (P< 0. 05), 克隆形成数、 迁移和侵袭数及细胞中 N-Cadherin 蛋白表达均降低 (P< 0. 05)。 与 25 μg / mL TFS + anti-miR-NC 组比较, 25 μg / mL TFS + anti-miR-3662 组 TU177 细胞抑制率和细胞 中 E-Cadherin 蛋白表达降低 (P< 0. 05), 克隆形成数、 迁移和侵袭数及细胞中 N-Cadherin 蛋白表达均升高 (P< 0. 05)。 结论 翠云草总黄酮可抑制喉鳞癌 TU177 细胞增殖、 迁移和侵袭, 其作用机制可能与上调细 胞中 miR-3662 表达有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 44. microRNA-124 与疾病的研究进展 张志凤, 袁瑞阳, 丁海麦, 张学明 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 267-271.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.014 摘要 （1143）      PDF （698KB）（1116）    可视化    收藏 microRNA (miRNA) 是一类长度为 20 ~ 24 个核苷酸的非编码单链 RNA, 被称为转录后调控因 子。 miRNA 是在转录后调控其靶基因发挥作用。 miRNA 表达的改变在多种疾病的发生发展过程中发挥重要 的调控作用。 其中, microRNA124 (miR-124) 是目前的研究热点之一, 它在多种肿瘤中低表达, 并在细胞 增殖、 侵袭转移及凋亡等方面发挥重要的抑癌作用, 密切参与恶性肿瘤的发生、 发展和预后。 文章综述了 非恶性疾病与恶性疾病中 miR-124 的作用机制, 为疾病的诊断与治疗提供理论证据。 相关文章 | 多维度评价 Select 45. circRNAs 在肿瘤糖酵解发生发展中作用机制研究进展 李佳维, 俞万钧, 吕佳佩, 徐涛 医学分子生物学杂志    2023, 20 (3): 272-278.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.015 摘要 （365）      PDF （750KB）（722）    可视化    收藏 近年来, 环状 RNA 在肿瘤治疗中的作用成为了研究热点。 糖酵解是肿瘤代谢中的一个重要环 节, 许多异常表达的环状 RNA 与肿瘤糖酵解过程中重要的酶类、 细胞因子及信号通路都有密切的联系, 它 可通过结合 microRNA 抑制其功能, 直接或间接影响下游靶蛋白的表达, 达到促进或抑制肿瘤糖酵解过程, 还可影响肿瘤患者对化疗药物产生的耐药性。 文章综述了环状 RNA 通过葡萄糖转运蛋白及代谢酶、 相关癌 基因及转录因子、 癌症相关信号通路影响肿瘤糖酵解, 以及其在肿瘤治疗和耐药等方面的研究进展。  相关文章 | 多维度评价 Select 46. 免疫浸润相关基因 mRNA 在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达 及其与预后的关系 杨勤秦 , 刘占军 , 杜鹃 , 张云清 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 27-285.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.001 摘要 （277）      PDF （871KB）（189）    可视化    收藏 目的 探讨免疫浸润相关基因 mRNA 在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达水平及其与预后的关系。 方法 选取延安大学附属医院 2017 年 1 月至 2019 年 1 月宫颈癌患者 74 例作为宫颈癌变组, 宫颈癌前病变 患者 74 例作为宫颈癌前病变组, 另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者 74 例作为宫颈正常组, 比较 3 组免疫浸润相关基因 [人类白细胞抗原 G (HLA-G)、 叉状头螺旋转录因子 3 (FOXP3)、 T 细胞免疫球蛋白 粘连蛋白-3 (TIM-3)]、 恶性生物学行为相关基因 [侵袭基因 p21-活化的激酶6 (PAK-6)、 zeste 2 多梳抑制 复合物 2 亚基增强子 (EZH2)、 增殖基因血管生成素样蛋白 4 (ANGPTL4)、 同源盒基因 B7 (HOXB7)] 的 mRNA 相对表达量, 分析免疫浸润相关基因与宫颈癌发生及宫颈癌恶性生物学行为的关系, 并统计对比不 同免疫浸润相关基因表达水平患者 3 年生存率。 结果 HLA-G、 FOXP3、 TIM-3 mRNA 相对表达量为宫颈癌 变组 > 宫颈癌前病变组 > 宫颈正常组 (P< 0. 05); 不同临床分期、 分化程度, 以及有无淋巴结转移、 有无 脉管浸润患者的 HLA-G、 FOXP3、 TIM-3、 PAK-6、 EZH2、 ANGPTL4、 HOXB7 mRNA 相对表达量差异有统计 学意义 (P< 0. 05); HLA-G、 FOXP3、 TIM-3 的 mRNA 高表达患者宫颈癌前病变进展至宫颈癌的风险分别是 低表达患者的 3. 005 倍、 4. 654 倍、 3. 343 倍; 宫颈癌患者 HLA-G、 FOXP3、 TIM-3 mRNA 与侵袭相关基因 PAK-6、 EZH2 mRNA、 增殖相关基因 ANGPTL4、 HOXB7 的 mRNA 表达呈正相关 (P< 0. 05); 随访 3 年, 失 访 2 例, 72 例宫颈癌患者 3 年生存率为 68. 06 % (49 / 72), HLA-G、 FOXP3、 TIM-3 的 mRNA 高表达患者 3 年生存率均低于低表达患者 (P< 0. 05)。 结论 免疫浸润相关基因 HLA-G、 FOXP3、 TIM-3 的 mRNA 在宫 颈癌与宫颈癌前病变中呈上调表达, 会显著增加宫颈癌发病风险, 且与宫颈癌恶性生物学行为密切相关, 还可能对生存预后产生重要影响。  相关文章 | 多维度评价 Select 47. 异氟醚对高糖诱导的 H9C2 心肌细胞损伤及 PI3K/ Akt / mTOR 信号通路的影响  周翔 , 许明山 , 祝波 , 郑其山 , 郑育秀 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 286-291.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.002 摘要 （330）      PDF （3964KB）（232）    可视化    收藏 目的 探讨异氟醚对高糖诱导的 H9C2 心肌细胞损伤及磷脂酰肌醇 3 激酶 ( phosphatidylinositol 3- kinase, PI3K) / 蛋白激酶 B (protein kinase B, AKT) / 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mammalian target of rapamycin, mTOR) 信号通路的影响。 方法 选取对数生长期的 H9C2 心肌细胞, 分组为: ① 对照组, 未处理 的 H9C2 心肌细胞; ② 高糖组 (35 mmol / L 葡萄糖); ③ 异氟醚低浓度组 (在高糖组的基础上加入 1 % 异 氟醚); ④ 异氟醚高浓度组 (在高糖组的基础上加入 2 % 异氟醚); ⑤ 异氟醚高浓度 + LY294002 组 (在高 糖组的基础上加入 2 % 异氟醚 + 50 μmol / L LY294002)。 CCK-8 法检测各组细胞增殖; 透射电子显微镜观察 各组细胞自噬情况; 流式细胞术检测各组细胞凋亡; Western 印迹检测各组细胞中 PI3K/ Akt / mTOR 通路及 自噬 (Beclin1)、 凋亡 (Bax) 相关蛋白表达。 结果 与对照组相比, 高糖组细胞中明显可见形成的自噬小体, 增殖率、 p-PI3K/ PI3K、 p-Akt/ Akt、 p-mTOR/ mTOR 降低, 细胞凋亡率、 Bax、 Beclin1 蛋白表达显著增加 (P< 0. 05)。 与高糖组相比, 经不同浓度的异氟醚处理后, 细胞增殖率、 p-PI3K/ PI3K、 p-Akt/ Akt、 p-mTOR/ mTOR 显 著增加, 自噬小体减少, 细胞凋亡率、 Bax、 Beclin1 蛋白表达显著下降 (P< 0. 05); 与异氟醚高浓度组相比, 异 氟醚高浓度 + LY294002 组细胞增殖率、 p-PI3K/ PI3K、 p-Akt/ Akt、 p-mTOR/ mTOR 降低, 自噬小体增多, 细胞凋 亡率、 Bax、 Beclin1 蛋白表达显著增加 (P<0. 05)。 结论 异氟醚可以抑制高糖诱导的 H9C2 心肌细胞自噬、 凋 亡, 提高细胞存活率, 减少细胞损伤, 可能与 PI3K/ Akt/ mTOR 通路的激活有关。  相关文章 | 多维度评价 Select 48. 干扰 LINC01133 对宫颈癌细胞增殖、 炎性因子水平、 氧化应激 以及裸鼠成瘤的影响  李芬, 古丽比亚·艾则孜, 苑锦睿, 亚力坤·穆罕穆德, 温蒙科, 沈谷群 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 292-297.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.003 摘要 （245）      PDF （2969KB）（373）    可视化    收藏 目的 探究干扰长链非编码 RNA LINC01133 在宫颈癌细胞中的作用和机制。 方法 TCGA 数据 库和 qRT-PCR 分析 LINC01133 在宫颈癌组织和细胞中的表达; qRT-PCR 检测 LINC01133-shRNAs 的敲低效 率; SiHa 细胞分为 Control 组、 shRNA-NC 组、 LINC01133-shRNA1 组, 克隆形成实验检测细胞增殖, ELISA 检测肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、 白细胞介素 ( IL) -6 和 IL-1β 水平; 免疫荧光检测 SiHa 细胞中 P65 的核 转移; Western 印迹检测 P65 的磷酸化; 试剂盒检测超氧化物歧化酶 (SOD) 和乳酸脱氢酶 (LDH); 建立 裸鼠移植瘤模型, 分析干扰 LINC01133 表达对肿瘤生长的影响。 结果 LINC01133 在宫颈癌组织和细胞中 的表达显著上调 (P< 0. 05)。 LINC01133-shRNA1 组敲除效率最为显著, 选择此组作为后续实验干扰组; 与 对照组相比, LINC01133-shRNA1 组克隆形成率、 炎性因子水平、 P65 磷酸化水平、 细胞核 P65 含量和 LDH 水平均显著升高 (P< 0. 05), SOD 活性显著降低 (P< 0. 05); 在裸鼠成瘤实验中, 与 shRNA-NC 组相比, LINC01133-shRNA1 组肿瘤组织体积、 重量、 SOD 活性均显著降低 (P< 0. 05), P65 的磷酸化水平显著升高 (P< 0. 05)。 结论 干扰 LINC01133 抑制宫颈癌细胞生长、 炎性因子水平和氧化应激。 相关文章 | 多维度评价 Select 49. 干扰成纤维细胞生长因子-18 对结肠癌细胞的抗肿瘤研究  陈希, 张金宁, 姚亚辉, 刘恒 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 298-304.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.004 摘要 （199）      PDF （5956KB）（252）    可视化    收藏 目的 初步探讨干扰成纤维生长因子 18 (fibroblast growth factor-18, FGF-18) 在结肠癌中的抗肿 瘤作用。 方法 体外培养结肠癌细胞株 SW480, 分为 Control 组、 shRNA-NC 组和 sh-FGF-18 组; 克隆实验 检测细胞增殖能力; 流式细胞仪检测细胞凋亡情况; Hoechst 观察凋亡后细胞形态变化; 划痕实验检测细胞 迁移能力; Transwell 检测细胞侵袭能力; HE 染色观察小鼠肝和肺组织转移情况; Western 印迹检测上皮间 质转化 (epithelial-mesenchymal transition, EMT) 相关标记物 E-钙粘蛋白 (E cadherin, E-cad), N-钙粘蛋 白 (N-cadherin, N-cad), 纤维连接蛋白 (fibronectin, FN) 水平; 裸鼠成瘤实验检测肿瘤体积及大小; 免 疫组化检测小鼠肿瘤组织 E-cad、 N-cad、 FN 在结肠癌组织中的阳性表达。 结果 与 shRNA-NC 组比较, FGF-18-shRNA 组细胞 FGF-18 mRNA 和蛋白水平相对表达水平降低, 克隆细胞和侵袭细胞减少, 划痕距离 增加, 凋亡细胞增多, E-cad 蛋白水平增加, N-cad 和 FN 蛋白水平减少; E-cad 在 sh-FGF-18 组中的阳性表 达高于 shRNA-NC 组, N-cad 和 FN 的表达低于 shRNA-NC 组 (P< 0. 05)。 与 shRNA-NC 组比较, sh-FGF-18 组中原发灶瘤体重量变轻, 体积变小 (P< 0. 05), 肝和肺组织表面转移灶较少 (P< 0. 05)。 结论 干扰 FGF-18 基因表达抑制结肠癌细胞的增殖、 迁移和侵袭, 促进凋亡, 抑制裸鼠移植瘤生长能力, 可能通过抑 制 EMT 途径影响肿瘤转移。  相关文章 | 多维度评价 Select 50. 血清 miR-181a 水平在 COPD 患者中的表达水平及临床意义 林云霞, 刘源源, 王生伟 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 305-309.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.005 摘要 （302）      PDF （736KB）（186）    可视化    收藏 目的 探讨血清微小 RNA-181a (miR-181a) 在慢性阻塞性肺疾病 ( chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 患者中的表达水平及临床意义。 方法 选取南京脑科医院于 2019 年 6 月至 2021 年 6 月呼 吸科收治的诊断为 COPD 的患者 80 例, 根据病情分为 2 组: COPD 组 (稳定期 38 例) 和 AECOPD 组 (急 性加重期 42 例), 其中 AECOPD 组按照预后再分为预后良好组 (18 例) 与预后不良组 (24 例)。 另选取健 康体检者 40 例作为对照组。 采用 qRT-PCR 法检测血清 miR-181a 表达水平, 使用肺功能仪检测研究对象的 肺功能。 采用 Pearson 相关性分析血清 miR-181a 水平与肺功能的相关性。 应用 COX 回归分析影响 AECOPD 患者不良预后的危险因素。 结果 AECOPD 组患者有吸烟史比例、 miR-181a 水平高于 COPD 组和对照组, FEV1 / FVC、 FEV1 % 、 FVC % 低于 COPD 组和对照组。 Pearson 相关性分析结果显示, AECOPD 患者血清 miR-181a 表达水平与 FEV1 / FVC、 FEV1 % 、 FVC % 呈负相关 (P< 0. 05)。 与预后良好组患者比较, 预后 不良组患者血清 miR-181a 水平显著升高 (P< 0. 05)。 miR-181a 水平是影响 AECOPD 患者预后的独立危险 因素 (P < 0. 05)。 结论 血清 miR-181a 表达水平与 COPD 患者的急性期发作、 疾病的进展及预后有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 51. miR-205 通过 JAK2 / STAT3 信号通路影响三阴性乳腺癌细胞的 体外转移活性  张军, 李杰, 李杏, 李鸽姿, 赵崇如, 陈嘉丽, 彭大伟, 张天莹 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 310-315.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.006 摘要 （309）      PDF （3906KB）（294）    可视化    收藏 目的 探究 miR-205 与 JAK2 / STAT3 在三阴性乳腺癌发展中的作用关系, 以期为三阴性乳腺癌的 治疗提供新思路。 方法 使用实时荧光定量 PCR 法和 Western 印迹检测癌组织和癌旁组织中 miR-205 和 JAK2 的表达水平。 用 miR-205 mimic、 miR NC、 pcDNA3. 1 JAK2 和 pcDNA3. 1 NC 转染 MDA-MB-231 细胞 后, Western 印迹实验检测 JAK2 途径蛋白的表达。 划痕实验检测 MDA-MB-231 细胞的迁移情况, Transwell 实验检测细胞的侵袭能力, 集落形成实验分析 MDA-MB-231 细胞的生长能力, 流式细胞术分析 MDA-MB-231 细胞凋亡情况, 荧光素酶报告基因实验分析 miR-205 和 JAK2 的相互作用情况。 结果 在三阴性乳腺癌 组织中, miR-205 表达水平降低, JAK2 的表达水平升高。 通过在 MDA-MB-231 细胞实验中过表达 miR-205 后, 三阴性乳腺癌细胞的生长、 侵袭和转移能力均受到抑制, 同时凋亡率显著增加。 另外, 在 MDA-MB-231 细胞实验中过表达 JAK2 后, 三阴性乳腺癌细胞的生长、 侵袭和转移能力均增加, 同时凋亡率显著降 低。 荧光素酶报告基因实验发现, miR-205 能够靶向抑制 JAK2 活性。 结论 miR-205 能够靶向调控 JAK2 / STAT3 途径, 进而抑制三阴性乳腺癌细胞的生长、 侵袭和转移, 并同时促进三阴性乳腺癌细胞凋亡。  相关文章 | 多维度评价 Select 52. LncRNA HOTAIR 通过 miR-130a-3p / ABCC5 调控乳腺癌细胞 紫杉醇耐药的分子机制研究 何宇, 袁志鹏, 卢志斌, 廖景升, 贾筠 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 316-323.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.007 摘要 （296）      PDF （3115KB）（194）    可视化    收藏 目的 探讨长链非编码 RNA (long noncoding RNA, LncRNA) HOTAIR 调控乳腺癌细胞紫杉醇耐 药的潜在分子机制。 方法 筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系 (MCF7 / TR 细胞), 并且检测 MCF7 / TR 细胞 以及亲代细胞的 HOTAIR 的表达水平以及紫杉醇耐药指标 (增殖水平、 凋亡水平、 细胞周期、 细胞内紫杉 醇浓度)。 结果 敲低 HOTAIR 后, 紫杉醇处理可以显著抑制 MCF7 / TR 细胞的增殖和诱导细胞凋亡, 并且 诱导 MCF7 / TR 细胞停滞于 G1期。 敲低 HOTAIR 后 MCF7 / TR 细胞内紫杉醇浓度升高。 miR-130a-3p 与 HOTAIR 存在相互作用。 过表达 miR-130a-3p 时 MCF7 / TR 细胞内紫杉醇浓度明显升高, 敲低 HOTAIR 后, MCF/ TR 细胞中 miR-130a-3p 的表达水平升高。 miR-130a-3p 靶向 ABCC5 mRNA 的 3′端非翻译区。 过表达 ABCC5 时 MCF7 / TR 细胞内紫杉醇浓度明显升高。 结论 LncRNA HOTAIR 通过 miR-130a-3p / ABCC5 轴减少 了紫杉醇耐药细胞中紫杉醇细胞内水平, 促进了乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药。 相关文章 | 多维度评价 Select 53. LncRNA BLACAT1 调节 miR-324-5p / MAP4K3 轴对肝癌细胞增殖、 迁移和侵袭的影响 廖运国 , 唐梓瑜 , 李超 , 蒲嘉骐 , 邱世香 , 杨甜 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 324-331.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.008 摘要 （324）      PDF （3410KB）（168）    可视化    收藏 目的 探讨长链非编码 RNA 膀胱癌相关转录本 1 (LncRNA BLACAT1) 调节 miR-324-5p / 丝裂原 活化蛋白激酶激酶激酶激酶 3 (MAP4K3) 轴对人肝癌细胞增殖、 迁移和侵袭的影响。 方法 实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 检测肝癌组织、 癌旁组织以及人正常肝细胞、 人肝癌细胞 ( Huh-7、 SMMC-7721、 MHCC97 L) 中 BLACAT1、 miR-324-5p、 MAP4K3 mRNA 的表达水平; 将肝癌细胞系 Huh-7 细胞分为: ctrl 组、 si-NC 组、 si-BLACAT1 组、 si-BLACAT1 + miR-NC 组、 si-BLACAT1 + miR-324-5p inhibitor 组; 实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 检测各组细胞中 BLACAT1、 miR-324-5p、 MAP4K3 mRNA 的表达; CCK-8 法检测细胞增殖; 划痕实验检测细胞迁移; Transwell 小室检测细胞侵袭; 蛋白免疫印迹检测细胞中 MAP4K3、 PCNA、 MMP2、 MMP9、 c-Myc、 Cyclin D1 的表达; 双荧光素酶报告基因实验分别验证 BLACAT1 和 miR-324-5p、 miR-324-5p 和 MAP4K3 的关系。 结果 肝癌组织和人肝癌细胞系中 BLACAT1、 MAP4K3 mRNA 表达水平显著增加, miR-324-5p 表达显著降低 (P< 0. 05); 与 ctrl 组、 si-NC 组比较, si-BLACAT1 组 Huh-7 细胞的 BLACAT1、 MAP4K3 mRNA 表达、 A450值、 迁移率、 侵袭率、 PCNA、 MMP2、 MMP9、 MAP4K3、 c-Myc、 Cyclin D1 表达 明显降低 (P< 0. 05), miR-324-5p 表达显著增加 (P< 0. 05); 抑制 miR-324-5p 表达减弱了敲低 BASCAT1 对 Huh-7 细胞的增殖、 迁移和侵袭能力的抑制作用; BASCAT1 靶向负调控 miR-324-5p 表达, miR-324-5p 靶 向调控 MAP4K3 表达。 结论 敲低 BLACAT1 可能通过靶向 miR-324-5p 来下调 MAP4K3 表达, 进而抑制肝 癌细胞增殖、 迁移和侵袭。 相关文章 | 多维度评价 Select 54. Circular RNA LPAR3 通过 miR-143-5p / USP14 通路调控食管癌 细胞糖酵解的研究 查建栋, 徐志渊, 陈文琦 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 332-338.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.009 摘要 （316）      PDF （2391KB）（537）    可视化    收藏 目的 探究调控食管癌细胞糖酵解的机制。 方法 逆转录实时定量 PCR ( quantitative real-time, qRT-PCR) 法 分 别 检 测 环 状 RNA 溶 血 磷 脂 酸 受 体 ( circular RNA lysophosphatidic acid receptor 3, CircLPAR3), 微小 RNA-143-5 (microRNA-143-5p, miR-143-5p) 和泛素特异性蛋白酶 14 ( ubiquitin-specific protease 14, USP14) 的表达水平; 使用 Seahorse XF 24 细胞外通量分析仪测量细胞外酸化率 ( extracellular acidification rate, ECAR) 和耗氧率 (oxygen comsumpition rate, OCR); Western 印迹法检测糖酵解途径关键 酶 HK2 的表达水平; 使用 Starbase 数据库预测 CircLPAR3 与 miR-143-5p 以及 miR-143-5p 与 USP14 的靶向结 合位点, 双荧光素酶试验验证 CircLPAR3 和 miR-143-5p 以及 miR-143-5p 与 USP14 的靶向关系。 结果 与正 常人食管上皮细胞 (normal human esophageal epithelial cells, Het-1A) 组比较, 食管癌细胞系中 CircLPAR3 高表达, 且 KYSE450 细胞系的表达最高, 同时 miR-143-5p 低表达而 USP14 高表达。 与 Het-1A 组比较, KYSE450 组 HK2 的蛋白表达水平增加, 同时细胞 ECAR 增加, 整体糖酵解 OCR 减少; 敲低 CircLPAR3 的 表达导致细胞 HK2 的蛋白表达水平减少, ECAR 减少, 整体糖酵解 OCR 增加; 在抑制 CircLPAR3 的表达情 况下, 抑制 miR-143-5p 的表达能够部分逆转细胞的糖酵解途径; 双荧光素酶实验验证了 CircLPAR3 和 miR-143-5p 的靶向关系, 以及 miR-143-5p 和 USP14 的靶向关系。 结论 CircLPAR3 能够通过调控 miR-143-5p / USP14 通路调节食管癌细胞糖酵解途径。 相关文章 | 多维度评价 Select 55. BMP9 通过 P38 MAPK 信号通路对成骨细胞自噬和凋亡的作用研究 张阳, 马菁菁, 喻哲昊, 刘雪妮, 孙林春 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 339-345.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.010 摘要 （438）      PDF （3462KB）（443）    可视化    收藏 目的 研究 BMP9 对 P38 MAPK 信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。 方法 体外培养小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞系, 用雷帕霉素 ( rapamycin) 诱导细胞发生自噬, Western 印迹检测 BMP9、 P38、 p-P38 的蛋白表达。 再将细胞随机分组后进行相应处理, 分别为 pcDNA3. 1-BMP9 组 ( pcDNA3. 1-BMP9)、 BMP9 siRNA 组 (BMP9 siRNA)、 P38 激活组 (茴香霉素, 10 μmol / L)、 P38 抑制组 ( SB202190, 10 μmol / L)、 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组 ( pcDNA3. 1-BMP9 + SB-202190, 10 μmol / L)、 BMP9 siRNA + P38 激活组 (BMP9 siRNA + 茴香霉素, 10 μmol / L) 以及对照组。 Western 印迹检测自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 的表达, CCK-8 和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况。 结果 雷帕霉素处理 后的 MC3T3-E1 细胞中 LC3-Ⅱ、 Beclin-1、 BMP9 和 p-P38 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 组、 P38 激活组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05); BMP9 siRNA 组、 P38 抑制组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白降低 (P< 0. 05), P62 蛋白升高 (P< 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组 LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 蛋白水平与对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 组细胞增殖率升高、 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); BMP9 siRNA 细胞增殖率降低, 凋亡率升 高 (P均 < 0. 05)。 P38 激活组细胞增殖率升高, 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); P38 抑制组细胞增殖率降低, 凋 亡率升高 (P均 < 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组细胞增殖率、 凋亡率与 对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。 结论 BMP9 能激活 P38 MAPK 通路, 诱导成骨细胞自噬, 减少细胞凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 56. 复方守宫散通过 TNF-α 信号通路对骨癌痛大鼠痛觉敏化机制的研究 蔡琪 , 张良军 , 黄璟 , 毛汉文 , 田敬海 , 夏黎明 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 346-350.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.011 摘要 （387）      PDF （2859KB）（791）    可视化    收藏 目的 探讨复方守宫散 (Compound Shougong powder, CSP) 通过肿瘤坏死因子 α (TNF-α) 信号 通路对骨癌痛大鼠痛觉敏化机制的影响。 方法 通过注射 Lewis 肺癌细胞建立肺癌骨癌痛大鼠模型; 将大 鼠随机分为模型组、 阳性对照 (扶他林, 0. 1 g / kg) 组、 CSP 低 (CSP-L, 20 mg / kg)、 中 (CSP-M, 40 mg / kg)、 高 (CSP-H, 80 mg / kg) 剂量组, 并设置假手术组大鼠, 每组各 10 只。 干预结束后, 检测大鼠机械 性缩足反射阈值 (paw withdrawal mechanical threshold, PWMT); 全自动热痛测试仪检测大鼠热痛觉缩足潜 伏期 (paw withdrawal thermal lathency, PWTL); ELISA 法检测血清中 TNF-α、 白介素 ( IL) -1β、 IL-6 水平 变化; Western 印迹检测各组大鼠脊髓组织单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1) 以及 TNF-α 表达水平。 结果 与 假手术组相比, 模型组大鼠 IL-1β、 IL-6 水平、 TNF-α、 MCP-1 表达均显著升高, PWMT 显著降低, PWTL 显著缩短 ( P < 0. 05); 与模型组相比, CSP-L 组、 CSP-M 组、 CSP-H 组大鼠 IL-1β、 IL-6 水平、 TNF-α、 MCP-1 表达均显著降低, PWMT 显著升高, PWTL 显著延长 (P< 0. 05); CSP-H 组各项指标与阳性对照组 差异无统计学意义 (P> 0. 05)。 结论 CSP 可以改善肺癌骨癌痛大鼠疼痛反应, 发挥止痛作用, 可能与抑 制 TNF-α 信号通路有关。  相关文章 | 多维度评价 Select 57. 丙泊酚对脂多糖诱导的 BV2 细胞中炎性因子表达的影响 徐雅洁, 刘争杰, 董诺亚 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 351-358.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.012 摘要 （290）      PDF （2858KB）（2778）    可视化    收藏 目的 探讨丙泊酚 (propofol) 通过调控核转录因子-κB ( nuclear transcription factor-κB, NF-κB) 信号通路对活化的 BV2 细胞炎性因子的影响。 方法 将 BV2 细胞分为 5 组: 对照组、 模型组、 丙泊酚低剂 量组 (20 μmol / L)、 丙泊酚中剂量组 (50 μmol / L) 和丙泊酚高剂量组 (100 μmol / L)。 CCK-8 ( cell counting Kit-8) 实验检测细胞活力; ELISA ( enzyme linked immunosorbent assay) 实验检测白细胞介素-6 ( interleukin-6, IL-6)、 IL-1β、 肿瘤坏死因子 α ( tumor necrosis factor-α, TNF-α) 和一氧化氮合酶 ( nitric oxide synthase, NOS) 水平; 试剂盒检测活性氧 ( reactive oxygen species, ROS) 活性; Western 印迹检测核苷酸 结合寡聚化结构域样受体蛋白 3 (NOD-like receptor protein 3, NLRP3)、 凋亡相关斑点样蛋白 (apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC)、 半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)、 IκB 和 P65 的表达及 P65 的磷酸化水平; 免疫荧光染色观察 P65 进入胞核的情况。 结果 3 种浓度丙泊酚对细胞活力无影响。 与 对照组比较, LPS 组的 IL-6、 IL-1β、 TNF-α、 ROS 和 NOS 水平显著上升 (P< 0. 01); IκB 的表达显著下调, p-P65 / P65 的表达显著上调, P65 入核表达显著增多 (P< 0. 01); 经过不同剂量丙泊酚处理 BV2 细胞后, 逆转了上述结果, IL-6、 IL-1β、 TNF-α、 ROS 和 NOS 水平显著降低 (P< 0. 01); IκB 的表达显著上调, pP65 / P65 的表达显著下调, 核定位的 P65 蛋白显著减少 (P< 0. 01), 且上述结果呈剂量相关性。 结论 丙 泊酚可通过调节 NF-κB 信号通路减缓活化的 BV2 细胞中的炎性因子的表达。  相关文章 | 多维度评价 Select 58. 丙泊酚通过 SFRP1-Wnt 信号通路抑制肠癌细胞增殖侵袭的机制 研究 梁伟华, 蒋淼 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 359-364.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.013 摘要 （199）      PDF （2948KB）（278）    可视化    收藏 目的 研究丙泊酚调控 SFRP1-Wnt 信号通路抑制肠癌细胞增殖侵袭的作用机制。 方法 肠癌细 胞 SW620 及 HT29 分为对照组及丙泊酚组, CCK-8 检测细胞增殖活性, 细胞划痕实验和 Transwell 小室分析 细胞转移和侵袭能力, 逆转录实时荧光定量 PCR 检测 Wnt 信号通路相关基因, 染色质免疫沉淀技术分析 EZH2 及 H3K27Me3 在 SFRP1 启动子区的富集程度。 结果 CCK-8 细胞增殖试验表明肠癌细胞 SW620 及 HT29 丙泊酚处理 24 h 后, 丙泊酚组增殖活性显著低于对照组细胞 (P< 0. 01)。 细胞划痕实验表明丙泊酚 组细胞迁移愈合面积显著低于对照组 (P< 0. 01)。 Tranwell 小室实验发现, 丙泊酚组穿膜细胞数量显著低 于对照组 (P< 0. 01)。 qPCR 检测发现丙泊酚组肠癌细胞较对照细胞, E-cadherin 显著上调 (P< 0. 01), 而 N-cadherin 表达减低 (P< 0. 01); Wnt 信号通路靶基因 β-catenin、 c-Myc 及 Cyclin D1 与对照组比较明显下调 (P< 0. 01); Wnt 上游调节因子 SFRP1 也出现了显著表达下调 (P< 0. 01)。 染色质免疫沉淀揭示丙泊酚组 细胞的 EZH2、 H3K27Me3 在 SFRP1 启动子富集程度显著低于对照组细胞 (P< 0. 01)。 结论 丙泊酚具有抑 制肠癌细胞增殖和侵袭活性。 丙泊酚通过减弱 EZH2 对 SFRP1 表观沉默作用, 诱导其表达上调, 从而减低 Wnt 信号通路活性。 相关文章 | 多维度评价 Select 59. SCD1 保护胰岛 β 细胞避免 IL-1β 引起损伤的研究 梁瑾, 汪彦阳, 吴倜珺, 陈芳 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 365-370.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.014 摘要 （302）      PDF （1580KB）（737）    可视化    收藏 目的 探究硬脂酰辅酶 A 去饱和酶 1 (stearoyl-CoA desaturase 1, SCD1) 改善 IL-1β 引起的胰岛 β 细胞功能损伤的效应。 方法 将 SCD1 基因插入 pEGFP-C1 载体中, 构建 pEGFP-SCD1 过表达质粒, 将该 质粒转染进胰岛 β 细胞系 INS-1 和 βTC-6 细胞后, 用 IL-1β 处理上述细胞, 借助于蛋白免疫印迹、 Tunel 染 色、 葡萄糖/ 氯化钾刺激的胰岛素分泌实验 (GSIS / KSIS) 等方法研究 SCD1 对胰岛 β 细胞的保护作用。 结 果 IL-1β 处理后降低了胰岛 β 细胞 SCD1 的表达, 过表达 SCD1 可逆转 IL-1β 处理引起的胰岛 β 细胞胰岛 素合成和分泌下降以及凋亡增加的效应。 结论 SCD1 能够保护胰岛 β 细胞免受 IL-1β 造成的功能损伤。 相关文章 | 多维度评价 Select 60. 局部 RAS 组分在原发性开角型青光眼中作用的研究进展 王迪 , 李海军 , 段世超 , 任静 , 崔慧玲 , 赵茹梦 医学分子生物学杂志    2023, 20 (4): 371-374.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.015 摘要 （249）      PDF （723KB）（300）    可视化    收藏 肾素血管紧张素系统 (renin-angiotensin system, RAS), 由数十种血管紧张素肽、 肽酶和多种受 体组成, 特异性调节各组织器官功能, 维持水电解质的稳态平衡。 局部 RAS 组分广泛分布在人眼的组织结 构中, 并产生一系列生理及病理作用。 文章就 RAS 系统的主要活性因子成分, 及其如何维持原发性开角型 青光眼 (primary open angle glaucoma, POAG) 小梁组织正常生理功能及房水正常动力学状态, 以及其作为 治疗青光眼的潜在药物靶点的前景进行综述。  相关文章 | 多维度评价 Select 61. 间质表型循环肿瘤细胞在结肠癌中的预后价值 汤墅 , 张坤贤 , 赵国艳 , 杨朝纲 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 375-381.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.001 摘要 （699）      PDF （1608KB）（88）    可视化    收藏 目的 探究间质表型循环肿瘤细胞 (mesenchymal circulating tumor cells, M CTCs) 在结肠癌 (colon cancer, CC) 中的预后价值。 方法 选取2015 年1 月至2016 年6 月在武汉大学中南医院胃肠外科住院治疗 的 115 例 CC 患者为研究对象, 在入院后 24 h 内经外周静脉采取静脉血 2. 5 mL 于 EDTA 抗凝管中, 采用团 队前期自主研发的 CTCBIOPSY ® 设备结合免疫荧光染色 ( immunofluorescence staining, IF) 检测患者外周血 中间质表型 CTCs 的数目, 分析其与患者临床病理因素的相关性; 继而, 采用 Kaplan-Meier 生存曲线和 COX 回归分析方法探究间质型 CTCs 与患者预后的关系。 结果 不同肿瘤位置患者外周血中的间质表型 CTCs 的 数目无明显差异, 而肿瘤低中分化患者外周血中间质表型 CTCs 的数目显著多于高分化患者, Ⅲ期患者外 周血中间质表型 CTCs 的数目显著多于Ⅱ期和Ⅰ期; 进一步分析表明, 间质表型 CTCs 阳性与肿瘤分化程度 (P = 0. 013)、 肿瘤浸润深度 (P = 0. 010)、 淋巴结转移 (P = 0. 043)、 TNM 分期 (P< 0. 001)、 脉管浸润 (P< 0. 001)、 神经侵犯 (P = 0. 004) 以及 CEA 水平 (P< 0. 001) 相关; 生存分析显示, 间质表型 CTCs 阳 性患者的总生存期显著低于阴性者 (χ 2 = 9. 726, P = 0. 002), 且间质表型 CTCs 阳性是影响 CC 患者总生存 期的独立危险因素 (HR = 1. 752, 95 % CI: 1. 104 ~ 3. 871, P = 0. 015)。 结论 结肠癌患者外周血中间质表 型 CTCs 与肿瘤的恶性进展及患者的不良预后密切相关, 有望成为临床预后评估的新型生物标志物。  相关文章 | 多维度评价 Select 62. PD-1 抑制剂通过 STAT6 介导肿瘤相关巨噬细胞极化抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭 曲军, 陈科, 陈宋林, 冯湖文, 谢亚彬 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 382-389.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.002 摘要 （638）      PDF （4713KB）（914）    可视化    收藏 目的 探究 PD-1 抑制剂对肿瘤相关巨噬细胞 ( tumor-associated macrophages, TAM) 极化和前列 腺癌细胞增殖和侵袭的作用及其相关机制。 方法 采集 25 例前列腺癌患者肿瘤及癌旁组织, 实时定量荧光 PCR (qRT-PCR) 检测程序性死亡因子 1 (programmed death-1, PD-1)、 巨噬细胞甘露糖受体 (macrophage mannose receptor, CD206) 和信号转导和转录激活因子 6 ( signal transduction and transcription activator 6, STAT6) 表达水平并进行斯皮尔曼 ( Spearman) 相关性分析。 将人单核细胞白血病细胞 ( human monocytic leukemia cells, THP-1) 细胞诱导为 TAM, 期间加入 PD-1 抑制剂 Camrelizumab, 分组为 M0 组、 M0 + Camrelizumab 组、 TAM 组、 TAM + Camrelizumab 组; THP-1 细胞诱导为 TAM 期间加入 STAT6 抑制剂 AS1517499, 分组为 M0 组、 M0 + AS1517499 组、 TAM 组、 TAM + AS1517499 组。 通过 qRT-PCR 和蛋白质印迹法检测 STAT6 和 CD206 表达水平, 酶联免疫吸附反应检测白介素 13 ( interleukin-13, IL-13)、 转化生长因子-β (transforming growth factor-β, TGF-β) 和一氧化氮合成酶 ( nitric oxide synthase, iNOS) 分泌水平。 将各组 细胞分别与前列腺癌细胞 DU145 共孵育, 通过 CCK8 检测 DU145 细胞增殖水平, Transwell 检测 DU145 细胞 侵袭水平。 结果 与癌旁组织相比, 前列腺肿瘤组织中 PD-1、 CD206 和 STAT6 表达水平升高, 并在肿瘤组 织中呈正相关 (P均 < 0. 05)。 与 M0 组相比, TAM 组 CD206 和 STAT6 表达水平升高, IL-13、 TGF-β 分泌水 平增加, iNOS 分泌水平减少, 与其共孵育的 DU145 细胞增殖水平升高, 侵袭能力增强 (P均 < 0. 05)。 与 TAM 组相比, TAM + Camrelizumab 组 CD206 和 STAT6 表达水平降低, IL-13、 TGF-β 分泌水平减少, iNOS 分泌水平增加, 与其共孵育的 DU145 细胞增殖水平降低, 侵袭能力减弱 (P均 < 0. 05)。 与 TAM 组相比, TAM + AS1517499 组 CD206 表达水平降低, IL-13、 TGF-β 分泌水平减少, iNOS 分泌水平增加, 与其共孵育 的 DU145 细胞增殖水平降低, 侵袭能力减弱 (P均 < 0. 05)。 结论 PD-1 抑制剂通过抑制巨噬细胞向 TAM 极化从而降低前列腺癌细胞的增殖和侵袭, 其作用机制可能是通过抑制巨噬细胞 STAT6 通路实现。  相关文章 | 多维度评价 Select 63. HIF-1α 促进恶性脑膜瘤血管发生的分子机制 帕热哈提江·依孜木, 麦伍兰江·阿卜杜热西提, 阿布都克尤木·阿布都吉力力 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 390-396.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.003 摘要 （209）      PDF （5223KB）（20）    可视化    收藏 目的 探讨 HIF-1α 在恶性脑膜瘤血管发生中的关键作用机制。 方法 qPCR 法和免疫组织化学 法测定正常胎盘组织和良性 (WHOⅠ级) 至复发性 (WHOⅡ ~ Ⅲ级) 脑膜瘤组织中 HIF-1α 和 IGF1R 的 mRNA 和蛋白质表达水平。 双荧光素酶报告基因分析和 ChIP 实验证明 HIF-1α 与 IGF1 基因调控区的直接作 用关系。 采用 shRNA 敲低间变性脑膜瘤 CRL-3370 细胞中 HIF-1α 的表达。 ELISA 法测定敲低 HIF-1α 后 CRL-3370 细胞分泌 IGF1 和 VEGF 的水平变化。 蛋白免疫印迹法测定细胞中 p-IGF1Rβ、 IGF1Rβ 和 VEGFR2 的表达水平变化。 建立 CRL-3370 细胞与 HUVEC2 的共培养体系, 通过缺氧培养诱导 CRL-3370 细胞中 HIF-1α 表达并随后进行 shRNA 敲低。 CCK-8 法测定共培养体系中 HUVEC2 的细胞增殖能力; qPCR 法测定其胞 内 VEGF、 ANGP1 和 MMP2 mRNA 的表达水平; 划痕实验和 Transwell 细胞侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能 力。 结果 随着脑膜瘤由良性 (WHOⅠ级) 至复发性 (WHOⅡ ~ Ⅲ级) 进展, 脑膜瘤组织中 HIF-1α 和 IGF1R 的 mRNA 和蛋白质表达水平增强 (P< 0. 01)。 与对照组相比, IGF1 组的荧光素酶活性明显上调; 与 IGF1 组相比, 删除位点 4 组的荧光素酶活性被明显抑制 ( P < 0. 05)。 ChIP 实验结果显示, HIF-1α 组 IGF1site-4 的 DNA 含量明显高于其对应 IgG 组的 DNA 含量 (P< 0. 05)。 与 shRNA NT 组相比, HIF-1α shRNA 组 CRL-3370 细胞分泌 IGF1 和 VEGF 的水平明显降低; 胞内 p-IGF1Rβ、 IGF1Rβ 和 VEGFR2 的表达水平 明显降低。 共培养体系中 HUVEC2 的增殖能力明显降低; 其胞内 VEGF、 ANGP1、 MMP2 mRNA 表达水平明 显降低; 细胞迁移和侵袭能力明显降低 (P< 0. 05)。 结论 复发性脑膜瘤上调 HIF-1α 直接作用并增强 IGF1 / IGF1R 轴促进 HUVEC2 的血管发生和肿瘤恶性进展。 相关文章 | 多维度评价 Select 64. AKR1B10 通过靶向糖酵解途径对肝癌细胞增殖和凋亡的影响 汤晓青 , 郭玺 , 万焱 , 王洁 , 徐斌 , 陈瑾 , 党富涛 , 付海艳 , 罗煜 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 397-404.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.004 摘要 （1053）      PDF （5189KB）（1257）    可视化    收藏 目的 探索醛酮还原酶家族 1 成员 B10 ( aldo-keto reductase family 1 member B10, AKR1B10) 在 肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma, HCC) 糖酵解中的功能及其潜在机制。 方法 利用生物信息学手段分 析 AKR1B10 在 HCC 中的表达。 实时荧光定量聚合酶链反应 ( real-time reverse transcription PCR, qRT-PCR) 和蛋白质印迹 (Western blotting) 检测 AKR1B10 的表达; 细胞计数试剂盒 8 ( cell counting kit-8, CCK-8)、 Transwell 实验和流式细胞术分别检测细胞增殖、 迁移侵袭和凋亡; qRT-PCR 检测骨髓细胞瘤病毒癌基因 (myelocytomatosis, MYC)、 己糖激酶 2 ( hexokinase 2, HK2)、 磷酸甘油酸激酶 1 ( phosphoglycerate kinase 1, PGK1) 的表达水平; Seahorse XP96 分析胞外酸化率 ( extracellular acidification rate, ECAR) 和耗氧率 (oxygen consumption rate, OCR); 利用试剂盒检测丙酮酸、 乳酸、 柠檬酸、 苹果酸的含量。 结果 生物信 息学分析结果显示 HCC 组织和细胞中 AKR1B10 存在高表达, 且 GSEA 通路富集分析显示其在糖酵解通路 上富集。 细胞实验发现过表达 AKR1B10 可以促进 HCC 细胞增殖、 迁移、 侵袭, 并抑制细胞凋亡。 此外, 过表达 AKR1B10 可以促进 HCC 细胞中 MYC、 HK2 和 PGK1 的表达, 并提高糖酵解水平。 回复实验显示糖 酵解抑制剂 (2-deoxy-D-glucose, 2-DG) 可以逆转 AKR1B10 对 HCC 细胞的增殖、 迁移和侵袭的促进作用。 结论 AKR1B10 可以通过激活糖酵解通路促进 HCC 增殖, 提示 AKR1B10 可能是一种新的 HCC 诊断标志物 和治疗靶点。 相关文章 | 多维度评价 Select 65. 急性呼吸窘迫综合征患者血清 Eotaxin-1、 S1PR1 的表达及其与预后的关系 林云霞, 刘源源, 王生伟 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 405-410.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.005 摘要 （250）      PDF （1435KB）（201）    可视化    收藏 目的 探讨急性呼吸窘迫综合征 (acute respiratory distress syndrome, ARDS) 患者血清嗜酸性粒 细胞趋化因子-1 (eosinophil chemotactic factor 1, Eotaxin-1)、 内皮细胞表面鞘氨醇-1-磷酸受体 1 ( sphingosin-1-phosphate receptor 1, S1PR1) 表达及其与预后的关系。 方法 选取 2019 年 2 月至 2022 年 2 月南京脑 科医院收治的 ARDS 患者 140 例, 按照氧合指数 (PaO2 / FiO2 ) 不同分为轻度组 ( 201 ~ 300 mmHg) ( n = 43)、 中度组 (101 ~ 200 mmHg) (n = 40) 和重度组 (≤100 mmHg) (n = 57); 另选取同时期体检的 50 例 健康者作为对照组。 根据患者 28 d 预后情况将患者分为存活组 95 例与死亡组 45 例。 利用 APACHE-Ⅱ对 ARDS 患者进行评分。 采用酶联免疫吸附法 (ELISA) 检测各组人群血清 Eotaxin-1、 S1PR1 水平; 采用 Pearson 相关性分析 ARDS 患者血清 Eotaxin-1 和 S1PR1 水平与 APACHE-Ⅱ评分、 肺损伤评分及 PaO2 / FiO2间 的相关性; 使用 ROC 曲线分析 Eotaxin-1、 S1PR1 对 ARDS 患者预后不良的预测价值; 采用 logistic 回归分析 影响 ARDS 患者预后不良的危险因素。 结果 与对照组比较, ARDS 组血清 Eotaxin-1 水平升高, S1PR1 水 平降低 (P< 0. 05), 与轻度组比较, 中度组、 重度组 ARDS 患者血清 Eotaxin-1 水平显著升高 (P< 0. 05), 血清 S1PR1 水平显著降低; 与中度组比较, 重度组 ARDS 患者血清 Eotaxin-1 水平显著升高, 血清 S1PR1 水 平显著降低 (P< 0. 05); 死亡组患者血清 Eotaxin-1 水平显著高于存活组, 血清 S1PR1 水平显著低于存活组 (P< 0. 05); 经 Pearson 法分析血清 Eotaxin-1 与 APACHE-Ⅱ评分、 肺损伤评分呈正相关, 与 PaO2 / FiO2呈负相 关 (P< 0. 05), S1PR1 水平与 APACHE-Ⅱ评分、 肺损伤评分呈负相关, 与 PaO2 / FiO2 呈正相关 (P< 0. 05); ROC 分析显示, Eotaxin-1 预测 ARDS 患者预后不良的曲线下面积 (AUC) 为 0. 867, 截断值为 104. 348 pg / mL, 敏感性为 87. 9 % , 特异性为 82. 0 % ; S1PR1 预测 ARDS 患者预后不良 AUC 为 0. 849, 截断值为 71. 099 pg / mL, 敏感性为 89. 3 % , 特异性为 80. 0 % ; logistic 回归分析表明, 高 Eotaxin-1 水平、 低 S1PR1 水平是影 响 ARDS 患者预后不良的危险因素 (P< 0. 05)。 结论 ARDS 患者血清 Eotaxin-1 升高、 S1PR1 水平下降与病 情严重程度、 不良预后有关, 有望作为 ARDS 患者病情评估和预后评估的辅助指标。 相关文章 | 多维度评价 Select 66. miRNA-34a-5p 靶向 Fut8 抑制巨噬源性泡沫细胞的运动能力 黄云秀 , 陈林木 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 411-416.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.006 摘要 （212）      PDF （4053KB）（1120）    可视化    收藏 目的 探讨 miRNA-34a-5p / 岩藻糖基转移酶 8 ( fucosyltransferase, Fut8) 轴对巨噬源性泡沫细胞 运动能力的影响。 方法 首先利用生物信息学和 RT-PCR 寻找并检测 Fut8 基因上游的调控 miRNA 变化情 况; 其次利用 Pearson 相关性分析观察斑块组患者血清中 Fut8 和 miRNA 的相关性; 最后构建泡沫细胞模型 观察 miRNA 对泡沫细胞运动能力的影响并明确 Fut8 在其中的重要作用。 结果 miRNA-34a-5p 和 miRNA-449b-5p 在斑块组患者血清中均显著上升, 但 miRNA-34a-5p 与 Fut8 有更大的相关性。 miRNA-34a-5p 在泡沫 细胞形成时含量显著升高, 抑制 miRNA-34a-5p 表达会促进 Fut8 的表达。 高表达的 miRNA-34a-5p 会导致穿 透到下室的细胞数量减少。 过表达 Fut8 预处理细胞, 会增加穿透到下室的细胞数量。 结论 miRNA-34a-5p 为 Fut8 的上游 miRNA 之一, 通过下调 Fut8 表达而抑制巨噬源性泡沫细胞运动能力。  相关文章 | 多维度评价 Select 67. 葛根素通过 Nrf2 / HO-1 通路对青光眼大鼠模型视网膜损伤的保护作用 刘鹏 , 曹建 , 谢梅芬 , 张映平 , 彭菲 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 417-425.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.007 摘要 （509）      PDF （6546KB）（65）    可视化    收藏 目的 急性青光眼期间视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的死亡会导致视网膜神经的 进行性变性和不可逆的失明。 葛根素被证实具有抗氧化和抗神经炎症的特性,可保护视网膜免受急性青光眼 的伤害。 此研究旨在探索其作用机制。 方法 构建急性青光眼大鼠模型,将大鼠随机分为 5 组:正常对照组 (normal)、SnPP 组、I/ R 组、葛根素(100 μmol / L)组和葛根素 + SnPP 组。 I/ R、葛根素和葛根素 + SnPP 组的大 鼠采用苏木精和伊红染色评价视网膜状况。 ELISA 和 qRT-PCR 法检测 TNF-α、IL-1β 的水平,蛋白质印迹法 检测 cleaved caspase-8、Nrf2、HO-1 蛋白水平。 免疫荧光检测 Brn-3a、β3-tubulin 和 RBPMS 的表达;流式细胞术 分别检测细胞凋亡和细胞内活性氧的水平。 结果 葛根素治疗后显著减轻了急性青光眼大鼠的视网膜损伤 和 RGCs 死亡,视网膜中活性氧和炎性细胞因子的产生显著减少。 此外,葛根素处理直接降低了 ROS 的产生, 并重新平衡了细胞内的氧化还原状态,从而有助于 RGCs 在体外的存活。 葛根素治疗也减少了体外炎性细胞 因子的产生。 从机制上讲,葛根素通过调节 Nrf2 / HO-1 通路,抑制 RGCs 的细胞凋亡和炎性细胞因子产生。 此外,当使用 HO-1 抑制剂 SnPP 时,葛根素介导的急性青光眼的神经保护作用被消除。 结论 研究确定了 RGCs 凋亡的潜在机制,葛根素作为一种新的治疗剂,对急性青光眼具有神经保护作用。  相关文章 | 多维度评价 Select 68. LncRNA MALAT1 通过调控 miR-181d-5p 对脂多糖诱导的库普弗 细胞增殖活性和炎性因子表达的影响 杜娜 , 段少琼 , 宋波 , 李开林 , 颜悦蓉 , 刘悦 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 426-431.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.008 摘要 （172）      PDF （4053KB）（105）    可视化    收藏 目的 探讨长链非编码 RNA 肺腺癌转移相关转录本 1 (LncRNA MALAT1) 对脂多糖 (LPS) 诱 导的库普弗细胞 (kupffer cells, KCs) 存活和炎性因子表达的影响及其可能作用机制。 方法 采用 LPS 诱 导 KCs 建立细胞损伤模型, 随机分组为对照 ( Con) 组、 LPS 组、 LPS + si-NC 组、 LPS + si-MALAT1 组、 LPS + miR-NC 组、 LPS + miR-181d-5p 组、 LPS + si-MALAT1 + anti-miR-NC 组、 LPS + si-MALAT1 + anti-miR-181d-5p 组; 实时荧光定量聚合酶链式反应 ( qRT-PCR) 检测 LncRNA MALAT1、 miR-181d-5p 的表达量; 细胞计数试剂盒 8 (CCK-8) 法检测细胞增殖活性; 酶联免疫吸附实验 (ELISA) 检测白细胞介素 (IL) -6、 IL-12、 肿瘤坏死因子 α (TNF-α) 的水平; 双荧光素酶报告实验检测 LncRNA MALAT1 与 miR-181d-5p 的靶 向关系。 结果 与 Con 组比较, LPS 组 LncRNA MALAT1 的表达量升高 (P< 0. 05), IL-6、 IL-12、 TNF-α 的 水平升高 (P< 0. 05), miR-181d-5p 的表达量降低 (P< 0. 05), 细胞增殖活性降低 (P< 0. 05)。 与 LPS + si-NC 组比较, LPS + si-MALAT1 组细胞增殖活性升高 ( P < 0. 05), IL-6、 IL-12、 TNF-α 的水平降低 ( P < 0. 05)。 LncRNA MALAT1 可负向调控 miR-181d-5p 的表达; 与 LPS + miR-NC 组比较, LPS + miR-181d-5p 组 细胞增殖活性升高 (P< 0. 05), IL-6、 IL-12、 TNF-α 的水平降低 (P< 0. 05)。 与 LPS + si-MALAT1 + anti-miR-NC 组比较, LPS + si-MALAT1 + anti-miR-181d-5p 组细胞增殖活性降低 (P< 0. 05), IL-6、 IL-12、 TNF-α 的水平升高 (P< 0. 05)。 结论 干扰 LncRNA MALAT1 表达可通过促进 miR-181d-5p 表达而促进 LPS 诱导 的 KCs 存活及抑制细胞炎性因子表达。 相关文章 | 多维度评价 Select 69. 癌相关成纤维细胞外泌体 miR-34c-5p 对胃癌细胞干细胞样表型的影响  徐秀连, 谢平, 印隆宽, 袁华燕, 刘建军, 王攀 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 432-438.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.009 摘要 （220）      PDF （6325KB）（134）    可视化    收藏 目的 探讨癌相关成纤维细胞 (cancer-associated fibroblasts, CAFs) 来源的外泌体 miR-34c-5p 是 否有助于促进胃癌 (gastric carcinoma, GC) 细胞的干细胞样特性。 方法 收集并鉴定初代培养的 CAFs 和 配对的正常成纤维细胞 (normol fibroblasts, NFs) 的外泌体, 检测 CAFs 和 NFs 之间外泌体中 miR-34c-5p 的 差异表达。 CCK8 实验检测 GC 细胞活力; 克隆形成实验检测 GC 细胞增殖能力; Transwell 实验检测 GC 细 胞侵袭能力; 细胞成球形成实验评估 GC 细胞成球能力; 蛋白质印迹法检测细胞干细胞特性相关蛋白的表 达。 结果 miR-34c-5p 在 CAFs 衍生的外泌体中的表达显著降低。 与 CAFs-exo 组比较, CAFs-exo 中 miR34c-5p 抑制 GC 细胞的增殖和侵袭能力 (P< 0. 05); 抑制 GC 细胞成球, 并降低 SOX2、 OCT4 和 NANOG 蛋 白的表达水平, 有显著性差异 (P< 0. 05)。 结论 CAFs 来源的外泌体 miR-34c-5p 抑制 GC 细胞的干细胞样 表型。 相关文章 | 多维度评价 Select 70. 苦蒿素改善新生大鼠急性肺损伤的作用机制 杨亚龙, 林文东, 林清凡 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 439-443.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.010 摘要 （206）      PDF （1867KB）（74）    可视化    收藏 目的 分析苦蒿素改善急性肺损伤 (acute lung injury, ALI) 的机制。 方法 60 只新生大鼠随机 等分为假手术组、 模型组、 苦蒿素低、 中、 高剂量组和地塞米松组。 血氧分压 ( PaO2 ) 和肺干湿重比 (W/ D) 评估肺水肿; HE 染色检测肺组织病理损伤; ELISA 检测大鼠支气管肺泡灌洗液 ( bronchoalveolar lavage fluid, BALF) 中氧化应激和炎性水平; 蛋白质印迹法检测大鼠肺组织高迁移率族蛋白 B1 ( high mobility group box 1 protein, HMGB1) / 核因子 κB (nuclear factor kappa-B, NF-κB) 信号通路相关蛋白表达。 结 果 与模型组相比, 苦蒿素高剂量组 PaO2明显上升, W/ D 和肺损伤评分、 BALF 炎症和氧化应激水平、 肺 组织 HMGB1、 TLR4 和 p-NF-κB P65 / NF-κB P65 表达明显下降 (P< 0. 05)。 结论 苦蒿素通过提高抗氧化 抗炎活性及阻断 HMGB1 / NF-κB 信号通路改善 ALI。 相关文章 | 多维度评价 Select 71. 干扰 LncRNA BCYRN1 对乳腺癌 MCF-7 细胞增殖、 运动和移植 瘤生长的影响 吉棚 , 赵华山 , 王晨 , 刘淑荣 , 马建增 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 444-449.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.011 摘要 （165）      PDF （3446KB）（79）    可视化    收藏 目的 探讨短发卡 RNA (short hairpin RNA, shRNA) 干扰长链非编码 RNA BCYRN1 ( long non-coding RNA BCYRN1, LncRNA BCYRN1) 对乳腺癌 MCF-7 细胞增殖、 运动及移植瘤生长的影响。 方法 实 时定量 PCR (real-time quantitative PCR, RT-PCR) 检测乳腺癌及癌旁组织 BCYRN1 表达, 将乳腺癌 MCF-7 细胞分为空白对照组 (Control)、 阴性对照组 ( shRNA-NC) 和干扰组 ( sh-BCYRN1), 通过试剂盒转染转 入目的片段并进行 RT-PCR 验证, Edu 法、 transwell 法、 划痕实验和蛋白质印迹法 (Western blotting) 分别 检测细胞增殖、 侵袭、 迁移能力及其相关蛋白表达, 免疫荧光检测细胞波形蛋白 (Vimentin) 水平。 通过 裸鼠腋下注射 MCF-7 细胞建立裸鼠移植瘤模型, 待成瘤后将裸鼠分为空白对照组、 干扰组, 每组各 20 只, 干扰组、 空白对照组裸鼠分别给予 sh-BCYRN1 及其阴性对照转染干预, 观察 4 周后移植瘤 BCYRN1 表达、 肿瘤重量和 Ki67、 N-钙粘蛋白 (N-cadherin) 蛋白表达。 结果 乳腺癌组织 BCYRN1 表达高于癌旁组织 (P< 0. 05)。 比较空白对照组, 干扰组 Edu 阳性细胞百分比、 单个视野细胞侵袭数目、 细胞迁移率、 Vimentin 阳性率降低 (P< 0. 05), Ki67、 N-cadherin 蛋白表达降低, E-钙粘蛋白 (E-cadherin) 蛋白表达升高(P< 0. 05)。 干扰组移植瘤 BCYRN1 表达降低, 肿瘤质量、 Ki67 及 N-cadherin 蛋白表达低于空白对照组移植瘤 (P< 0. 05)。 结论 shRNA 干扰 LncRNA BCYRN1 可抑制乳腺癌 MCF-7 细胞增殖、 运动和移植瘤生长。  相关文章 | 多维度评价 Select 72. β-catenin 蛋白 H36P 突变对肝癌细胞的增殖的影响 吴忠坤 , 宋平辉 , 张毅 , 李春博 , 李勤新 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 450-454.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.012 摘要 （285）      PDF （2558KB）（68）    可视化    收藏 目的 探究 β-catenin 蛋白 H36P 突变对肝癌细胞的增殖的影响。 方法 通过 PCR 扩增法扩增 CTNNB1 基因, 包括 WT-CTNNB1、 G34R-CTNNB1 和 H36P-CTNNB1。 通过双酶切法克隆至 p-CMV5 质粒载 体, 将相对应的质粒瞬转至 Huh7、 HepG2 细胞中, 并检测其蛋白表达情况。 其次, 使用 CHX 按时间梯度 处理表达目的基因的细胞, 比较 H36P-β-catenin 与 WT-β-catenin、 G34R-β-catenin 的泛素化降解情况并分析 蛋白稳定性。 随后通过质核分离检测 H36P-β-catenin 核转位能力。 最后, 通过 CCK-8 计数法检查 H36P-β-catenin 对肝癌细胞增殖能力的影响。 结果 突变体 G34R、 H36P 的蛋白质表达水平, 与野生型 β-catenin 无 明显差异。 在 HepG2 细胞株中, CHX 作用 8 h 时 WT-β-catenin 几乎完全降解, 而 G34R 和 H36P 只降解了 75 % 和 60 % 。 Huh7 细胞株中的情况类似, 6 hrs 时 WT-β-catenin 几乎完全降解, 而 G34R 和 H36P 只降解 了约 40 % 。 以上结果差异均具有统计学意义 (P< 0. 05)。 相较于 WT-β-catenin, G34R 和 H36P 促使 HepG2 细胞增殖量提升。 在表达 β-catenin 突变体的肝癌细胞泛素化降解受抑制的情况下, 与 WT-β-catenin、 突变 体 G34R 相比, 表达突变体 H36P 的肝癌细胞核转位明显增加。 结论 β-catenin 蛋白 H36P 突变蛋白表达稳 定、 核转位情况增多, 泛素化降解过程受阻, 并能促进 HepG2 和 Huh7 肝癌细胞的增殖。 相关文章 | 多维度评价 Select 73. DNA 异常甲基化在口腔鳞癌中的研究进展 许益敏, , 崔丹, , 卢志远, , 卢杨, , 周梦缘, , 肖灿, 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 455-461.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.013 摘要 （266）      PDF （751KB）（280）    可视化    收藏 口腔鳞癌是一种常见的头颈部恶性肿瘤, 其发生和发展与基因的异常表达有关。 DNA 异常甲基 化是一种影响基因表达的机制, 已经被证实在口腔鳞癌的发生和发展中起着重要作用。 综述主要对 DNA 甲 基化在口腔鳞癌中的研究进展及检测技术手段进行阐述, 包括样本的类型、 与口腔鳞癌相关的基因甲基化 水平、 生物学功能及其在肿瘤进展中的临床解读。 未来的研究将继续深入探究 DNA 异常甲基化与口腔鳞癌 的发生、 发展、 治疗和预后之间的关系, 有助于寻找更有效的治疗策略和预后评估方法。 相关文章 | 多维度评价 Select 74. tRNA 衍生的小 RNA 在肿瘤中的研究进展  王鑫, 李纪鹏, 俞万钧, 傅中明 医学分子生物学杂志    2023, 20 (5): 462-466.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.05.014 摘要 （278）      PDF （1195KB）（637）    可视化    收藏 tRNA 衍生的小 RNA (transfer RNA-derived small RNA, tsRNA) 是一种在人体组织中稳定表达的 新型非编码 RNA。 目前已知两种 tsRNA 亚型: tRNA 半分子和 tRNA 衍生片段。 高通量测序技术的发展和应 用为肿瘤中 tsRNA 的失调提供了越来越多的证据。 tsRNA 在肿瘤组织中的异常表达已经被发现与肿瘤的增 殖、 侵袭和进展有关。 这些新发现的 tsRNA 有很大的潜力作为新的生物标志物和肿瘤治疗的靶点。 综述就 tsRNA 在肿瘤中的最新研究进展进行论述并讨论其潜在临床价值。  相关文章 | 多维度评价 Select 75. 靶向 EBV 潜伏膜蛋白 1 的单克隆抗体促进 HIV 相关 EBV 阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡的分子机制  涂小云, 陈宇, 熊玉红, 邓爱花, 孙春枝, 刘阳 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 467-472.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.001 摘要 （281）      PDF （1986KB）（750）    可视化    收藏 目的 制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤 (Burkitt lymphoma, BL) 的抗 EBV 潜伏膜蛋白 1 ( latentmembrane protein-1, LMP1) 单克隆抗体。 方法 人工合成 EBV 潜伏膜蛋白 1 的跨膜结构域 5 ( transmembrane domain 5, TMD5), 并以此为抗原, 采用杂交瘤法制备抗 TMD5 单抗。 ELISA 法测定小鼠腹水中的抗体效价。 7-氨基放线菌素 D (7-Aminoactinomycin D, 7-AAD) / Annexin V-PE 双标记流式细胞术和 JC-1 染色联合流式细胞术测定线粒体膜电势评估单抗对 BL 细胞系 Daudi 细胞的促凋亡活性。 蛋白质印迹法测定Daudi 细胞内促存活信号通路 p38-MAPK / IKK / NF-κB 相关蛋白的表达水平。 结果 经过 2 轮筛选, 获得 R2- 2-5E-6C 和 R2-2-8D-3A 两种单抗, 这 2 种单抗均能与 TMD5 发生抗体-抗原特异性结合, 而与 GAPDH 无免疫反应。 与 NC 组相比, R2-2-5E-6C 组和 R2-2-8D-3A 组处理后的 Daudi 细胞中 Annexin V + 7-AAD + 细胞所占百分比增加; JC-1 荧光强度 < 104的细胞所占百分比增加; 胞内 p38-MAPK、 IKK 和 NF-κB 的表达水平降低 (P< 0. 05)。 结论 筛选获得的抗 TMD5 单抗 R2-2-5E-6C 和 R2-2-8D-3A 可通过抑制 LMP1 介导的 p38- MAPK / IKK / NF-κB 信号通路的活性促进 BL 凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 76. 氧化槐果碱对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及机制 #br# 吴豫, 邓伦志, 徐凯, 薛丹妮 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 473-478.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.002 摘要 （292）      PDF （2926KB）（128）    可视化    收藏 目的 探究氧化槐果碱 (oxysophocarpine, OSC) 对大鼠 MIRI 的保护作用及其作用机制。 方法 超声心动图仪检测心脏功能指标; HE 染色观察心肌组织病变; ELISA 法检测心损标记物及血清炎症因子水平; 试剂盒检测氧化应激标记物; 蛋白质印迹检测相关蛋白表达水平。 结果 与 sham 组相比, I / R 组大鼠出现明显心肌损伤, 心脏功能明显降低, CK-Mb、 Mb 和 cTnI 水平显著上调; 血清 SOD 水平明显降低, MDA 和 LDH 水平升高; TNF-α、 IL-1β、 IL-6 和 IL-10 水平均明显升高, p-ERK1 / 2 和 p-JNK 表达显著上调。与 I / R 组相比, OSC 处理后明显改善心肌损伤和心肌功能; 抑制心肌氧化应激和促炎性因子释放; 下调 pERK1 / 2 和 p-JNK 表达。 结论 OSC 可改善大鼠 I / R 导致的心脏功能障碍, 并抑制氧化应激和炎症反应,其作用机制与 ERK / JNK 通路下调有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 77. CircPRKCI 通过 miR-101-3p / TGFBR3 轴调节食管鳞状细胞癌的增殖、凋亡、迁移和侵袭 #br# 马骏, 高杨, 马尧, 任明智, 张天翼 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 479-486.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.003 摘要 （264）      PDF （7035KB）（113）    可视化    收藏 目的 探索环状 RNA PRKCI (circular ribonucleic acid PRKCI, CircPRKCI) 通过 miR-101-3p / 转化生长因子 βⅢ 型受体 ( transforming growth factor beta type Ⅲ receptor, TGFBR3) 轴对食管鳞状细胞癌 ( esophageal squamous cell carcinoma, ESCC) 细胞恶性行为学的影响。 方法 将 si-NC、 si-CircPRKCI、 miRNC、 miR-101-3p mimics、 vector + miR-101-3p mimics、 CircPRKCI + miR-101-3p mimics 转染至 KYSE150 细胞中, 采用实时荧光定量 PCR ( Real-time quantitative PCR, RT-qPCR) 法检测细胞 CircPRKCI、 miR-101-3p、TGFBR3 mRNA 表达。 并采用 RT-qPCR、 细胞计数试剂盒 8 ( cell counting kit-8, CCK-8) 法、 Transwell 法、流式细胞术、 蛋白质印迹法检测各组细胞恶性行为情况。 结果 CircPRKCI 和 TGFBR3 mRNA 在 KYSE150细胞中上调, miR-101-3p 表达下调 (P< 0. 05); 沉默 CircPRKCI 能够靶向上调 miR-101-3p, 抑制 TGFBR3 表达以及细胞活力、 侵袭与迁移能力, 增强细胞凋亡 (P< 0. 05); 上调 miR-101-3p 能够显著抑制 KYSE150 细胞恶性行为, 而过表达 CircPRKCI 会减弱上调 miR-101-3p 对 KYSE150 细胞恶性行为的抑制作用 ( P < 0. 05)。 结论 CircPRKCI 可通过靶向负调节 miR-101-3p / TGFBR3 轴, 影响 ESCC 细胞的增殖、 迁移、 侵袭与凋亡等恶性生物学行为。 相关文章 | 多维度评价 Select 78. 白桦脂酸对 RANKL 诱导的 MC3T3-E1 细胞成骨分化的影响及机制研究 #br# 李宗蔚, 王家洪, 卿泉 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 487-492.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.004 摘要 （235）      PDF （2183KB）（148）    可视化    收藏 目的 观察白桦脂酸 (betulinic acid, BA) 对核因子 κB 受体活化因子配体 ( receptor activator ofnuclear factor-κb ligand, RANKL) 诱导的小鼠前成骨细胞系 ( MC3T3-E1) 成骨分化的影响, 并探讨其机制。 方法 体外培养 MC3T3-E1 细胞, 采用不同浓度 (0、 5、 10、 20 μmol / L) BA 培养 48 h, 采用 CCK-8实验检测 MC3T3-E1 细胞增殖能力。 将实验分为 Control 组、 RANKL 组、 RANKL + BA 组、 RANKL + BA +740Y-P (PI3K 激动剂) 组及 RANKL + BA + Curcumin (MEK / ERK 激动剂) 组。 采用 ELISA 法检测白介素-6 (IL-6) 水平; 碱性磷酸酶 ( alkaline phosphatase, ALP) 活性检测试剂盒测定 ALP 活性; 蛋白质印迹检测成骨标记蛋白骨钙蛋白 ( osteocalcin, OCN)、 骨桥蛋白 ( osteopontin, OPN)、 Collagen Ⅰ 、 p-P65、 P65以及 MEK / ERK 与 PI3K 信号通路蛋白表达。 结果 BA (5、 10 μmol / L) 对 MC3T3 细胞无明显毒性。 10μmol / L BA 预处理显著减少 RANKL 诱导的 IL-6 生成及 p-P65 / P65 比值 ( P< 0. 05)。 10 μmol / L BA 能明显逆转 RANKL 诱导的 OCN、 OPN、 Collagen Ⅰ 蛋白表达下调 ( P< 0. 05)。 10 μmol / L BA 能明显抑制 MEK、ERK、 PI3K 磷酸化 (P< 0. 05)。 10 μmol / L BA 显著增加成骨标记蛋白 OCN、 OPN、 Collagen Ⅰ 蛋白表达,提高 APL 染色阳性率及活性, 其作用被 MEK / ERK 激动剂姜黄素和 PI3K 激动剂 740Y-P 明显削弱 ( P <0. 05)。 结论 BA 通过抑制 NF-κB 活化及 IL-6 的分泌, 改善炎症微环境, 同时抑制 MEK / ERK 和 PI3K 通路, 促进成骨分化。 相关文章 | 多维度评价 Select 79. 褪黑素通过 JAK2 / STAT3 信号通路对糖尿病大鼠肺缺血再灌注损伤的作用机制研究 #br# 屈银辉, 陈聪杰, 王丽娟 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 493-499.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.005 摘要 （230）      PDF （2674KB）（545）    可视化    收藏 目的 探讨褪黑素对糖尿病 (diabetes mellitus, DM) 大鼠肺缺血/ 再灌注 (I / R) 损伤的作用及其潜在分子机制。 方法 将大鼠随机分为对照 + 假手术组 (Control + Sham 组)、 糖尿病 + 假手术组 ( DM + Sham 组)、 对照 + 缺血再灌注组 (Control + IR 组)、 糖尿病 + 缺血再灌注组 (DM + IR 组)、 糖尿病 + 缺血再灌注 + 褪黑素组 (DM + IR + MT 组), 每组 8 只。 检测各组大鼠的肺组织湿重/ 干重 ( W / D) 比值; 苏木精-伊红染色检测各组大鼠肺组织病理学变化; 检测各组大鼠肺组织中氧化应激因子谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX) 活性、 总抗氧化能力 (total antioxidant capacity, T-AOC) 水平、 超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD) 活性和丙二醛 ( malondialdehyde, MDA) 活性; ELISA 实验检测炎症因子 IL-1β、 IL-6 和 TNF-α 的浓度; 蛋白质印迹法检测各组大鼠肺组织中 p-JAK2 和 p-STAT3 蛋白水平。 结果 与 Control + Sham 组比较, Control + IR 组中 W / D 比值升高, 肺泡间隔和间隙水肿, 间质增厚, 肺泡内出血和白细胞浸润, 肺损伤评分较高, GSH-PX、 SOD、 T-AOC 活性降低, MDA 水平升高, 炎症因子 IL- 1β、 IL-6、 TNF-α 水平升高, p-JAK2 和 p-STAT3 蛋白水平升高 ( P< 0. 05)。 DM + Sham 组和 DM + IR 组的上述指标进一步升高, 其中 DM + IR 组的差异性更显著。 与 DM + IR 组比较, DM + IR + ME 组中 W / D 比值显著降低, 肺组织损伤明显减轻, 肺损伤评分降低, GSH-PX、 SOD、 T-AOC 活性显著升高, MDA 水平显著降低, IL-1β、 IL-6、 TNF-α 水平显著降低, p-JAK2 和 p-STAT3 蛋白水平降低 ( P< 0. 05)。 结论 褪黑素通过降低氧化应激和炎症水平从而减轻糖尿病大鼠的肺 I / R 损伤, 其机制可能与 JAK2 / STAT3 信号通路有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 80. LncRNA ZFAS1 靶向 miR-34b-5p 调节弥漫大 B 细胞淋巴瘤细胞的增殖和凋亡 #br# 贾振薇, 贾振珩, 关江峰, 李焱 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 500-505.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.006 摘要 （203）      PDF （3426KB）（181）    可视化    收藏 目的 探究 LncRNA ZFAS1 是否通过调节 miR-34b-5p 促进弥漫大 B 细胞淋巴瘤 ( diffuse large Blymphoma, DLBCL) 细胞增殖并抑制细胞凋亡。 方法 实时荧光定量 PCR ( RT-qPCR) 检测 30 例 DLBCL患者肿瘤组织及 DLBCL 细胞株中 LncRNA ZFAS1 和 miR-34b-5p 转录水平。 将含有敲低 ZFAS1 序列的载体和抑制或过表达 miR-34b-5p 的序列使用 Lipofectamine 2000 试剂转染到 SU-DHL-4 细胞, RT-qPCR 检测敲低和过表达效率, 双荧光素酶报告基因实验分析 ZFAS1 和 miR-34b-5p 的靶向关系。 最后 SU-DHL-4 细胞随机分组为对照组、 sh-ZFAS1 组、 miR-34b-5p inhibitor 组和 shRNA-ZFAS1 + miR-34b-5p inhibitor 组, 克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡; 蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。 结果 在 DLBCL 患者和细胞系中 ZFAS1 的表达量增加, 而 miR-34b-5p 的表达量减少, 同时 ZFAS1 靶向负调节 miR-34b-5p 的表达。 与对照组相比较, sh-ZFAS1 组 miR-34b-5p 的表达量增加, miR-34b-5p inhibitor 组 miR-34b-5p 的表达量减少。 与 miR-34b-5p inhibitor 组相比较, sh-ZFAS1 和 miR-34b-5p inhibitor 共转染组中 miR-34b-5p 的表达量增加。 敲低 ZFAS1 的表达抑制 SU-DHL-4 细胞增殖, 促进细胞凋亡, 并降低线粒体膜电位, 同时升高 Bax /Bcl-2 和 cleaved caspase-3/caspase-3比值。结论  LncRNA ZFAS1 通过下调miR-34b-5p促进SU-DHL-4细胞增殖并抑制细胞凋亡。 相关文章 | 多维度评价 Select 81. LncRNA NEAT1 调控 miR-22-3p 对脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞生物学活性影响 #br# 范晶, 高一曼, 郑圆, 郭丹妮, 胡金龙, 雷小朋 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 506-511.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.007 摘要 （213）      PDF （2108KB）（197）    可视化    收藏 目的 探讨长链非编码 RNA ( long non-coding RNA, LncRNA) 核富集转录本 1 ( nuclear-enriched abundant transcript 1, Neat1) 调控微小 RNA miR-22-3p 对脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 诱导的人牙龈成纤维细胞 (human gingival fibroblasts, HGFs) 生物学活性的影响。 方法 取对数生长期的 HGFs 细胞分为对照组、 LPS 组、 si-NC 组、 si-Neat1 组、 si-Neat1 + inhibitor NC 组、 si-Neat1 + miR-22-3p inhibitor 组。RT-qPCR 检测 Neat1、 miR-22-3p 表达水平; 双荧光素酶验证 Neat1、 miR-22-3p 的靶向关系; 流式细胞仪、CCK-8、 ELISA 法分别检测细胞凋亡、 细胞活力及肿瘤坏死因子-α ( tumor necrosis factor-α, TNF-α)、 白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β) 水平; 蛋白质印迹检测 Caspase-3、 磷酸化核转录因子-κB ( phosphorylated nuclear factor-κB, p-NF-κB) P65 / NF-κB P65 水平。 结果 与对照组比较, LPS 组细胞活力、 miR-22-3p表达显著降低, TNF-α、 IL-1β、 细胞凋亡率、 p-NF-κB P65 / NF-κB P65、 Neat1、 Caspase-3 表达显著增加 (P < 0. 05); 与 LPS 组、 si-NC 组比较, si-Neat1 组细胞活力、 miR-22-3p 表达显著增加, TNF-α、 IL-1β、 细胞凋亡率、 p-NF-κB P65 / NF-κB P65、 Neat1、 Caspase-3 表达显著降低 ( P< 0. 05); 下调 miR-22-3p 表达逆转了沉默 Neat1 对 LPS 诱导 HGFs 生物学活性的影响 (P< 0. 05)。 结论 沉默 Neat1 可以抑制 LPS 诱导 HGFs的细胞凋亡、 炎症反应, 可能与上调 miR-22-3p 表达有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 82. 天麻素通过调控 AMPK / mTOR 通路促进骨关节炎软骨细胞自噬的研究 #br# 张煜, 陈敬有 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 512-518.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.008 摘要 （245）      PDF （2515KB）（264）    可视化    收藏 目的 探讨天麻素 (gastrodin, GSTD) 在骨关节炎中对软骨细胞自噬的影响及其作用机制。 方法 通过 CCK-8 法检测不同浓度 GSTD 对软骨细胞活力的影响。 使用 IL-1β (10 ng / mL) 刺激软骨细胞建立体外骨关节炎细胞损伤模型。 将细胞分为对照组、 IL-1β 组、 IL-1β + GSTD 组。 培养 48 h 之后通过流式细胞术检测细胞凋亡率; 蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白 (LC3 和 P62)、 AMPK 和 mTOR 蛋白的表达; 酶联免疫吸附试验 ( enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 检测细胞培养上清液中 COL2A1、 MMP-13、TNF-α 和 IL-6 的分泌。 使用 AMPK 抑制剂 (化合物 C) 观察 AMPK 通路在软骨细胞自噬过程中所发挥的作用。 结果 GSTD 在 12. 5 ~ 50 μmol / L 范围内增加细胞活力, 选择 25 μmol / L GSTD 预处理细胞进行后续试验。 与对照组比较, IL-1β 刺激细胞促进软骨细胞凋亡 ( P< 0. 05), 抑制自噬 ( P< 0. 05), 增加炎症因子的分泌 (P< 0. 05), 抑制 COL2A1 和增加 MMP13 的表达 ( P< 0. 05)。 与 IL-1β 组比较, GSTD 预处理的细胞自噬能力增强 ( P < 0. 05), 细胞凋亡减少 ( P < 0. 05), 炎症因子和 MMP-13 的分泌减少 ( P < 0. 05), COL2A1 合成增加 (P< 0. 05), 促进 AMPK 磷酸化和抑制 mTOR 的磷酸化。 使用 AMPK 通路抑制剂 (化合物 C) 处理细胞可以逆转 GSTD 对软骨细胞的保护作用, 导致细胞凋亡率下调, 自噬水平下调, 炎症因子和 MMP-13 分泌增加, COL2A1 合成减少 (P< 0. 05)。 结论 GSTD 通过调控 AMPK / mTOR 信号通路促进细胞自噬, 从而抑制软骨细胞的凋亡和炎症反应, 促进胶原合成, 对软骨细胞起保护作用。 相关文章 | 多维度评价 Select 83. KIF20A 基因对肝癌 Huh7 细胞放射敏感性的影响及作用机制的研究 #br# 汪超, 杨健睿, 李治君, 吴林, 张军 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 519-524.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.009 摘要 （335）      PDF （5265KB）（388）    可视化    收藏 目的 探讨驱动蛋白家族 20A (kinesin family 20A, KIF20A) 基因对肝癌 Huh7 细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制。 方法 qPCR 检测不同剂量 (0、 2、 4、 6、 8 Gy) 照射后 Huh7 中 KIF20A mRNA表达量, 通过慢病毒感染构建沉默 KIF20A 的 Huh7 细胞株, RT-qPCR 和蛋白质印迹验证 KIF20A 沉默效果,细胞计数试剂盒 8 (cell counting kit 8, CCK-8) 法、 集落形成实验检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, Transwell 实验、 划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力, 蛋白质印迹检测 PI3K / AKT 信号通路相关蛋白表达。 结果 肝癌 Huh7 细胞中 KIF20A 的 mRNA 表达水平随着 X 射线剂量的增加而逐渐上调 (P< 0. 05)。 感染 KIF20A siRNA 能够显著抑制 Huh7 细胞中 KIF20A mRNA 和蛋白表达 (P< 0. 05)。 随着辐射剂量的增加,细胞存活率逐渐下降 (P< 0. 05), 沉默 KIF20A 的 Huh7 细胞存活率明显降低 (P< 0. 05)。 沉默 KIF20A 的Huh7 细胞集落形成率明显降低 (P< 0. 05), 侵袭和迁移能力明显受到抑制 (P< 0. 05), 凋亡率明显升高(P< 0. 05), 细胞中 PI3K 水平下调 (P< 0. 05), AKT 磷酸化水平减少 (P< 0. 05)。 结论 沉默 KIF20A 能够增强肝癌 Huh7 细胞放射敏感性, 其作用机制可能与 PI3K / AKT 信号通路有关。 相关文章 | 多维度评价 Select 84. 生长因子在结核性胸膜纤维化调控机制的研究进展 #br# 任尚娴, 蒋胜华 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 525-529.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.010 摘要 （265）      PDF （674KB）（304）    可视化    收藏 胸膜纤维化 (pleural fibrosis) 发生在结核性胸膜炎的恢复期, 常呈进行性发展且不可逆转, 最终导致患者出现限制性通气功能障碍, 严重影响生活质量。 因此, 早期评估病情和抑制胸膜纤维化进展将成为未来治疗结核性胸膜炎的一个方向。 虽然关于结核性胸膜纤维化的具体调控机制尚无法阐明, 但相关研究表明在结核性胸膜纤维化的发生及发展过程中有许多重要生长因子参与。 生长因子主要包括转化生长因子 β ( transforming growth factor beta, TGF-β)、 血管内皮生长因子 ( vascular endothelial growth factor, VEGF)、 血小板源性生长因子 ( platelet-derived growth factor, PDGF)、 成纤维细胞生长因子 ( fibroblast growth factor, FGF)、 结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor, CTGF)、 肝细胞生长因子 ( hepatocyte growth factor, HGF) 等, 文章综述了结核性胸膜炎、 结核性胸膜纤维化的研究进展以及 TGF-β、VEGF、 PDGF、 FGF 和 CTGF 5 种生长因子在结核性胸膜纤维化中的表达水平及可能调控机制。 相关文章 | 多维度评价 Select 85. 血管新生过程中的 Rho GTPase #br# 施伟丽, 高海霞, 吴鸿, 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 530-535.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.011 摘要 （157）      PDF （1385KB）（993）    可视化    收藏 缺血性心脑血管疾病是影响我国居民健康的头号杀手, 血管新生参与组织缺血缺氧损伤后的修复过程, 为缺血性心脑血管疾病的治疗提供有效方法。 Rho GTPase 家族在调节内皮细胞骨架形态、 迁移和成管中起着核心作用。 目前已发现 Cdc42、 Rac1 及 RhoA 参与血管新生过程, 其中 Cdc42 诱导内皮细胞丝状伪足的形成并指引内皮细胞迁移方向, 促进受损血管内皮屏障的恢复; Rac1 控制片状伪足的形成; RhoA调节黏着斑形成及内皮细胞迁移过程中前缘和后端基质黏附的动态重塑, 三者协作参与缺血损伤后的血管新生过程。 尽管 Rho GTPase 在血管新生中的作用尚未完全明了, 但它从基础研究到临床应用的前景仍然值得探索, 这对于防治缺血性心脑血管疾病有重要意义。 相关文章 | 多维度评价 Select 86. FK506 结合蛋白样蛋白在疾病中的作用的研究进展 #br# 侯静文, 王晓宇, 詹添, 王爱媛 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 536-539.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.012 摘要 （286）      PDF （817KB）（209）    可视化    收藏 FK506 结合蛋白样蛋白 (FK506-binding protein like, FKBPL) 是亲免素家族的一员, 其功能十分广泛, 可以调控类固醇受体的信号转导, 抑制肿瘤干细胞及肿瘤细胞的生长, 并且能够作为肿瘤预后的生物学标志物。 最新研究发现, 它的 N 端区域存在抗血管生成结构域, 可在体内和体外发挥抗血管生成作用。 此外, FKBPL 还与炎症、 眼部疾病、 心理疾病等诸多问题相关。 文章主要从 FKBPL 的结构和功能出发, 对 FKBPL 的功能研究进展进行综述, 并探讨其在临床应用中的前景。 相关文章 | 多维度评价 Select 87. 表观遗传修饰阅读器 MORC3 的分子结构及其在疾病发生发展中的作用 #br# 傅文轩, 史彦, 医学分子生物学杂志    2023, 20 (6): 540-546.   doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.013 摘要 （186）      PDF （816KB）（559）    可视化    收藏 MORC3 (MORC family CW-type zinc finger 3) 是 MORC 核蛋白超家族中的重要成员, 是一种遗传调节因子, 常与自身免疫性疾病和癌症的发生发展有关。 近年来, 随着分子研究技术的快速发展, 针对MORC3 分子结构的研究也成为了热点。 其中, MORC3 的锌指结构和 ATP 酶结构域备受关注, 其免疫调节作用也已被发现, 且越来越多的研究表明 MORC3 在人体内起着多元且不可替代的作用。 文章主要叙述了MORC3 的分子结构和功能及其调控遗传物质和参与疾病发生发展的作用。 相关文章 | 多维度评价