目的 探讨p53对金属蛋白酶组织抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases 2,TIMP2)的转录调控作用及其对结直肠癌细胞生物学功能的作用。方法 采用p53缺失HCT116细胞转录组数据筛选差异表达基因;选取HCT116与HCT8两类结直肠癌细胞株,在p53敲降及激活条件下利用qRT-PCR与蛋白质印迹测定p53对TIMP2的转录调控效应;结合JASPAR数据库与双荧光素酶报告实验,验证p53直接转录调控TIMP2;利用划痕和Transwell实验检测p53过表达与TIMP2缺失对肿瘤细胞迁移和侵袭的作用;利用TCGA数据库分析结直肠癌(TCGA-COAD)中癌与癌旁组织中TIMP2的表达并进行生存情况分析。结果 RNA-seq分析显示TIMP2为差异表达较显著的基因之一;在HCT116与HCT8细胞中TIMP2 mRNA和蛋白质水平均与p53呈正相关;p53可直接转录激活TIMP2,进而抑制肿瘤的恶性表型。TCGA数据库显示COAD肿瘤中TIMP2低表达,且与结直肠癌患者预后较差相关。结论 TIMP2在结直肠癌细胞中低表达,p53部分通过转录调控TIMP2抑制肿瘤细胞转移,表明TIMP2有望成为未来治疗结直肠癌的潜在靶点之一。

目的 探讨G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)在内毒素诱导肝细胞损伤中的保护作用及其分子机制,并评估其作为性别差异化治疗策略的潜力。方法 采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的AML-12小鼠肝细胞模型模拟脓毒性肝损伤的早期病理过程,设空白对照组、LPS组、LPS+G1(GPER激动剂)组和LPS+G15(GPER拮抗剂)组。通过流式细胞术、蛋白质印迹、RT-qPCR、ELISA、透射电镜等技术检测细胞凋亡率、GPER表达、线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、NLRP3炎症小体活化、炎症因子(白细胞介素1β,IL-1β)、ATP/AMP比值、线粒体膜电位(ΔΨm)及超微结构的变化。结果 与LPS组相比,G1处理可显著降低细胞凋亡率,抑制mtROS和MDA生成,下调NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路活化,提高ATP水平和降低AMP/ATP比值,并改善线粒体膜电位与超微结构;而G15则加重上述损伤。相关性分析显示,GPER表达与细胞凋亡率呈负相关(R²=0.8970),mtROS水平与凋亡率及IL-1β含量均呈正相关。结论 GPER通过抑制mtROS生成,阻断NLRP3炎症体活化及下游炎症反应,改善线粒体能量代谢和结构完整性,从而减轻脓毒症肝细胞损伤,其作用机制为临床性别差异化治疗提供了新靶点与理论依据。

目的 探索刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)在不同糖耐量孕妇胎盘中的表达及在高糖环境下对滋养层细胞增殖、侵袭和成管能力的影响。方法 纳入妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇和非GDM孕妇各20例。应用免疫组织化学和免疫荧光染色检测胎盘组织中ASIP的表达和定位。采用高糖培养的人滋养层细胞系HTR-8/SVneo细胞模型,分别给予重组人ASIP蛋白与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPARγ)的拮抗剂GW9662处理,通过MTT、Transwell及Matrigel实验评估细胞增殖、侵袭与成管能力。采用蛋白质印迹和RT-qPCR分析相关蛋白及mRNA表达。结果 GDM组胎盘重量较非GDM组明显增加(570 g vs 490 g,P=0.019)。RT-qPCR和蛋白质印迹结果表明GDM胎盘中ASIP的mRNA及蛋白表达明显升高,免疫组织化学和免疫荧光染色检测进一步证实在胎盘绒毛滋养层细胞中ASIP蛋白表达明显升高。在高糖环境下,HTR-8/SVneo细胞中ASIP的mRNA及蛋白水平的表达明显增加,重组人ASIP蛋白(50~200 ng/mL)以剂量依赖性的方式促进HTR-8/SVneo细胞增殖,诱导PPARγ、信号转导与转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)和STAT3的磷酸化。ASIP(200 ng/mL)作用HTR-8/SVneo细胞24 h后,细胞的增殖、侵袭和成管能力均显著增强,加入PPARγ拮抗剂GW9662(20 μmol/L)后上述效应可被部分逆转(P_均<0.01)。结论 GDM/高糖环境下胎盘滋养层细胞中ASIP表达升高,ASIP通过PPARγ依赖性机制促进高糖环境下滋养层细胞的过度增殖、侵袭及成管,从而参与GDM病理性胎盘重塑。

目的 探讨血小板活化对内皮细胞凋亡的影响。方法 采集健康人静脉血制备静息血小板悬液和活化血小板悬液,体外培养内皮细胞,建立血小板与内皮细胞共培养模型。采用活细胞成像技术动态观察血小板活化后聚集、粘附、释放过程与内皮细胞凋亡改变过程,同时检测内皮细胞生存活性、线粒体膜电位变化。结果 血小板活化后发生明显的聚集反应。与静息血小板相比,血小板活化后,血小板彼此聚集并向内皮细胞移动、粘附。活细胞成像系统观察到活化血小板可引起内皮细胞核浓染、固缩和边缘化,细胞核体积变小,核碎裂,出现凋亡小体。与静息血小板组比较,活化血小板组内皮细胞生存活性和线粒体膜电位降低。结论 血小板活化可诱导内皮细胞凋亡损伤。

目的 基于宿主-病原体互作视角,探讨月季花的主要活性成分槲皮素抗烟曲霉的多靶点作用机制。方法 利用TCMSP、GeneCards和OMIM数据库筛选月季花活性成分及烟曲霉感染相关宿主靶点;从NCBI和UniProt数据库获取烟曲霉毒力及耐药相关靶点;借助KEGG Orthology系统进行跨物种同源映射,运用Cytoscape 3.10.3构建宿主-病原体通路互作网络(host-pathogen pathway interaction network,HPPIN),通过拓扑分析(度中心性、介数中心性)识别核心靶点。采用AutoDock Vina1.5.7软件对槲皮素与核心靶点进行分子对接,结合能阈值≤-5.0 kcal/mol;选取最优复合物,使用GROMACS 2020.6软件进行100 ns分子动力学模拟(AMBER99SB力场),分析均方根偏差(RMSD)、均方根涨落(RMSF)及氢键数量以评估结合稳定性。最后参照CLSI M38-A3方案,采用微量液基稀释法测定槲皮素对烟曲霉标准株Af293的最低抑菌浓度(MIC);通过N-乙酰半胱氨酸和嘌呤混合物体外表型拯救实验,验证预测的氧化应激与嘌呤代谢干扰两条作用路径,倒置显微镜观察菌丝形态变化。结果 HPPIN识别出12个关键靶点。槲皮素与KRas及SAICAR合成酶的结合能分别为-7.6与-7.8 kcal/mol,复合物稳定(RMSD<0.2 nm)。其对烟曲霉MIC为256 μg/mL,完全抑制菌丝生长。此效应可被N-乙酰半胱氨酸逆转,证实氧化应激机制;与高浓度嘌呤联用导致萌发完全失败,揭示嘌呤代谢紊乱。结论 槲皮素通过“断供”与“下毒”双路径协同抑制烟曲霉。

目的 基于急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)小鼠模型,探索ACS病变过程中具有关键调控功能的分子标志物,并构建ACS病变相关的分子调控网络。方法 本研究构建ACS小鼠动物模型,包括中度(ACS-M)和重度(ACS-S)模型,并全面评估ACS小鼠的造模结果和心脏病理改变。借助转录组测序获得ACS病变所引起的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),包括长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),最后构建差异lncRNA和mRNA的分子调控网络。结果 ACS造模后,HE染色、TTC染色和多普勒超声等实验结果均表明ACS导致了小鼠心脏组织病理学改变和功能障碍;RNA-seq结果揭示了2 557个DEGs在ACS-M和ACS-S中共上调表达,1 930个DEGs共下调表达,包括mRNA和lncRNA。进一步的GO功能富集分析结果揭示这些差异lncRNA调控线粒体功能、脂肪酸代谢、免疫/炎症反应、细胞粘附、凋亡、纤维化等相关靶基因的差异表达。同时鉴定到6种和ACS紧密相关的表达模式。其中lncRNA Dnm3os和Gm13054在ACS中持续高表达,并用RT-qPCR方法验证其高表达特征;其下游靶标与线粒体功能和组织纤维化密切相关。Gm13054同时具有调控Nppa表达的潜在功能。结论 本研究通过ACS样本的RNA-seq鉴定出大量差异表达的mRNA和lncRNA,其潜在功能与ACS密切相关。同时,mRNA-lncRNA共表达网络的构建为ACS的诊治提供了潜在的靶点和临床应用研究基础。

目的 探讨IgA血管炎(IgA vasculitis,IgAV)患儿血清中趋化因子(C-C基元)配体5[chemokine(C-C motif)ligand 5,CCL5]与趋化因子(C-C基元)配体13[chemokine(C-C motif)ligand 13,CCL13]在早期发生肾损伤中的预测价值。方法 选取2023年1月至2025年3月于中国人民解放军联勤保障部队第九四○医院接受治疗的267例IgAV患儿作为研究对象,并根据是否发生肾损伤分为IgA血管炎性肾炎(immunoglobulin A vasculitis with nephritis,IgAVN)组(n=94)与IgAV组(n=173)。收集两组患儿的临床资料。采用酶联免疫吸附试验检测血清中CCL5、CCL13水平,Spearman相关性分析明确IgAVN患儿血清CCL5、CCL13水平的相关性,比较CCL5、CCL13水平与IgAVN临床分型的关系,多因素Logistic回归分析IgAV患儿早期发生肾损伤的危险因素,并基于此构建列线图模型。绘制ROC曲线、校准曲线及决策曲线以评估模型的预测效能。ROC曲线分析血清中CCL5、CCL13水平在评估IgAV患儿早期发生肾损伤的预测价值。结果 与IgAV组相比,IgAVN组年龄、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)均显著升高(P_均＜0.05)。与IgAV组相比,IgAVN组血清CCL5、CCL13水平均显著升高(P_均＜0.05)。Spearman相关性分析显示,IgAVN组患儿血清CCL5、CCL13水平呈显著正相关(r=0.339,P＜0.001)。不同临床分型的IgAVN患儿血清CCL5和CCL13水平存在差异且随病情严重程度增加(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄升高、NLR升高、血清CCL5和CCL13水平升高均为IgAV患儿早期发生肾损伤的独立危险因素。基于Logistic回归分析结果构建的列线图模型预测效能显著,具有较好的临床应用潜力。ROC曲线分析结果显示,血清中CCL5、CCL13水平能够作为诊断IgAV患儿早期发生肾损伤的有效指标。结论 血清CCL5、CCL13水平升高与IgAV患儿早期肾损伤密切相关,联合检测其水平对于评估早期发生肾损伤具有较高价值。

目的 深入探索晚期糖基化终末产物受体抑制剂TTP488降低视网膜炎症的疗效及其作用机制。方法 30只雄性C57BL/6J小鼠随机分入3组(n=10):对照组、1型糖尿病(type I diabetes mellitus,T1DM)模型组和T1DM+TTP488组。建立链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的T1DM小鼠模型。免疫荧光染色测定小鼠视网膜组织中小胶质细胞标记物(Iba1)阳性细胞活化程度;ELISA测定其中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平。体外细胞实验分组为细胞对照组、LPS组、LPS+TTP488组、LPS+shRNA-P65组和LPS+shRNA-NT组。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导建立小鼠视网膜色素上皮原代细胞炎症模型。腺病毒载体介导敲低P65。RT-qPCR法测定细胞内VEGF-D mRNA的表达水平。蛋白质印迹法测定视网膜组织中和体外细胞内磷酸化NF-κB P65(p-P65)/P65和VEGF-D的表达水平。结果 与T1DM模型组比较,T1DM+TTP488组小鼠视网膜组织中Iba1阳性细胞数量、细胞分支数和细胞分支连接点数(每视野个数)均减少(P<0.05);TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(P<0.05);p-P65/P65和VEGF-D相对表达水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+TTP488组和LPS+shRNA-P65组VEGF-D mRNA相对表达水平均降低(P<0.05);p-P65和VEGF-D相对表达水平均下调(P<0.05)。结论 TTP488通过抑制NF-κB的活化下调VEGF-D的表达,可降低糖尿病性视网膜病变小鼠模型中的视网膜炎症和组织结构病变。

目的 探究1β-羟基土木香内酯(1β-hydroxyalantolactone,1β-HA)通过AMPK/SREBP-1c对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝损伤的影响。方法 以高脂饲料喂养SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝炎模型,灌胃给予12.5、25.0、50.0 mg/kg 1β-HA干预4周。检测血清HDL、TG、ALT、AST水平,肝组织病理,α-SMA,MMP-1,TIMP-1,AMPK,SREBP-1c蛋白,IL-6,TNF-α,IL-1β水平和SOD活性、MDA浓度。结果 与模型组比较,1β-HA各剂量组HDL显著升高,TG、AST、ALT显著降低(P<0.05);肝组织脂肪变性、炎性浸润及纤维化程度减轻;α-SMA、TIMP-1、SREBP-1c表达下调,MMP-1、AMPK表达上调(P<0.05);IL-6、TNF-α、IL-1β含量降低;SOD活性升高,MDA浓度降低(P<0.05)。结论 1β-HA可通过激活AMPK、抑制SREBP-1c表达,改善非酒精性脂肪性肝炎肝损伤。

沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)是Sirtuin家族的核心成员,作为一种依赖NAD⁺的Ⅲ型组蛋白去乙酰化酶,在表观遗传调控网络中占据重要地位。SIRT1通过去乙酰化修饰多种组蛋白及非组蛋白底物,广泛调控脂质代谢、氧化应激、炎症反应和细胞凋亡等关键生理过程。目前研究表明,SIRT1的表达失调或功能缺陷与肝脏疾病的发生发展密切相关。文章总结了SIRT1在酒精相关性肝病、代谢功能障碍相关脂肪性肝病、病毒性肝炎、肝纤维化以及肝细胞癌中的作用机制。同时,对SIRT1靶向干预在慢性肝病治疗中的应用进行了简要介绍,以期更深入理解其特异的调控机制,并为开发更精准的治疗策略提供理论依据。

肥胖是当今全球范围内十分突出、危害极大的公共卫生危机,其实质上是能量摄入与消耗长期失衡的结果,与此直接相关的有中枢摄食调控、脂肪组织代谢及全身炎症反应诸种复杂网络。自噬是一种高度保守、功能明确的细胞内降解途径,能清除受损细胞器、蛋白聚集体及脂滴,因而天然参与能量回收及代谢调控。具体而言,在脂肪组织中,自噬在白色脂肪中促进脂肪生成及脂质储存,在棕色/米色脂肪中参与线粒体清除及白化过程,调节产热功能,同时在脂肪组织巨噬细胞中通过降低线粒体活性氧、抑制NLRP3炎症小体活化来弱化促炎反应,从而调控组织炎症。更为重要的是,下丘脑POMC和AgRP神经元中的自噬可直接调控神经肽的加工、分泌,是中枢控制食欲及能量消耗极为重要的分子开关。肥胖相关自噬基因在脂肪生成、产热调控、炎症反应及神经元功能中都具有明确而关键的作用,其失调必然导致脂质堆积、胰岛素抵抗及慢性炎症,形成中枢-外周相互强化的代谢紊乱网络。正因如此,基于自噬调控机制的营养干预、药理激活及miRNA介导的精准干预都显示出改善肥胖及相关代谢紊乱的巨大潜力。因此,系统、严谨地厘清自噬在脂肪组织、中枢神经系统及全身代谢调控中的作用,有利于从分子层面阐明肥胖的机制,从而设计有效的组织特异性干预策略。

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是肿瘤免疫微环境的重要组成部分,与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。受肿瘤微环境的影响,TAMs功能具有高度可塑性,在肿瘤免疫中发挥复杂且多样的调节作用。文章对巨噬细胞铁代谢以及其在肿瘤免疫中的作用进行综述,深入了解靶向巨噬细胞治疗的前景和具体调控机制。

整合素是一类异二聚体跨膜受体,通过与肿瘤微环境相互作用并调节Wnt/β-连环蛋白、FAK和MAPK等信号通路,在介导肿瘤生长、侵袭和耐药性方面发挥关键作用。许多研究表明,在头颈部鳞癌中,部分整合素的表达水平与疾病的恶性进展和预后密切相关。文章就关键整合素在头颈部鳞癌恶性进展及耐药中的作用及其在肿瘤微环境中介导肿瘤细胞与免疫细胞和基质细胞的多维度通讯做一综述。

自噬在宫颈癌发展中具有双重调控作用。研究表明,Wnt/β-catenin信号通路与细胞自噬之间存在相互抑制关系:活跃的Wnt通路通过下调Beclin 1、抑制GSK-3β等方式抑制自噬;而自噬也可降解Dvl蛋白以限制Wnt通路过度激活。宫颈细胞中,该通路可通过多种途径被异常激活:如E6蛋白上调下游靶基因cyclin D1、E7蛋白解除PP2A抑制,非编码RNA circRNF121重新激活Wnt信号及非编码RNA NEAT1增加核内β-catenin的积累,进而调控宫颈细胞自噬,促进肿瘤进展。靶向该通路关键环节可为宫颈癌治疗提供新策略,未来对Wnt通路对自噬的双向调控机制的深入探索,将进一步推动精准治疗的发展。

多发性骨髓瘤作为恶性血液病之一,自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation,ASCT)是标准治疗方案,但部分患者预后不佳。对此,双次ASCT通过短期内两次移植可实现更深层次的缓解。研究显示,与单次ASCT相比,双次ASCT在延长无进展生存期和总体生存期方面具有一定优势,尤其在高危患者如del(17p)和IGH重排者中表现更佳。

衰老是机体生理功能随时间渐进性衰退的复杂生物学过程,伴随着一系列跨周期、多层级、复杂动态的细胞和分子网络变化。脂质作为细胞膜结构、能量储存和信号传导的核心分子,在维持细胞功能和稳态中发挥着重要作用,脂质代谢失衡可能是衰老及多种人类重大疾病的重要驱动因素。近年来,随着脂质组学技术的发展,通过对多种模式动物以及人类衰老过程中的脂质组动态进行分析,逐步揭示了脂质组在衰老中呈现的共性变化规律与组织特异性重塑模式。文章结合近期基于小鼠与人类衰老研究的重要脂质组学成果,对相关进展进行简要评述,并对该领域当前面临的挑战与未来发展方向进行展望。

脂肪组织作为机体的关键能量储存与内分泌器官,其衰老过程深刻影响着全身代谢稳态与多器官功能。综述系统阐述了脂肪组织衰老的核心特征,包括宏观分布改变、细胞外基质纤维化、细胞组成与功能障碍(涵盖脂肪细胞、祖细胞、免疫细胞及衰老细胞),以及内分泌谱系失调。衰老导致白色脂肪组织发生异位堆积、棕色脂肪组织产热功能减退,并伴随脂联素水平下降、促炎因子分泌增加,这些因素共同驱动慢性低度炎症与胰岛素抵抗。这些改变进一步加剧心血管疾病、代谢功能障碍相关脂肪肝病及肿瘤等年龄相关疾病的发生与发展。目前,针对脂肪组织衰老的干预策略主要包括热量限制、二甲双胍及PPARγ激动剂等,但其临床应用仍面临挑战。未来研究需深入解析脂肪衰老的时空特异性机制,并开发更具靶向性的治疗手段。

目的 探讨“数智+小组学习”模式在分子生物学教学中的应用效果,以应对传统教学在个性化支持、高阶能力培养等方面的挑战。方法 选取750名五年制本科生,分为实验组(采用数智+小组学习)和对照组(采用传统讲授式),通过混合研究方法进行评估。结果 实验组在形成性考核(92.6±6.2 vs 85.4±8.7)和终结性考核(85.5±8.2 vs 80.3±9.1)中成绩均显著优于对照组(P<0.01),且在知识整合、案例分析及学习兴趣等方面表现更佳。结论 该模式或可在一定程度上有效弥补传统教学不足,提升学生综合能力,为医学教育改革提供了实践参考。

目的 以知识图谱构建方式梳理展示人工智能(artificial intelligence,AI)在医学教育中的现状、发展趋势和主题演变过程,为医学教育应用人工智能方向研究提供参考。方法 检索并阅读2010~2024年Web of Science核心文献524篇,分别应用VOSviewer软件、Citespace软件和R语言bibliometrix包分析AI在医学教育领域高影响力作者及研究团队、目前聚焦内容和研究内容的演变过程。结果 AI驱动医学教育发展自2018年呈现出明显增长态势;该领域已形成一些稳定的核心研究团队,各团队内部合作强度较大,但各大型团队间合作较为疏松;梅奥诊所是当前该领域全球发文量最多的研究机构,发文量较多的机构间合作较为紧密;中国在相关主题的发文量目前位居世界第二;此外,关键词聚类和研究主题演变历程分析结果显示,近2年医学教育的AI应用研究热点主要集中在大语言模型、机器学习和虚拟手术等方面。结论 AI在医学教育领域的应用正经历从辅助工具向智能赋能体系的转型,AI有望推动医学教育向智能化、精准化和个性化方向发展。