目的 初步探讨 Fam172a 基因敲除加重脂毒性肝细胞损伤的作用机制。 方法 利用 Fam172a 基因敲除 (Fam172a - / - ) 小鼠, 检测肝功能、 肝组织脂质堆积和炎症细胞因子水平。 利用 Fam172a 基因敲减的 HepG2 细胞系, 检测细胞内脂质堆积和炎症细胞因子水平。 蛋白质印迹检测蛋白质水平。 结果 与对照组相比, Fam172a - / - 小鼠血浆 ALT 和 AST 水平明显升高; 肝脏结构损伤、 脂质堆积和炎症加重; pERK / ERK 相对表达水平显著上调。 Fam172a 基因敲减后, HepG2 细胞内甘油三酯含量和炎症细胞因子水平增加,且 pERK / ERK 相对表达水平也显著升高。 然而, 应用 ERK 抑制剂后可明显减轻 Fam172a 基因敲减造成的脂毒性肝细胞损伤。 结论 Fam172a 基因敲除可通过活化 ERK 加重肝细胞脂毒性。

目的 探讨叉头盒 O4 ( forkhead box O4, FOXO4) 对脂多糖 ( lipopolysaccharide, LPS) 诱导的心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响, 并初步探讨潜在的分子机制。 方法 将 LPS 处理的 H9C2 细胞分别用 FOXO4 重组慢病毒载体 ( LPS + Lv-FOXO4)、 对照载体 ( LPS + Lv-NC 组) 和/ 或 nigericin ( LPS + LvFOXO4 + N 组) 处理 FOXO4。 实时定量聚合酶链式反应 ( RT-qPCR) 检测 FOXO4 mRNA 表达。 酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中 TNF-α 和 IL-1β 的水平。 流式细胞术检测细胞凋亡。 蛋白质印迹分析 FOXO4 和NF-κB / NLRP3 通路相关蛋白表达。 结果 LPS 处理能够抑制心肌细胞中 FOXO4 的表达 ( P < 0. 05), 而FOXO4 过表达能够降低 LPS 处理的心肌细胞中 TNF-α 和 IL-1β 水平, 抑制心肌细胞凋亡, 降低促凋亡蛋白Bax 表达并增加抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达 ( P< 0. 05)。 此外, FOXO4 过表达能够通过抑制 P65、 IκBα 磷酸化和 P65 核移位来抑制 NF-κB 信号通路活化 ( P< 0. 05)。 FOXO4 过表达可通过抑制 NLRP3、 ASC、 cleaved caspase-1 和 N-GSDMD 蛋白表达来抑制 NLRP3 炎症小体活化和细胞焦亡 (P< 0. 05), 而 NLRP3 炎症小体激活剂尼日利亚菌素能够逆转 FOXO4 过表达对 LPS 诱导心肌细胞损伤的保护作用 (P< 0. 05)。 结论 FOXO4过表达可保护心肌细胞免受 LPS 刺激引起的炎症和凋亡, 这可能是通过抑制 NF-κB / NLRP3 炎症小体信号通路介导的细胞焦亡来实现。

目的 探讨紫檀芪对人舌鳞癌 CAL-27 细胞生物学行为的影响。 方法 将 CAL-27 细胞分为对照组和实验组, 实验组用紫檀芪 10、 20、 40 μmol / L 进行处理。 CCK-8 法、 克隆形成实验和 EdU 检测不同浓度紫檀芪对 CAL-27 细胞增殖的影响; 流式细胞术检测 CAL-27 细胞凋亡情况; 划痕实验和穿孔实验实验观察 CAL-27 细胞的迁移和侵袭能力; 蛋白质印迹检测 CAL-27 细胞内上皮间质转化 ( epithelial-mesenchymal transition, EMT) 相关蛋白的表达。 异种移植瘤验证紫檀芪对体内肿瘤的作用。 结果 与对照组比较, 紫檀芪 20 和 40 μmol / L 处理 24 h 后 CAL-27 细胞增殖、 迁移和侵袭能力减弱, 细胞凋亡率增加, 细胞内 Bax、E-cadherin 和 Claudin1 蛋白表达量增加, Bcl-2、 N-cadherin、 波形蛋白和 Snail 蛋白的表达量减少 ( P < 0. 05)。 紫檀芪 30 mg / kg 治疗后裸鼠体内移植肿瘤重量和体积明显减小, Ki67 和波形蛋白阳性细胞数明显减少, TUNEL 阳性细胞数明显增加 ( P< 0. 05)。 结论 紫檀芪能抑制 CAL-27 细胞增殖、 迁移、 侵袭和EMT, 同时诱导其凋亡。

目的 探讨丹参酮Ⅱ -A (tanshinoneⅡ -A, TSⅡ -A) 对骨关节炎 (osteoarthritis, OA) 软骨退变大鼠中调节性 T 细胞 (regulatory T, Treg) / 辅助性 T 细胞 17 (Th17) 的影响, 以及其对 Toll 样受体 4 ( Tolllike receptor 4, TLR4) 信号的调控。 方法 以关节腔注射木瓜蛋白酶构建大鼠 OA 模型。 造模成功后, 分为 TSⅡ -A 低剂量组 ( TSⅡ -A-L)、 TSⅡ -A 高剂量组 ( TSⅡ -A-H)、 阳性对照药物硫酸氨基葡萄糖 ( glucosamine sulfate, DGS) 组进行药物干预; 酶联免疫吸附试验检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α ( tumor necrosis factor-α, TNF-α) 和白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6) 水平; 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记试剂盒 (TUNEL) 检测大鼠软骨组织中的细胞凋亡; 流式细胞仪检测脾组织中 Treg、 Th17 的比重, 实时荧光定量聚合酶链式反应 (qRT-PCR) 检测大鼠膝关节软骨组织中 TLR4、 髓样分化因子 88 ( myeloid differentiation factor 88, MyD88)、 以及核转录因子 (nuclear factor κB, NF-κB)、 蛋白聚糖 ( aggrecan)和Ⅱ 型胶原 ( Collagen Ⅱ )、 叉状头/ 翅膀状螺旋转录因子 3 ( forkhead / winged helix transcription factor 3, Foxp3)、 IL-17、 B 淋巴细胞瘤-2 ( B cell lymphoma-2, Bcl-2) 和 Bcl-2 相关 X 蛋白 ( Bcl2-associated X protein, Bax) 的 mRNA 的表达; 蛋白质印迹法检测软骨组织中 TLR4、 MyD88、 p-NF-κB、 Bcl-2 和 Bax 的表达。 结果 与 Sham 组相比, 其余各组大鼠脾组织中 Treg 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 aggrecan 和 CollagenⅡ 以及 Foxp3、 Bcl-2 的表达明显下降, 血清中 TNF-α 和 IL-6 的含量、 软骨组织中的细胞凋亡率、 脾组织中 Th17 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 IL-17、 TLR4、 MyD88、 p-NF-κB 和 Bax 的表达明显升高; 与 OA组相比, TSⅡ -A-L 组、 TSⅡ -A-H 组、 DGS 组大鼠脾组织中 Treg 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 aggrecan和 CollagenⅡ 以及 Foxp3、 Bcl-2 的表达明显升高, 血清中 TNF-α 和 IL-6 的含量、 软骨组织中的细胞凋亡率、脾组织中 Th17 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 IL-17、 TLR4、 MyD88、 p-NF-κB 和 Bax 的表达明显下降;与 TSⅡ -A-L 组相比, TSⅡ -A-H 组大鼠脾组织中 Treg 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 aggrecan 和 CollagenⅡ以及 Foxp3、 Bcl-2 的表达明显升高, 血清中 TNF-α 和 IL-6 的含量、 软骨组织中的细胞凋亡率、 脾组织中Th17 细胞的比重、 膝关节软骨组织中 IL-17、 TLR4、 MyD88、 p-NF-κB 和 Bax 的表达明显下降, 差异均具有统计学意义 (P均< 0. 05), TSⅡ -A-H 组与 DGS 组间各指标的差异不具有统计意义 ( P> 0. 05)。 结论 丹参酮Ⅱ -A (TSⅡ -A) 能明显抑制 OA 大鼠关节软骨组织中 TLR4、 MyD88、 p-NF-κB 的表达, 降低软骨组织中的细胞凋亡率, 这可能与改善 Treg / Th17 免疫失衡有关。

目的 探讨虫草素 ( cordycepin, COR) 在脑缺血再灌注 ( cerebral ischemia reperfusion, CI / R)大鼠脑组织损伤中的保护作用及机制。 方法60 只 Wistar 大鼠分为健康对照组、 模型组、 模型加药组。 跳台试验和 Y 迷宫实验检测大鼠学习和记忆力; HE 染色法检测脑组织病理变化; 干湿重法计算脑含水率和脑指数; TUNEL 法观测脑组织细胞凋亡情况; ELISA 测定大鼠血清中超氧化物歧化酶 ( superoxide dismutase。 SOD)、 丙二醛 (malonic dialdehyde, MDA)、 乳酸脱氢酶 ( lactate dehydrogenase, LDH) 的含量;蛋白质印迹检测 Bax / Bcl-2、 cleaved cas9 / cas9、 cleaved cas3 / cas3、 Nrf2、 HO-1 和 NQO1 蛋白表达水平。 结果 与模型组比较, COR 能剂量依赖地改善大脑组织损伤, 抑制氧化应激, 促进 Nrf2 / HO-1 / NQO1 通路激活。 结论 虫草素能够改善脑组织损伤, 其作用机制与上调 Nrf2 通路有关。

目的 探究 M2 型巨噬细胞来源的外泌体对人多发性骨髓瘤细胞转移的影响及机制。 方法 在体外将 THP-1 细胞诱导分化成 M0 型和 M2 型巨噬细胞, 实时荧光定量聚合酶反应 ( RT-qPCR) 检测诱导后M2 型巨噬细胞标志物血红蛋白清道夫受体 ( CD163)、 白细胞介素-10 ( IL-10)、 精氨酸酶-1 ( Arg-1)、 转化生长因子-β1 (TGF-β1) 的表达水平, 分离 M2 型巨噬细胞来源的外泌体; 将 RPMI-8226 细胞分为对照组、 M0-Exos 组、 M2-Exos 组, Transwell 小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目, 蛋白质印迹检测细胞中 N-钙黏蛋白 (N-cadherin)、 波形蛋白 ( Vimentin)、 E-钙黏附蛋白 ( E-cadherin) 及转录因子 Snail 的表达水平, 并检测肝细胞生长因子 ( HGF) / c-Met 相关蛋白的表达水平; 接着将 RPMI-8226 细胞分为对照组、M2-Exos 组、 SU11274 组、 SU11274 + M2-Exos 组, Transwell 小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目, 蛋白质印迹检测细胞中 N-cadherin、 Vimentin、 E-cadherin 及 Snail 表达水平。 结果 与 M0 型巨噬细胞比较, M2 型巨噬细胞中 CD163、 IL-10、 Arg-1、 TGF-β1 的 mRNA 表达水平均显著上调 (P< 0. 05); 从 M2 型巨噬细胞中分离的颗粒物中有 CD9、 CD63、 TSG101、 ALIX 蛋白表达, 由此判定该颗粒物为外泌体。 与对照组比较, M2-Exos 组细胞迁移与侵袭数目均显著增加 ( P < 0. 05), N-cadherin、 Vimentin、 Snail 蛋白表达显著增加(P< 0. 05), E-cadherin 蛋白表达显著减少 (P< 0. 05), HGF 蛋白表达及 p-c-Met / c-Met 比值也显著增加 (P< 0. 05)。 与 M2-Exos 组比较, SU11274 + M2-Exos 组细胞迁移与侵袭数目显著减少 ( P< 0. 05), N-cadherin、Vimentin、 Snail 蛋白表达显著减少 (P< 0. 05), 且 E-cadherin 蛋白表达显著增加 (P< 0. 05)。 结论 M2型巨噬细胞来源的外泌体能够促进人多发性骨髓瘤细胞迁移、 侵袭及 EMT, 加剧肿瘤细胞转移, 该作用与调控 HGF / c-Met 通路有关。

目的 探究在胃癌细胞中上调细胞命运决定子 Numb 对胃癌细胞化疗敏感性的影响及其作用机制。 方法 通过脂质体转染技术将 pcDNA3. 1 空质粒、 pcDNA3. 1-Numb 质粒分别转染至胃癌细胞系 BGC- 823 中, 实时荧光定量 PCR (qRT-PCR) 和蛋白质印迹检测转染后细胞中 Numb 表达变化, 采用不同浓度的多柔比星 (doxorubicin, ADM) 处理转染后的 BGC-823 细胞, MTT 法检测细胞增殖抑制率。 将 BGC-823 细胞分为对照组、 NC 组、 Numb 组、 Numb + 铁死亡抑制剂 Ferrostatin-1 (Fer-1) 组, MTT 法检测各组细胞增殖抑制率, DCFH-DA 荧光探针法检测各组细胞活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 水平, 试剂盒检测各组细胞谷胱甘肽 (glutathione, GSH)、 丙二醛 ( malondialdehyde, MDA) 含量及超氧化物歧化酶 ( superoxide dismutase, SOD) 活力, 铁离子检测试剂盒测定各组细胞内铁离子浓度, RT-qPCR 和蛋白质印迹法检测各组细胞中铁死亡相关途径因子 P53、 谷胱甘肽过氧化物酶 4 (glutathione peroxidase 4, GPX4) 和溶质载体家族 7 成员 11 ( solute carrier family 7 member 11, SLC7A11) 表达水平。 结果 与对照组、 NC 组比较, Numb 组细胞中 Numb mRNA 和蛋白相对表达量均显著上调 (P< 0. 05), 在不同浓度 ADM 处理下的细胞增殖抑制率显著升高 (P< 0. 05)。 使用 Fer-1 干预并进行分组处理后, 与对照组、 NC 组比较, Numb 组细胞增殖抑制率显著升高 (P< 0. 05), 细胞中 ROS 水平、 MDA 含量显著增加 ( P< 0. 05), GSH 含量显著减少(P< 0. 05), SOD 活性显著降低 (P< 0. 05), Fe2 + 浓度显著升高 (P< 0. 05), P53 mRNA 和蛋白相对表达量显著上调 (P< 0. 05), GPX4、 SLC7A11 的 mRNA 和蛋白相对表达量显著下调 ( P< 0. 05); 与 Numb 组比较, Numb + Fer-1 组 BGC-823 细胞增殖抑制率显著降低 ( P< 0. 05), 细胞中 ROS 水平和 MDA 含量显著减少 (P< 0. 05), GSH 含量显著增加、 SOD 活性显著升高 ( P< 0. 05), 同时细胞内 Fe2 + 浓度显著降低 ( P< 0. 05), P53 mRNA 和蛋白相对表达量显著下调 (P< 0. 05), 而 GPX4、 SLC7A11 的 mRNA 和蛋白相对表达量显著上调 (P< 0. 05)。 结论 上调 Numb 能够提高胃癌细胞对 ADM 的化疗敏感性, 该机制可能与其调控P53 / SLC7A11 / GPX4 通路诱导铁死亡的作用有关。

目的 探讨微小 RNA-146a-5p (miR-146a-5p) 与微小 RNA-21 (miR-21) 交互作用对原发性肾病综合征 (primary nephrotic syndrome, NS) 发病风险及病情程度的关系。 方法 选取 2021 年 8 月至 2023 年8 月 NS 患者 103 例作为研究组, 另选取同期体检的健康志愿者 103 名作为对照组。 比较研究组与对照组、研究组不同病理类型 [微小病变型 ( minimal change disease, MCD)、 膜性肾病 ( membranous nephropathy, MN)、 局灶-节段性肾小球硬化症 (focal segmental glomerulosclerosis, FSGS)]、 研究组不同肾脏损伤程度患者的血清 miR-146a-5p、 miR-21 相对表达量, 分析 miR-146a-5p、 miR-21 对 NS 的诊断价值及交互影响, 进一步分析 miR-146a-5p、 miR-21 与病情程度的相关性。 结果 研究组血清 miR-146a-5p 相对表达量低于对照组, miR-21 相对表达量高于对照组 (P< 0. 05); 研究组不同病理类型患者血清 miR-146a-5p、 miR-21 相对表达量比较, 差异有统计学意义 ( P< 0. 05); 研究组不同肾脏损伤程度患者血清 miR-146a-5p、 miR-21 相对表达量比较, 差异有统计学意义 (P< 0. 05); miR-146a-5p、 miR-21 联合诊断 NS 的 AUC 为 0. 923 (95 % CI: 0. 877 ~ 0. 955), 敏感度为 78. 64 % , 特异度为 90. 29 % , 明显优于 miR-146a-5p、 miR-21 单独诊断;以最佳截断值将 miR-146a-5p、 miR-21 分为高表达与低表达, miR-146a-5p 低表达与 miR-21 高表达在 NS 发病风险呈正向交互作用, 为次相乘模型; miR-146a-5p 与 NS 病理类型、 肾脏损伤程度呈负相关 ( r = - 0. 613、 - 0. 657, P < 0. 05), miR-21 与 NS 病理类型、 肾脏损伤程度呈正相关 ( r = 0. 664、 0. 702, P < 0. 05)。 结论 NS 患者血清中 miR-146a-5p、 miR-21 异常表达, 且与患者病理类型、 肾脏损伤程度有关; 此外, miR-146a-5p、 miR-21 在 NS 发病风险中具有正向交互作用, 同时暴露可增加 NS 发病风险。

目的 探索 miR-660-5p 调控 P53 对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响。 方法 首先将肾小球系膜细胞 SV40-MES-13 细胞分为 2 组: 对照组和高糖组, 用于分析高糖对 SV40-MES-13 细胞活性及 miR- 660-5p / P53 表达的影响。 然后将高糖处理过后的 SV40-MES-13 细胞分为 4 组: miR NC 组、 miR-660-5p mimic 组、 si NC 组与 si P53 组。 实时荧光定量 PCR 实验检测 SV40-MES-13 细胞中 miR-660-5p 和 P53 的表达水平; 噻唑蓝试剂法 (MTT) 分析 SV40-MES-13 细胞的生长能力; 原位末端标记法 ( TUNEL) 以及流式细胞术分析 SV40-MES-13 细胞的凋亡率; Targetscan 检索以及荧光素酶报告基因实验分析 SV40-MES-13 细胞中 miR-660-5p 与 P53 的靶向作用关系; 蛋白质印迹分析 P53 蛋白的表达。 结果 与对照组比较, 高糖处理后导致 SV40-MES-13 细胞增殖活性降低, 凋亡率增加, miR-660-5p 表达降低而 P53 表达增加。 与 miR-660- 5p NC 组比较, miR-660-5p mimic 处理后的 SV40-MES-13 细胞增殖活性增加, 凋亡率降低。 与 si NC 组比较, si P53 处理后的 SV40-MES-13 细胞增殖活性增加, 凋亡率降低。 miR-660-5p 与 P53 存在结合域, 且能抑制 P53 表达。 结论 高糖处理肾小球系膜细胞后, miR-660-5p 表达水平降低, P53 表达水平增加, 上调肾小球系膜细胞的 miR-660-5p 的表达后, 高糖处理后的肾小球系膜细胞增殖活性增加, 凋亡率下降, 并且miR-660-5p 的这一作用与抑制 P53 的表达相关。

目的 探究 miR-499a-3p 在心力衰竭 (heart failure, HF) 患者血浆中的表达水平及其分子机制。方法 收集 HF 患者和健康对照组的血浆, RT-qPCR 检测其 miR-499a-3p 水平; 人心肌细胞系转染 miR- 499a-3p 模拟物, CCK-8 检测细胞存活能力, 流式细胞术和 TUNEL 检测细胞凋亡水平, 蛋白质印迹检测细胞凋亡通路相关蛋白的表达水平; 建立心衰细胞模型, 转染 miR-499a-3p 抑制物, CCK-8 和流式细胞术检测细胞的存活能力和凋亡水平; 双荧光素酶报告基因系统分析 miR-499a-3p 与 GAB1 的关系; RT-qPCR、 蛋白质印迹探究 miR-499a-3p 对 GAB1 表达的影响; 在人心肌细胞中转染 miR-499a-3p 模拟物的同时转染GAB1 质粒, 检测心肌细胞功能变化。 结果 与对照组血浆中的 miR-499a-3p 的表达相比, HF 患者的表达显著升高 (t = 77. 47, P< 0. 01); miR-499a-3p 模拟物显著降低心肌细胞的存活率, 增加凋亡细胞的比例和TUNEL 阳性细胞比例 (P< 0. 05); 且转染 miR-499a-3p 模拟物后, 凋亡抑制蛋白 Bcl-2 表达降低, 而凋亡促进蛋白 Caspase-3 和 Bax 表达上调; 进一步研究发现, miR-499a-3p 在心衰细胞中显著高表达, 而抑制 miR- 499a-3p 表达后, 心衰细胞的存活率显著升高, 凋亡比例显著降低 (P< 0. 05); 双荧光素酶报告基因系统结合 RT-qPCR 及蛋白质印迹结果表明, miR-499a-3p 可结合到 GAB1 的 3′-UTR, 在 mRNA 和蛋白水平靶向抑制 GAB1 的表达; miR-499a-3p 模拟物对心肌细胞存活和凋亡的影响可以被 GAB1 过表达所逆转。 结论 HF患者中 miR-499a-3p 表达升高, miR-499a-3p 可通过抑制 GAB1 的表达, 影响心肌细胞存活和凋亡, 参与 HF的发生进展。

目的 探讨基因间长链非编码 RNA ( long intergenic non-coding RNA, lincRNA) -p21 过表达的间充质干细胞 (mesenchymal stem cells, MSCs) 对小鼠急性肺损伤 (acute lung injury, ALI) 的修复作用。 方法 将 70 只雄性 C57BL / 6 小鼠随机分为 7 组, 每组 10 只, 分别为假手术组、 ALI 组、 MSC + ALI 组、 p21- MSC + ALI 组、 空载体-MSC + ALI 组、 p21 + ALI 组、 空载体 + ALI 组。 实时荧光定量 PCR ( qRT-PCR) 法检测各组肺组织中 lincRNA-p21 的表达。 ELISA 法检测肺泡灌洗液中 TNF-α、 IL-1β、 IL-8、 IL-6、 IL-10、 IL-13、 IL-1Ra、 caspase3 的表达。 检测动脉血氧分压 ( PaO2 )、 肺系数 ( lung index, LI)、 肺通透指数 ( lungpermeability index, LPI)、 氧合指数 (oxygenation index, OI) 的影响。 蛋白质印迹法检测肺组织中 Bcl-2、 Bax、caspase3、 cleaved-caspase3 的表达。 结果 与假手术组比较, ALI 组 lincRNA-p21、 IL-10、 IL-13、 IL-1Ra、 Bcl-2、PaO2及 OI 的水平都下调, LI、 LPI、 TNF-α、 IL-1β、 IL-8、 IL-6、 Bax、 caspase3、 cleaved-caspase3 的水平都上调,凋亡细胞比例增加 (P均 <0. 05)。 与 ALI 组比较, MSC + ALI 组 IL-10、 IL-13、 IL-1Ra、 Bcl-2、 PaO2及 OI 的水平都上调, LI、 TNF-α、 IL-1β、 IL-8、 IL-6、 Bax、 caspase3、 cleaved-caspase3 的水平都下调, 凋亡细胞比例减少(P均 <0. 05), 而 lincRNA-p21 的表达和 LI 的水平变化不明显 (P >0. 05)。 与空载体-MSC + ALI 组比较, p21-MSC+ ALI 组中 lincRNA-p21、 IL-10、 IL-13、 IL-1Ra、 Bcl-2、 PaO2及 OI 的水平都上调, LI、 LPI、 TNF-α、 IL-1β、 IL-8、 IL-6、 Bax、 caspase3、 cleaved-caspase3 的水平都下调, 凋亡细胞比例减少 (P均 < 0. 05)。 与空载体 + ALI 组比较, p21 + ALI 组中 lincRNA-p21、 IL-10、 IL-13、 IL-1Ra、 Bcl-2、 PaO2及 OI 的水平都上调 (P均 < 0. 05), LI、 LPI、TNF-α、 IL-1β、 IL-8、 IL-6、 Bax、 caspase3、 cleaved-caspase3 的水平都下调, 凋亡细胞比例减少 (P均 < 0. 05)。 结论 过表达 lincRNA-p21 的 MSCs 对 ALI 小鼠的炎症损伤和肺部细胞凋亡具有抑制作用。

目的 探讨炎症微环境作用下 P38 丝裂原活化蛋白激酶 ( mitogen-activated protein kinase, MAPK) 对牙周膜干细胞 ( periodontal ligament stem cell, PDLSC) 成骨分化和 Wnt / Ca2 + 信号通路的影响。方法 将 人 PDLSC 分 为 对 照 组、 TNF-α 组、 TNF-α + SB203580 组 ( 20 μmol / L SB20358 )、 TNF-α +SB203580 + XAV939 组 (20 μmol / L SB20358 + 10 μmol / L XAV939), 除对照组外其余各组细胞给予 10 ng /mL TNF-α 模拟炎症微环境。 茜素红染色检测成骨分化能力, 比较各组细胞碱性磷酸酶 ( alkaline phosphatase, ALP) 活性, RT-qPCR 检测成骨关键基因 Runt 相关转录因子 2 ( Runx2)、 骨钙蛋白 ( osteocalcin, OCN)、 Osterix (OSX) 蛋白、 骨桥蛋白 (osteopontin, OPN) mRNA 水平, 蛋白质印迹检测 P38 MAPK、 β-catenin、 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ (CaMKⅡ )、 Nemo 样激酶 (Nemo-like kinase, NLK) 蛋白质表达。 结果 TNF-α 组细胞的染色强度明显减弱且钙化结节的数量明显减少, TNF-α + SB203580 组的染色强度、 钙化结节数量较 TNF-α 组得到明显改善, TNF-α + SB203580 + XAV939 组细胞的染色强度、 钙化结节数量与 TNF-α+ SB203580 组差别不明显。 与对照组比较, TNF-α 组 ALP 活性和 Runx2、 OCN、 OSX、 OPN mRNA 水平降低 (P< 0. 05), P38 MAPK 蛋白质表达 ( P < 0. 05 ), β-catenin、 CaMK Ⅱ 、 NLK 蛋白质表达降低 ( P <0. 05)。 与 TNF-α 组比较, TNF-α + SB203580 组 ALP 活性和 Runx2、 OCN、 OSX、 OPN mRNA 水平升高 ( P< 0. 05), P38 MAPK 蛋白表达质降低 ( P< 0. 05), β-catenin、 CaMKⅡ 、 NLK 蛋白质表达升高 ( P< 0. 05)。与 TNF-α + SB203580 组, TNF-α + SB203580 + XAV939 组 β-catenin 蛋白质表达降低 ( P< 0. 05), 但 ALP 活性、 Runx2、 OCN、 OSX、 OPN mRNA 水平和 P38 MAPK、 CaMKⅡ 、 NLK 蛋白质表达比较无统计差异 ( P>0. 05)。 结论 炎症微环境下条件下 P38 MAPK 抑制剂可提高 PDLSC 成骨分化能力, 可能与激活 Wnt / Ca2+信号通路有关。

目的 探究长链非编码 RNA 牛磺酸上调基因 1 ( long non-coding RNA taurine-upregulated gene 1,lnc TUG1) 对膀胱癌细胞转移活性的影响以及相关机制。 方法 收集保定市第二医院治疗的膀胱尿路上皮癌患者的组织样本, 通过实时荧光定量 PCR 检测 lnc TUG1 和 P38 丝裂原活化蛋白激酶 (P38 mitogen-activated protein kinases, P38 MAPK) 的表达水平。 将人膀胱癌细胞系 5637 细胞分为 3 组: si NC 组、 si TUG1 和si P38 组。 将 si NC、 si TUG1 和 si P38 质粒转染至对应的实验组, 并通过细胞集落形成实验、 Transwell 实验、 流式细胞术和蛋白质印迹实验检测细胞的生长能力、 侵袭能力、 凋亡率以及 P38 MAPK 的表达水平。结果 与癌旁组织比较, 癌组织 lnc TUG1 表达水平增加, 而 P38 MAPK 的表达水平降低。 与 si NC 组比较, si TUG1 组膀胱癌细胞的集落形成数量、 侵袭数量显著降低、 凋亡率显著升高; 而 si P38 组膀胱癌细胞的集落形成数量、 侵袭显著增加、 凋亡率显著降低。 与 si NC 组比较, si TUG1 组膀胱癌细胞的 P38 MAPK 蛋白表达明显上调。 结论 抑制非编码 RNA TUG1 表达能够抑制膀胱癌细胞的集落形成能力和侵袭能力, 并能促进膀胱癌细胞凋亡。 此外, 非编码 RNA TUG1 对膀胱癌细胞的这一作用与抑制 P38 MAPK 有关。

目的 分析缺血后处理 (ischemic postconditioning, IP) 对心肌缺血再灌注 ( ischemia-reperfusion, IR) 大鼠心功能、 心肌细胞凋亡和心肌组织线粒体凋亡相关分子表达的影响。 方法 将 40 只 8 周龄雄性SD 大鼠分笼喂养, 每笼 5 只, 适应性饲养 7 d, 随机分为空白对照组 (对照组)、 假手术组 (S 组)、 心肌IR 造模组 (IR 组)、 心肌 IP 造模 + IP 处理组 (IP 组), 每组各 10 只。 术后 4 h 使用生物机能实验系统记录大鼠心功能 [左心室收缩压 (left ventricular systolic pressure, LVSP)、 心室舒张末压 (left ventricular enddiastolic pressure, LVEDP)、 左心室压变化速率最大值 ( ± dp / dtmax)]。 采用 TUNEL 法检测心肌细胞凋亡指数, 采用 RT-PCR 法检测心肌细胞凋亡相关蛋白 BCL-2、 BAX 及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 ( cysteinylaspartate-specific proteinase 3, Caspase-3)、 法尼酯衍生物 X 受体 (farnesyl X receptor, FXR)、 小异二聚体配体 (small heterodimer partner, SHP) 相对表达量。 蛋白质印迹法检测心肌细胞线粒体凋亡通路标志物细胞色素 C (cytochrome C, Cyt-C) 的释放量。 结果 IP 组及 IR 组 LVEDP、 心肌细胞凋亡指数、 心肌组织BAX、 CASPASE-3、 FXR、 SHP 相对表达量及心肌细胞胞浆 Cyt-C 蛋白灰度值均高于 S 组、 对照组 ( P < 0. 05), IR 组 LVEDP、 心肌细胞凋亡指数、 BAX、 CASPASE-3、 FXR、 SHP 相对表达量及 Cyt-C 蛋白灰度值高于 IP 组 (P< 0. 05); IP 组及 IR 组 LVSP、 ± dp / dtmax、 心肌组织 BCL-2 相对表达量均低于 S 组、 对照组(P< 0. 05), IR 组 LVSP、 ± dp / dtmax、 心肌组织 BCL-2 相对表达量均低于 IP 组 (P< 0. 05)。 结论 IP 处理可减轻大鼠心肌 IR 损伤, 改善心功能, 可能与调控 BCL-2 / BAX、 FXR / SHP 等凋亡相关信号蛋白的表达有关。

目的 分析甲状腺癌组织 GATA 结合蛋白 3 ( GATA binding protein 3, GATA3) 蛋白表达情况及其与临床病理特征和手术预后的关系。 方法 选取内蒙古锡林郭勒盟中心医院 2016 年 8 月 ~ 2017 年 12 月收治的 150 例采用手术治疗的甲状腺癌患者, 取癌组织与切缘正常组织采用免疫组化法检测 GATA3 蛋白表达, 比较癌组织和切缘正常组织的 GATA3 蛋白表达量。 比较不同临床病理特征患者甲状腺癌组织 GATA3蛋白表达量; 随访 5 年分析癌组织 GATA3 蛋白表达与手术预后的关系。 结果 甲状腺癌组织 GATA3 蛋白表达量低于切缘正常组织 (P< 0. 05); 未分化癌和髓样癌、 TNM 分期Ⅲ ~ Ⅳ期、 多发病灶、 最大肿瘤直径≥ 2 cm、 有淋巴结转移患者癌组织 GATA3 蛋白表达量分别低于乳头状腺癌和滤泡状腺癌、 TNM 分期Ⅰ ~Ⅱ 期、 单发病灶、 最大肿瘤直径 < 2 cm、 无淋巴结转移患者 ( P< 0. 05); 随访期间甲状腺癌患者生存率为83. 45 % 、 死亡率为16. 55 % ; 未分化癌 ( RR = 1. 772, 95 % CI: 1. 221 ~ 2. 571)、 髓样癌 ( RR = 2. 423, 95% CI: 1. 609 ~ 3. 650)、 TNM 分期Ⅲ ~ Ⅳ 期 ( RR = 2. 020, 95 % CI: 1. 447 ~ 2. 818)、 多发病灶 ( RR =1. 914, 95 % CI: 1. 421 ~ 2. 578)、 最大肿瘤直径≥ 2 cm (RR = 1. 818, 95 % CI: 1. 129 ~ 2. 928)、 有淋巴结转移 (RR = 1. 937, 95 % CI: 1. 241 ~ 3. 022)、 GATA3 蛋白表达量 ( RR = 0. 488, 95 % CI: 0. 333 ~ 0. 715)均为甲状腺癌患者死亡的影响因素 (P< 0. 05); 甲状腺癌组织 GATA3 蛋白高表达患者生存率高于 GATA3蛋白低表达患者 (P< 0. 05)。 结论 GATA3 蛋白在甲状腺癌组织中呈低表达, 且 GATA3 蛋白表达与病理类型、 TNM 分期、 病灶数目、 肿瘤大小及淋巴结转移情况有关, 上述指标均是患者手术预后的影响因素。