目的 构建包含不同胞内信号结构域的CAR-T细胞,以解决传统CAR-T细胞因胞内激活信号过强而导致的过早耗竭、效能不足及不可控的细胞因子风暴等核心问题。方法 将CAR结构的胞内信号域CD3ζ,替换为仅含一个免疫受体酪氨酸激活基序的CD3ε信号域,构建新型BCMA-E-CAR-T细胞;应用流式细胞术检测该CAR-T细胞对靶细胞的杀伤效率、活化程度、耗竭水平、中央记忆表型分化、细胞增殖能力及细胞因子分泌水平。结果 BCMA-E-CAR-T细胞表现出显著增强的对靶细胞的细胞毒性,同时具有更低的活化程度、更低的耗竭水平、减少的细胞因子释放、增强的中央记忆表型分化以及增殖潜能。结论 本研究成功构建了以CD3ε为胞内激活信号域的新型BCMA-E-CAR-T细胞,并在体外抗肿瘤模型中证实其具有增强的抗肿瘤效应与更高的治疗安全性。

目的 探讨精胺/亚精胺N1-乙酰转移酶1（spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1,Sat1）在顺铂（cisplatin,DDP）诱导小鼠耳蜗来源的永生化听觉上皮细胞（HEI-OC1）损伤中的作用及机制。方法 将HEI-OC1细胞分为siNC、siSat1、siNC+DDP和siSat1+DDP四组。采用CCK-8法检测细胞增殖活力;通过DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;采用 qPCR 检测 Sat1、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶 1（glutathione peroxidase 1,GPx1）的 mRNA 表达水平;采用蛋白质印迹检测 Sat1 及凋亡相关蛋白 B 细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关 X 蛋白（Bcl2-associated X protein,Bax）、半胱天冬氨酸蛋白酶-3（cysteinyl aspartate-specific proteinase-3,Caspase-3）、cleaved Caspase-3 的蛋白表达水平,并计算 cleaved Caspase-3 / Caspase-3 比值与 Bcl-2/Bax 比值。采用ELISA法检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性以评估氧化应激程度。结果 与siNC组相比,siSat1组Sat1 mRNA和蛋白质表达下调,基础状态下ROS和MDA降低,SOD活性和CAT、GPx1 mRNA升高,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达减少（P_均<0.05）。DDP处理后,siNC+DDP组细胞活力下降,ROS和MDA升高,SOD活性及CAT、GPx1 mRNA降低,Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达升高;siSat1+DDP组上述指标均显著改善（P_均<0.05）。结论 Sat1通过介导氧化应激反应,在DDP诱导的HEI-OC1细胞凋亡中发挥关键作用。

目的 明确长链非编码RNA Vof16（lncRNA Vof16）是否通过异质性胞核核糖核蛋白U（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein U, HNRNPU）/复合蛋白1（complexin 1, CPLX1）轴促进脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）后轴突再生。方法 动物水平实验中,将SD大鼠按随机数字表法分为Sham、SCI、SCI+sh-NC、SCI+Vof16-KD、SCI+oe-NC、SCI+Vof16-OE组。BBB评分及机械退缩阈值评估运动-感觉功能。RNA-seq联合qRT-PCR筛选并验证差异lncRNA。脊髓组织行qRT-PCR检测Vof16、HNRNPU、CPLX1表达。细胞实验中,分离原代脊髓神经元细胞进行氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation, OGD）,构建Vof16过表达（Vof16-OE）、HNRNPU过表达（HNRNPU-OE）或敲低（HNRNPU-KD）,及Vof16-OE+ HNRNPU-OE 和Vof16-OE+ HNRNPU-KD组。CCK-8、Transwell、免疫荧光分别检测细胞增殖、迁移及微管稳定性。验证Vof16-HNRNPU-CPLX1相互作用。结果 RNA-seq结果显示lncRNA Vof16在大鼠脊髓损伤后脊髓组织中高表达。过表达Vof16可提高OGD神经元增殖、迁移,增加ace-tubulin、降低tyr-tubulin（P<0.05）。机制上,Vof16直接结合HNRNPU,抑制其降解;HNRNPU进一步结合CPLX1 mRNA并增强其稳定性。HNRNPU敲低可逆转Vof16的促再生效应。体内实验显示,SCI+Vof16-OE组术后21 d BBB评分较SCI+oe-NC组提高（P<0.05）,机械退缩阈值降低,脊髓组织HNRNPU、CPLX1表达同步升高。结论 lncRNA Vof16能够招募HNRNPU,稳定CPLX1 mRNA,从而促进轴突再生。

目的 肠道微生物与结直肠癌（colorectal cancer,CRC）的原发部位有关,为探讨结直肠癌不同原发部位肠道微生物组的差异特征,本研究整合宏基因组数据进行荟萃分析。方法 从3项研究中收集了宏基因组数据,根据右半结肠癌（right-sided colon cancer,RCC）、左半结肠癌（left-sided colon cancer,LCC）与直肠癌（rectal cancer,RC）这三个部位进行分组,首先通过双因素方差分析及菌群多样性比较识别混杂因素。随后构建微生物共现网络。采用随机森林算法构建原发肿瘤位置的预测模型。最后,将肿瘤位置与混杂因素纳入Maaslin2（microbiome multivariable associations with linear models）模型中,同时使用线性判别分析（linear discriminant analysis,LDA）以识别出差异性物种。结果 研究来源和 BMI是主要混杂因素。肠道微生物的α/β多样性在不同肿瘤部位无显著差异。放线菌门、厚壁菌门和变形菌门在三个微生物网络中均发挥关键链接作用,拟杆菌门在 RCC 的微生物网络中更为显著。三个网络中既存在共同的关键菌群,也有各自的特有关键菌群。随机森林分类模型在预测RC时表现良好,但在区分 RCC 和 LCC 时表现较差。通过对比CC与RC,以及对比RCC与LCC,Maaslin2和 LDA鉴定出的部分差异性菌群曾被报道与 CRC 位置相关的分子及免疫特征有关。结论 本研究阐明了肠道微生物组与 CRC 原发部位之间的关系,并证实 RCC、LCC 和 RC 在肠道微生物富集模式上存在差异。

目的 探讨唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-15 （sialic acid-bound immunoglobulin-like lectin 15, Siglec15）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）发生发展中的作用及其潜在机制。方法 利用在线数据库分析Siglec15在HCC的表达,并在肝癌细胞系中验证;构建Siglec15过表达/敲低的肝癌细胞模型,评估Siglec15对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响;建立裸鼠皮下肿瘤模型,观察Siglec15过表达对肿瘤生长的作用。通过转录组测序、KEGG富集及qRT-PCR、蛋白质印迹验证相关信号通路。检测PI3K/AKT信号通路关键分子（p-PI3K、p-AKT）及细胞周期、凋亡相关蛋白（P53、Caspase3、Bax、Bcl-2）的表达变化。结果 与正常肝组织相比,Siglec15在HCC组织中及肝癌细胞系中均显著高表达（P<0.05）。敲低Siglec15可显著抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖和迁移能力（P<0.05）。裸鼠成瘤实验显示,Siglec15过表达可促进肿瘤生长。测序筛选出4 765个差异基因,其中PI3K-AKT通路关键因子（PI3K、AKT、Bcl-2、CCNA2、P53等）表达变化与表型高度契合。验证实验表明,Siglec15过表达能上调PI3K、AKT、Bcl-2、CCNA2的mRNA表达,下调P53、Caspase3、Bax的表达;同时显著升高p-PI3K、p-AKT蛋白磷酸化水平,并相应调节下游凋亡与周期相关蛋白质。敲低组呈现相反趋势。结论 Siglec15通过激活PI3K/AKT信号通路（主要依赖翻译后磷酸化修饰）,调控下游凋亡与周期相关蛋白质表达,从而促进肝癌细胞增殖与迁移,其可能是HCC的潜在治疗靶点。

目的 探讨慢病毒载体介导微小RNA-195（miR-195）低表达对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）成骨分化与成血管分化的调控作用及可能机制。方法 将人BMMSCs分为空白对照组、inhibitor-NC组（慢病毒转染阴性对照NC序列）、miR-195-inhibitor组（慢病毒转染miR-195抑制序列）。采用RNA荧光原位杂交检测miR-195表达定位,CCK-8法检测增殖活力;碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色、茜素红染色及Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2,Runx2）免疫荧光评估成骨分化;血管生成拟态实验结合qRT-PCR检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、ALP、Runx2、VEGF受体2（VEGF receptor 2,VEGFR2）、促血管生成素（angiopoietin-1,Ang-1）及Wnt/β-catenin通路相关分子Wnt3a、Wnt10b、β-连环蛋白（β-catenin）、成骨细胞特异性转录因子（Osterix）的mRNA水平,蛋白质印迹检测上述通路及成骨相关蛋白表达。结果 与对照组相比,miR-195-inhibitor组miR-195表达显著下调（P_均<0.05）,增殖活力、ALP活性（4.15±0.52 vs 1.00±0.15）、茜素红阳性率（64.67 %±7.78 % vs 31.86 %±2.24 %）、Runx2荧光强度（852.38±122.70 vs 121.31±12.16 RFU）、管状结构长度（218.60±24.75 vs 49.80±5.25 μm/视野）,VEGF、ALP、Runx2、VEGFR2、Ang-1、Wnt3a、Wnt10b、β-catenin、Osterix mRNA水平及Wnt3a、Wnt10b、β-catenin、Osterix蛋白水平均显著上调（P_均<0.05）,而与空白对照组比较,inhibitor-NC组的上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 慢病毒载体介导的miR-195低表达通过激活Wnt/β-catenin信号通路,协同促进BMMSCs成骨与成血管分化。

目的 探讨白藜芦醇（resveratrol,RES）通过非受体酪氨酸激酶肉瘤病毒蛋白（SRC proto-oncogene, non-receptor tyrosine kinase,SRC）/成纤维细胞生长因子受体1（fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1）轴影响糖尿病足进展的分子机制。方法 将人皮肤成纤维细胞（human dermal fibroblasts,HDF）分为正常葡萄糖（NG）组、高葡萄糖（HG）组、HG+RES组。CCK-8检测细胞增殖活力,Transwell检测细胞迁移,TUNEL检测细胞凋亡。生物信息分析RES治疗糖尿病足的可能靶点并探究其中涉及的信号通路。进一步将HDF细胞分为NG组、HG组、HG+si-SRC组、HG+oe-SRC组、HG+oe-SRC+si-FGFR1组,测定SRC与FGFR1表达变化对细胞增殖活力、迁移能力与凋亡的影响。构建糖尿病足动物模型,RES干预治疗,α硫辛酸作为阳性对照,分析RES对于糖尿病足动物模型的治疗潜力。结果 生物信息学分析发现SRC作为RES与糖尿病足分子靶点交集之一,也是内分泌抵抗途径的关键分子。与NG组相比,HG组HFD细胞SRC表达增强,细胞增殖活力与迁移能力降低、凋亡增加;而RES干预能够逆转这一结果（P<0.05）。相比于HG组,敲减HDF细胞中的SRC,细胞活力与迁移能力提升,凋亡减少;而过表达SRC进一步抑制细胞增殖活力与迁移能力,并促进细胞凋亡,联合敲减FGFR1则能部分逆转这一结果（P<0.05）。动物实验证实RES与α硫辛酸能够对糖尿病足发挥治疗作用。结论 RES通过抑制SRC/FGFR1轴促进糖尿病足改善。

目的 探讨结直肠癌（colorectal cancer, CRC）组织中特异性AT富集结合蛋白2（special AT-rich sequence-binding protein 2, SATB2）、细胞角蛋白20（cytokeratin 20, CK20）,黏蛋白2（mucin 2, MUC2）表达的临床意义及其对CRC患者预后评估的价值。方法 回顾性选取2020年3月至2022年3月于湖北省中西医结合医院行根治性切除手术治疗的CRC患者的临床资料330例,排除失访等15例后,纳入315例进行生存分析,取CRC组织及配对癌旁组织,免疫组织化学检测三种蛋白质的表达并分组,分析其与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法及Cox回归分析预后影响因素。结果 CRC组织中SATB2、MUC2阳性率低于癌旁组织,CK20阳性率高于癌旁组织（P<0.05）。肿瘤直径<4 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移患者中SATB2、MUC2阳性率较高,其CK20阳性率较低（P_均<0.05）。单因素及多因素Cox回归分析结果显示,肿瘤直径≥4 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、CK20阳性为预后危险因素,SATB2、MUC2 阳性为保护因素（P_均<0.05）生存分析显示,SATB2、MUC2阳性患者3年死亡率较低,而CK20阳性患者较高（P<0.05）。结论 SATB2、MUC2在CRC组织中表达下调与肿瘤进展密切相关,其阳性表达提示较佳预后;CK20阳性表达则可能与不良预后相关。SATB2、CK20、MUC2表达状态可作为判断CRC患者预后风险的潜在补充标志物。

目的 研究中重度斑块型银屑病患者血清白介素-17（interleukin-17,IL-17）、抗菌肽LL-37 水平与颈动脉粥样硬化的关系。方法 选择2023年6月~2024年12月收治的168例中重度斑块型银屑病患者,检测血清IL-17和LL-37水平。根据颈动脉内膜中层厚度（intima-media thickness,IMT）将患者分为粥样硬化组（IMT≥1.5 mm,n=56）和非粥样硬化组（IMT<1.5 mm,n=112）,比较两组患者临床资料及血清IL-17、LL-37的差异,采用Pearson检验分析血清IL-17、LL-37与IMT的相关性,采用logistic回归分析颈动脉粥样硬化的影响因素,采用ROC曲线分析血清指标对颈动脉粥样硬化的诊断价值。结果 粥样硬化组的银屑病皮损面积和严重程度指数及血清低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDLC）、C反应蛋白、尿酸、IL-17、LL-37水平高于非粥样硬化组（P<0.05）;血清IL-17、LL-37与颈动脉IMT呈显著正相关关系（P<0.05）;IL-17升高（OR=1.255）、LL-37升高（OR=1.014）、LDLC升高（OR=13.278）是颈动脉粥样硬化的危险因素（P<0.05）;IL-17、LL-37、LDLC诊断颈动脉粥样硬化的曲线下面积分别为0.861、0.848、0.702;IL-17、LL-37诊断颈动脉粥样硬化的曲线下面积高于LDLC（P<0.05）,IL-17与LL-37曲线下面积比较的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 中重度斑块型银屑病患者血清IL-17、LL-37升高与颈动脉粥样硬化相关,IL-17、LL-37作为颈动脉粥样硬化诊断标志物的诊断效能优于LDLC。

目的 研究急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）患者血清circ_UTRN和circ_ZFP644表达与病情严重程度的关系。方法 选取2020年10月~2025年8月期间收治的188例AP患者作为研究的AP组,另选90例参加体检的健康者作为对照组,检测血清circ_UTRN和circ_ZFP644的表达水平。分析AP患者血清circ_UTRN、circ_ZFP644的表达水平与AP严重程度床边指数（bedside index for severity in acute pancreatitis,BISAP）评分、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHEⅡ）评分的相关性、AP患者预后的影响因素及血清circ_UTRN与circ_ZFP644的表达水平对预后的预测能力。结果 相较于对照组,AP组患者血清中circ_UTRN和circ_ZFP644的表达水平显著降低（P<0.05）;AP组内血清中circ_UTRN和circ_ZFP644的表达水平为轻症组>中重症组>重症组（P<0.05）。AP组患者血清circ_UTRN和circ_ZFP644表达水平与BISAP评分和APACHEⅡ评分呈负相关（P<0.05）;预后不良组AP患者的血清circ_UTRN和circ_ZFP644表达水平低于预后良好患者,BISAP评分、APACHEⅡ评分、C反应蛋白、降钙素原水平高于预后良好患者（P<0.05）;血清circ_UTRN和circ_ZFP644是AP预后不良的保护因素,BISAP评分、APACHEⅡ评分是AP预后不良的危险因素（P<0.05）;血清circ_UTRN和circ_ZFP644联合预测AP预后的曲线下面积高于两项指标单独预测（P<0.05）。结论 血清circ_UTRN与circ_ZFP644的低表达状态与AP患者病情进展及不良预后显著相关,联合检测对AP预后具有预测价值。

目的 通过生物信息学方法筛选动静脉移植物内瘘中内膜增生（neointimal hyperplasia, NH）相关的细胞外基质（extracellular matrix, ECM）蛋白,探讨其分子机制,为临床治疗提供新靶点与药物候选。方法 从GEO数据库获取数据集GSE97377,以AVG建模后第14天转录组数据为训练集、第5天数据为验证集。应用limma包分析得到差异表达基因（differentially expressed genes, DEGs）。通过Uniprot和HPA数据库提取ECM蛋白,并与DEGs取交集得到ECM蛋白差异表达基因（ECM protein- DEGs,EP-DEGs）。对EP-DEGs进行GO和KEGG通路分析;构建蛋白-蛋白互作网络筛选枢纽基因。应用GeneMANIA数据库对EP-DEGs进行功能分析,通过DSigDB和CB-DOCK2数据库分别进行药物预测和分子对接。结果 共鉴定出79个EP-DEGs与AVG内瘘后NH病理发展有关,其中IL1A、CXCL12、CD163和SPP1为关键枢纽基因。GO和KEGG分析显示这些基因主要参与炎症反应和ECM重塑;发现在构建AVG后5 d及14 d静脉血管中,CXCL12、CD163及SPP1表达水平一致。GeneMANIA分析提示CXCL12是调控炎性因子的关键因子。靶蛋白药物预测分析发现辛伐他汀、非洛地平、山柰酚和伏立诺他等可能通过作用于枢纽基因发挥治疗作用。分子对接分析说明靶蛋白与候选药物存在较强的相互作用。结论 通过系统鉴定与AVG内瘘后NH相关的ECM蛋白,预测了多个潜在分子靶点和候选药物,为理解NH分子机制及开发新治疗策略提供了理论依据。

翻译后修饰作为功能蛋白质组学研究中的关键调控机制,广泛参与调节蛋白质活性、亚细胞定位及相互作用。其中,赖氨酸巴豆酰化是近年来发现的一种新型修饰形式,存在于组蛋白和非组蛋白中,参与基因转录、细胞周期进程和DNA损伤应答等关键生物学过程。文章围绕赖氨酸巴豆酰化在心血管系统疾病、呼吸系统疾病、神经系统疾病、肾脏疾病、糖尿病、自身免疫性疾病及生殖内分泌相关疾病中的调控作用与分子机制展开系统综述,旨在为相关疾病的靶向治疗策略提供新的理论依据和研究思路。

单基因肥胖是由单个基因突变引起的肥胖,约占儿童和成人肥胖的2 %~10 %。自瘦素及其受体基因被鉴定以来,已发现超过85种单基因肥胖形式,绝大多数致病基因集中于下丘脑瘦素—黑皮质素信号通路,该通路是中枢调控食欲与能量平衡的核心枢纽。黑皮质素 4 受体（melanocortin 4 receptor, MC4R）突变是早发性单基因肥胖最常见病因基因,占所有单基因肥胖病例的1/4以上。近年来,随着全外显子测序和大规模队列研究的推进,TUB、ADCY3、ALMS1等新基因陆续被鉴定,极大拓展了单基因肥胖的遗传谱系。在临床治疗方面,基于遗传机制的精准药物已取得突破性进展：MC4R激动剂Setmelanotide已获批用于POMC、PCSK1、LEPR缺乏症及巴德-毕德氏综合征等特定遗传亚型,口服MC4R校正剂CGX-926已进入Ⅰ期临床试验。文章系统综述单基因肥胖的致病基因谱系、分子机制、遗传检测策略及靶向治疗进展,旨在为临床精准诊疗提供理论依据。

门窦血管病（porto-sinusoidal vascular disease,PSVD）是近年来新界定的肝脏血管性疾病,其特征为门脉-窦性微循环结构损伤及由此引起的门静脉高压相关并发症。随着病理学、转录组学与遗传学研究以及医学影像技术的发展,针对PSVD 的诊断识别已由单纯临床排除性诊断进展为采用病理学、分子生物学和无创检查等多种手段进行综合评估的精准诊疗模式。文章围绕 PSVD 的病理生理学与分子机制、病理学基础、临床表现、分子与无创诊断线索及治疗策略等方面进行综述,并对分层诊断模型与机制导向治疗的研究方向进行展望。

基因编辑技术能够精确修饰生物体基因组中的特定DNA片段,为疾病治疗、基因功能研究、基因检测和药物开发等开辟了新途径。传统CRISPR-Cas9基因编辑技术依赖DNA双链断裂（double-strand break,DSB）,其在修复过程中易诱发indel突变、具有细胞毒性且同源定向修复（homology-directed repair, HDR）效率低下,严重限制了其在精准医学中的应用。为解决以上问题,一系列不依赖DSB的新型CRISPR衍生技术应运而生。文章系统综述了碱基编辑器、引导编辑器及转座子类编辑器这三个代表性技术的原理、发展与应用,分析了它们如何利用机制创新来规避DSB,同时深入探讨了其在编辑效率、精度、适用范围与递送难度等方面的优势与局限,展望了编辑器的未来发展方向,指出小型化、效率提升与递送工具创新是推动该技术实现向临床转换的关键。

目的 针对新医科背景下高层次创新人才培养需求,研究旨在解决传统《分子生物学》课程教学存在的前沿更新滞后、师资结构单一、理论实践脱节等问题,通过系统化教学改革,探索从知识传授向创新能力与科学素养培养转型的有效路径。方法 以空军军医大学硕士研究生《分子生物学》课程为对象,开展以“模块+3X”为核心的教学体系改革。以遗传信息流为主线,构建“中心法则历久弥新”“分生技术日新月异”“分子研究入木三分”“临床转化相得益彰”四个模块化教学内容,实现从经典到前沿的阶梯式推进。通过“+3X”模式,融入专题精讲、名师课堂与青年学者案例分享,促进多学科交叉与理论实践结合。研究采用定制化问卷调查与形成性评估,对教学效果进行系统分析。结果 教学改革实施后,课程选课率、课程满意度、学生知识掌握度及科研兴趣均得到显著提升。形成性评估结果表明,“模块+3X”体系有效促进了学生对分子生物学经典理论与前沿进展的理解,加强了跨学科思维与实践能力的培养。结论 “模块+3X”教学体系成功推动了分子生物学教学从知识传授向创新能力与科学素养培养的转型,显著提升了教学效果与研究生培养质量。