目的   鉴定 Muted 蛋白相互作用蛋白。

方法   表达并纯化 GST-Muted 蛋白融合蛋白, 与小鼠脑组织蛋白共孵育, 银染获得与 Muted 互作的蛋白条带, 利用质谱技术获得这些条带的氨基酸序列, 鉴定Muted 的相互作用蛋白。 

结果   初步鉴定出 31 个与 Muted 特异结合的互作蛋白, 包括外泌体蛋白、 细胞骨架蛋白及马达蛋白等, 进一步应用免疫共沉淀技术验证了 Muted 与 Stxbp1 的相互作用。 

结论   从小鼠脑组织初步鉴定了 Muted 蛋白的结合蛋白, 为进一步研究 Muted 蛋白在 LDCVs 形成和分泌过程中的功能及机制提供了新的线索。

目的  探讨白桦脂酸对 H2O2诱导的 PC12 神经细胞氧化损伤和凋亡的影响。 方法 PC12 神经细胞分成 Control、 Model (H2O2刺激)、 BA-L (1 μmol / L 的白桦脂酸和 H2O2刺激)、 BA-M (2 μmol / L 的白桦脂酸和 H2O2刺激)、 BA-H (4 μmol / L 的白桦脂酸和 H2O2 刺激)、 BA-H + PMA 组 (1 μmol / L 的白桦脂酸、H2O2 、 NF-κB 信号通路激活剂 PMA 刺激), CCK-8 方法分析细胞增殖活性变化, 流式细胞术分析细胞凋亡水平变化, Western 印迹分析细胞中 Bax、 Bcl-2、 P65 蛋白表达变化, 黄嘌呤氧化法检测 SOD 水平, 比色法检测 GSH-Px 水平、 硫代巴比妥酸法检测 MDA 水平、 CellROX Green 荧光法检测 ROS 水平。 结果 与 Control 组比较, Model 组 PC12 神经细胞增殖活性降低, 细胞凋亡率升高, 细胞中 Bax 蛋白表达水平升高, Bcl-2蛋白表达水平降低, SOD、 GSH-Px 活性降低, MDA、 ROS 水平升高, P65 蛋白水平升高。 与 Model 组比较,BA-L、 BA-M、 BA-H 组 PC12 神经细胞增殖活性逐渐升高, 细胞凋亡率逐渐降低, 细胞中 Bax 蛋白表达逐渐减少, Bcl-2 蛋白表达逐渐增加, SOD、 GSH-Px 活性逐渐升高, MDA、 ROS 水平逐渐降低, P65 蛋白水平逐渐降低。 与 BA-H 组比较, BA-H + PMA 组 C12 神经细胞增殖活性降低, 细胞凋亡率升高, 细胞中 Bax、P65 蛋白表达增多, Bcl-2 蛋白表达减少, SOD、 GSH-Px 活性降低, MDA、 ROS 水平升高。 结论 白桦脂酸通过下调 NF-κB 信号抑制 H2O2诱导的 PC12 神经细胞氧化损伤和细胞凋亡。

目的  探究胰激肽原酶 ( PK) 对链脲佐菌素 ( STZ) 诱导的糖尿病肾病 ( DN) 大鼠肾纤维化的影响及机制。 方法  将雄性 Wistar 大鼠随机分为健康对照组 ( Control)、 模型组 ( Model)、 低、 高剂量胰激肽原酶组 (75、 150 U/ kg) 各 15 只。 测定各组大鼠尾动脉收缩压、 生化指标及蛋白表达水平; 观察肾组织病理形态改变。 结果   150 U/ kg 组大鼠在 3、 6、 9 周时的收缩压及干预后的尿素氮 ( BUN)、 肌酐( SCr)、 β-2 微球蛋白 ( β2-MG)、 Caspase-3、 Caspase-9 表达水平显著低于 Model 组和 75 U/ kg 组 ( P <0. 05); 一氧化氮 ( NO) 水平显著高于 Model 组和 75 U/ kg 组 ( P< 0. 05)。 染色结果显示, PK 处理后大鼠肾组织纤维化、 系膜基质增生、 炎性浸润显著改善  结论  PK 可能通过改善大鼠肾脏血流动力学、 抑制细胞凋亡来干预 DN 大鼠肾纤维化进程。

目的 研究 Chemerin / CMKLR1 对 RF / 6A 细胞自噬和血管形成的影响。 方法 将 RF / 6A 细胞分为对照组, 1、 10、 100 nmol / L chemerin 组, CMKLR1 受体抑制剂组 (10 nmol / L chemerin + α-NETA)。 培养24 h 后利用 Western 印迹检测自噬相关蛋白 LC3、 Beclin-1 表达水平, CCK8 法、 Transwell 及基质胶法检测RF / 6A 细胞增殖, 迁移, 管腔形成。 结果 LC3、 Beclin-1 在 3 种浓度 chemerin 组表达水平较对照组高 (P<0. 05), 与 10 nmol / L chemerin 组相比, CMKLR1 受体抑制剂组 LC3、 Beclin-1 表达水平降低 (P< 0. 05)。 相比对照组, 10 nmol / L、 100 nmol / L chemerin 组促进细胞增殖, 而抑制剂组作用相反 (P< 0. 05); 对照组、 10 nmol / L chemerin 组、 CMKLR1 受体抑制剂组 3 组细胞迁移数分别是 52. 8 ± 5. 6、 69. 5 ± 3. 6、 39. 5 ± 7. 5 (P <0. 05), 3 组细胞管腔形成长度分别是 10 215 ± 912、 12 925 ± 1 768、 10 672 ± 735 ( P< 0. 05), 差异具有统计学意义。 结论 Chemerin / CMKLR1 通路能够激活 RF / 6A 细胞自噬, 促进细胞增殖、 迁移和管腔形成。

目的   探究外周血单个核细胞 (PBMCs) 线粒体转录因子 A (TFAM)、 生长分化因子-15 ( GDF-15)、 淋巴细胞 β1 肾上腺素受体 ( β1-AR) 的 mRNA 对近期主要心血管不良事件 ( MACE) 的预测效能。

方法   选取延安大学附属医院 2017 年 4 月 ~ 2019 年 10 月 CHF 患者 127 例作为研究对象, 分析外周血指标
与心肌重构指标与心肌重构指标 [左心房内径 ( LAP)、 左室后壁厚度 ( LVPW)、 左室舒张末内径 ( LVEDD)、 左室质量

指数 (LVMI)、 左室重构指数 ( LVRI)]、 LVEF 相关性及对 MACE 的预测价值。 

结果   PBMCs 中 TFAM、淋巴细胞 β1-AR mRNA 相对含量与 LAP、 LVPW、 LVEDD、 LVMI 呈负相关, 与 LVRI、 LVEF 呈正相关,GDF-15 mRNA 相对含量与 LAP、 LVPW、 LVEDD、 LVMI 呈正相关, 与 LVRI、 LVEF 呈负相关 ( P< 0. 05);随访 3 个月, 发生 MACE 组 PBMCs 中 TFAM、 淋巴细胞 β1-AR mRNA 相对含量低于未发生 MACE 组, GDF-15 mRNA 高于未发生 MACE 组 (P< 0. 05); PBMCs 中 TFAM、GDF-15、 淋巴细胞 β1-AR mRNA 相对含量联合预测 MACE 的 AUC 值为 0. 889, 大于任一指标单独预测。 

结论   CHF 患者 PBMCs 中 TFAM、 GDF-15、 淋巴细胞巴细胞 β1-AR mRNA 表达异常, 在其病理变化中发挥重要作用, 且表达水平与 MACE 发生关系密切, 可能成为 CHF 新的标志物及治疗靶点。

目的   探讨持续跑步运动对七氟醚麻醉致幼鼠学习记忆功能损伤的影响及机制。 

方法   36 只 14 d龄 SD 幼鼠, 适应性喂养一周后, 随机分为对照组、 七氟醚组、 运动组, 每组 12 只。 七氟醚组与运动组持续吸入 3 % 七氟醚麻醉 4 h。 苏醒后, 运动组持续进行跑步锻炼。 连续锻炼 14 d 后, 开始水迷宫测试, 应用 Nissl 染色观察大鼠脑组织病理变化, Western 印迹测海马与皮层组织中各蛋白表达。

结果   水迷宫训练第一天, 各组幼鼠寻找逃生平台潜伏期没有显著性差异, 随着训练次数增加, 与对照组相比, 七氟醚组幼鼠寻找平台时间显著增加 (P< 0. 05), 且穿越平台次数显著减少 (P< 0. 05)。 与七氟醚组相比, 运动组幼鼠平台寻找时间显著减少 ( P< 0. 05), 穿越平台次数显著增加 ( P< 0. 05)。 此外, 七氟醚造成幼鼠脑中BDNF、 Caveolin-1、 VEGF 蛋白表达显著降低 (P< 0. 05), Nissl 染色中七氟醚吸入幼鼠脑组织中 Nissl 阳性细胞数显著减少, 即幼鼠神经元新生受损, 然而持续运动则有效升高了脑中 BDNF、 Caveolin-1 与 VEGF 蛋白表达水平, 增加了 Nissl 阳性细胞数, 改善的幼鼠脑中神经元新生。 

结论   持续运动有效改善了七氟醚诱导的幼鼠认知功能损伤, 其机制可能与上调 Caveolin-1 / VEGF 信号通路表达相关。

目的   探讨 circ_ 0001955 对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制。 

方法   RT-qPCR 检测 41 例肺癌组织及癌旁组织中 circ_ 0001955 和 miR-188-3p 表达, 分析肺癌组织中 circ_ 0001955 和 miR-188-3p 表达的相关性。 体外培养肺癌细胞 A549, 双荧光素酶报告基因实验验证 A549 细胞中 circ_ 0001955 和 miR-188-3p 调控关系。 构建干扰 si-circ_ 0001955 或过表达 miR-188-3p 的 A549 细胞, 用 CCK-8 法和克隆形成实验、划痕实验、 流式细胞术及蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、 迁移、 凋亡及细胞中 Bax 和 Bcl-2 蛋白表达。 

结果   与癌旁组织比较, 肺癌组织中 circ_ 0001955 表达升高 (P< 0. 05), miR-188-3p 表达降低 ( P< 0. 05)。肺癌组织中 circ_ 0001955 和 miR-188-3p 的表达呈负相关 (r = - 0. 978, P< 0. 05)。 circ_ 0001955 可靶向结合 miR-188-3p, 且干扰 circ_ 0001955 促进 A549 细胞中 miR-188-3p 表达。 干扰 circ_ 0001955 或过表达 miR-188-3p 降低了 A549 细胞集落形成数、 划痕愈合率及细胞中 Bcl-2 蛋白表达 (P< 0. 05), 提高了细胞增殖抑制率、 凋亡率及 Bax 蛋白表达 (P< 0. 05)。 干扰 miR-188-3p 逆转干扰 circ_ 0001955 对 A549 细胞增殖、 迁移和凋亡的影响。 

结论   干扰 circ_ 0001955 可能通过上调 miR-188-3p 阻碍肺癌细胞增殖和迁移, 并促进细胞凋亡。

目的    探究低温压力下 DNA 甲基转移酶 1 ( DNA methyltransferase 1, DNMT1) 的作用。 

方法    以斑马鱼胚胎成纤维样细胞 (zebrafish embryonic fibroblast like cell line, ZF4) 为研究对象, 检测 ZF4 细胞低温下 dnmt1 的表达变化, 并构建靶向 dnmt1 的 shRNA 通过慢病毒在 ZF4 细胞中敲低 dnmt1, 进一步检测敲低 dnmt1 对于低温下 ZF4 细胞全基因组 DNA 甲基化、 细胞存活率和凋亡相关基因表达的影响。 

结果    18 ℃低温压力下 ZF4 细胞中 dnmt1 的 mRNA 表达量升高, 在处理第 3 天达到顶峰。 sh-dnmt1 慢病毒可以有效下调 ZF4 细胞中 dnmt1 的表达。 低温压力下, ELISA 结果显示 dnmt1 敲低后细胞全基因组 DNA 甲基化水平显著下调 (P< 0. 05), 台盼蓝染色显示细胞存活率显著升高 ( P< 0. 001), RT-qPCR 结果显示凋亡相关基因bax 表达量显著下调 ( P < 0. 001)、 bcl-2 表达量显著上调 ( P < 0. 001)、 caspase-3 表达量显著下调 ( P <0. 01)。 

结论    低温压力下敲低 dnmt1 对 ZF4 细胞具有保护作用, 而且 DNA 甲基化水平降低、 细胞凋亡受到抑制可能与其保护作用相关, 研究结果可为后期研究人类低温耐受的分子机制提供新线索。

目的    研究卵巢癌白介素-8 (IL-8) 表达与上皮间质转化 (EMT) 的关系及临床意义。 

方法    选择 2018 年 1 月 ~ 2019 年 12 月在上海市第一妇婴保健院妇产科手术切除并保存的卵巢癌组织及卵巢良性肿瘤组织, 采用荧光定量 PCR 法检测 IL-8 及 EMT 标志基因 E-钙黏蛋白 ( E-cadherin)、 N-钙黏蛋白 ( N-cadherin) 及波形蛋白 (Vimentin) 的 mRNA 表达水平, 采用 SP 法免疫组化检测 IL-8、 E-cadherin、 N-cadherin、Vimentin 的蛋白阳性表达率, 采用 Pearson 检验及 Spearman 检验分析 IL-8 与 EMT 标志基因的相关性。 

结果    卵巢癌组织中 IL-8、 N-cadherin、 Vimentin 的 mRNA 表达水平及阳性表达率均高于卵巢良性肿瘤组织, Ecadherin 的 mRNA 表达水平及阳性表达率均低于卵巢良性肿瘤组织 ( P< 0. 05); IL-8 的 mRNA 表达水平及阳性表达率与 N-cadherin、 Vimentin 的 mRNA 表达水平及阳性表达率呈正相关, 与 E-cadherin 的 mRNA 表达水平及阳性表达率呈负相关 ( P< 0. 05); FIGO 分期Ⅲ 期、 淋巴结转移 N2 / 3卵巢癌中 IL-8 的 mRNA 表达水平及阳性表达率高于 FIGO 分期Ⅰ ~ Ⅱ 期、 淋巴结转移 N0 / 1卵巢癌组织 ( P< 0. 05)。 

结论   卵巢癌中 IL-8的表达异常上调且与 EMT 有关, 高表达的 IL-8 可能通过促进 EMT 造成卵巢癌进展。

目的    探究 FOS 样抗原 1 (FOS-like antigen 1, FOSL1) 对哮喘中气道平滑肌细胞 (airway smooth muscle cells, ASMCs) 增殖与迁移的作用及其分子机制。 

方法    建立 TGF-β1 诱导的 ASMCs 模型, 并采用CCK-8 试剂盒检测细胞活力。 使用 qRT-PCR 和 Western 印迹方法检测 FOSL1 及 ITGA6 的表达量。 MTT 法、Transwell 试验、 qRT-PCR 和 Western 印迹方法被用于测定 ASMCs 细胞增殖、 迁移及其过程中关键蛋白的表达量。 

结果    TGF-β1 诱导下, ASMCs 细胞中的 FOSL1 表达量上升。 沉默 FOSL1 后, ASMCs 细胞的增殖及迁移能力降低迁移能力降低, 并且细胞增殖过程中关键蛋白细胞核增殖因子及细胞核增殖抗原, 迁移过程中关键蛋白基质金属蛋白酶-2 及基质金属蛋白酶-9 的表达量均显著降低。 沉默 FOSL1 降低 ITGA6 的表达量。 过表达 ITGA6 及 IGF-1 / SC79 (PI3K / AKT 信号通路激活剂) 可部分程度上缓解沉默 FOSL1 导致的 ASMCs 细胞增殖及迁移能力的降低。 

结论    FOSL1 可通过 ITGA6 / PI3K / AKT 通路调节气道平滑肌细胞的增殖及迁移能力, 进而影响儿童呼吸哮喘的疾病进程而影响儿童呼吸哮喘的疾病进程。

目的    探究叉头框蛋白 S1 ( forkhead box S1, FOXS1) 在结直肠癌 ( colorectal cancer, CRC) 中的表达及其临床预后价值。 

方法    分别采用免疫组化和 RT-qPCR 检测 108 对 CRC 组织中 FOXS1 蛋白和mRNA 的表达水平, 进一步统计分析 FOXS1 表达与患者临床病理特征的相关性及其预后价值。 

结果    与癌旁组织相比, FOXS1 蛋白和 mRNA 在 CRC 组织中的表达水平均显著上调, 且其高表达与肿瘤分化程度、 T分期、 N 分期、 TNM 分期、 淋巴脉管浸润及神经侵犯显著相关 ( P均<0. 05); 生存分析显示, FOXS1 高表达组患者的总体生存率显著低于低表达组 (χ2 = 8. 301, P = 0. 004); 单因素和多因素分析表明 FOXS1 高表达是影响 CRC 患者总生存期的独立危险因素 ( HR = 1. 998, 95 % CI: 1. 346 ~ 4. 003, P = 0. 008)。

结论    FOXS1 在 CRC 组织中表达上调, 其高表达与多个不良临床病理参数及较差的预后密切相关, 可能成为评估

CRC 患者预后的重要生物标志物。