【摘要】　目的　研究山麦冬皂苷B 通过调节非受体型酪氨酸蛋白激酶2 (JAK2) / 信号转导子和转录激活因子3 (STAT3) 通路对脑缺血再灌注损伤的作用。方法　构建大鼠脑缺血再灌注模型。造模前10 min 和造模后2 h, 尾静脉注射山麦冬皂苷B 10、20、40 mg/ kg, 尼莫地平1 mg/ kg 或AG490 3 mg/ kg。HE、Nissl和TUNEL 染色观察神经细胞损伤, 蛋白印迹检测JAK2 和STAT3 蛋白磷酸化水平。结果　与模型组比, 40 mg/ kg 山麦冬皂苷B 显著降低大鼠神经功能评分和脑含水量, 增加尼氏小体数, 减少凋亡率, 并显著上调p-JAK2/ JAK2 和p-STAT3/ STAT3 蛋白表达(P均<0. 05)。STAT3 siRNA 和JAK2/ STAT3 通路阻断剂AG490 均逆转了山麦冬皂苷B 对脑I/ R 大鼠的上述作用(P<0. 01)。结论　山麦冬皂苷B 激活JAK2/ STAT3 通路改善脑缺血再灌注损伤。

【摘要】　目的　探讨异麦角甾苷(ISO) 对A549 细胞凋亡和氧化应激的影响。方法　CCK-8 实验检测细胞的活力; A549 细胞分为ISO 0、5、10 和20 μmol/ L 4 组, 克隆形成实验检测细胞增殖; 流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位变化; Western 印迹检测凋亡相关蛋白的表达; 试剂盒检测细胞中的超氧化物歧化酶(SOD) 和丙二醛(MDA) 含量。结果　与ISO 0 μmol/ L 组比较, ISO 10 μmol/ L 及以上浓度均显著降低A549 细胞活力(P<0. 05), ISO 10 和20 μmol/ L 组抑制A549 细胞的增殖(P<0. 05), 促进细胞的凋亡 (P<0. 05), 降低细胞线粒体膜电位, 上调Bax/ Bcl-2 和Caspase-3 蛋白表达, 下调c-Myc 蛋白表达(P<0. 05), 促进氧化应激(P<0. 05)。结论　ISO 能抑制A549 细胞增殖, 促进细胞凋亡和氧化应激。

【摘要】　目的　探究UNC5A 基因过表达对膀胱癌T24 细胞增殖、转移及Wnt/ β-catenin 信号通路的影响。方法　选取T24 细胞, 转染UNC5A-pcDNA 和pcDNA-NC, 将细胞随机分为Control 组、pcDNA-NC 组和UNC5A-pcDNA 组。RT-PCR 检测UNC5A mRNA 表达水平; 克隆形成实验检测细胞克隆形成率; 流式细胞术检测细胞凋亡率; Transwell 检测细胞侵袭细胞数; Western 印迹检测UNC5A、Wnt1、β-catenin 蛋白表达水平; 加入Wnt/ β-catenin 信号通路激活剂LiCl 检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭情况。结果　与Control 组比较, UNC5A-pcDNA 组UNC5A mRNA 和蛋白表达水平升高(P< 0. 05), 克隆形成率降低(P< 0. 05), 细胞凋亡率升高(P<0. 05), 侵袭细胞数降低(P<0. 05), Wnt1、β-catenin 蛋白表达水平降低(P< 0. 05)。加入Wnt/ β-catenin 信号通路激活剂LiCl 则能逆转过表达UNC5A 对T24 细胞增殖、侵袭的抑制作用, 凋亡促进作用。结论UNC5A 基因过表达可能通过抑制Wnt/ β-catenin 信号通路的活化抑制T24 细胞增殖、侵袭, 并诱导细胞凋亡。

【摘要】　目的　观察宫颈癌患者的血浆循环肿瘤DNA (circulating-tumor DNA, ctDNA) 及染色体拷贝数变异(copy number variations, CNVs), 探讨与宫颈癌临床病理特征的相关性。方法　选取2017 年3 月至2017 年10 月在青岛市市立医院就诊的宫颈癌患者30 例, 收集治疗前外周血标本, 应用二代测序技术(next generation sequencing, NGS) 检测ctDNA 及CNVs, 分析患者的临床资料及病理特征, 评估染色体拷贝数变异情况及ctDNA 与临床病理特征的关系。结果　30 例患者中, ctDNA 阳性率33. 3 % (10/30), ctDNA
与宫颈癌的分期、肿瘤大小及间质浸润有关(P<0. 05), 而与年龄、HPV 感染、SCC 水平、病理类型、组织学分级、宫旁浸润、淋巴结转移、手术切缘及淋巴脉管间隙浸润无关(P>0. 05)。CNVs 发生率为46. 7 % (14/30), 最常见的为3 号及6 号染色体, 14 例发生拷贝数变异的患者中, 3 号染色体占50 % (7/14), 3q 扩增占35. 7 % (5/14), 6 号染色体占35. 7 % (5/14)。结论　临床分期为ⅡA 期, 肿瘤大小> 2 cm, 间质浸润深度>1/2 的宫颈癌患者血浆ctDNA 检出率明显升高; CNVs 最常见于3 号及6 号染色体, 其中3q 扩增最常见, ctDNA 及CNVs 在宫颈癌的临床诊治中有一定的价值。

【摘要】　目的　探讨circKIF4A 对胃癌AGS 细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其对miR-3666 的靶向调控作用。方法　qRT-PCR 法检测胃癌组织和癌旁组织中circKIF4A、miR-3666 的表达量; 体外培养人胃癌细胞AGS, si-NC、si-circKIF4A、miR-NC、miR-3666 mimics、si-circKIF4A + anti-miR-NC、si-circKIF4A + anti-miR-3666 分别转染至AGS 细胞; CCK-8、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell 实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测circKIF4A 与miR-3666 的靶向关系。结果　胃癌组织中circKIF4A的表达量升高(P< 0. 05), miR-3666 的表达量降低(P< 0. 05); 转染si-circKIF4A 或转染miR-3666 mimics 均可降低细胞活力和划痕愈合率(P<0. 05), 克隆形成数和侵袭细胞数减少(P< 0. 05); circKIF4A 能够靶向调控miR-3666; 共转染si-circKIF4A 和anti-miR-3666 可恢复转染si-circKIF4A 对AGS 细胞生物学行为的作用。结论　干扰circKIF4A 表达可通过靶向miR-3666 而抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

【摘要】　目的　探索锌指结构E-box 结合蛋白1 (ZEB1) 以及尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT) 在胃癌细胞的免疫逃逸调控中的作用和潜在分子机制。方法　使用siRNAs 或过表达载体对ZEB1 和NNMT 的表达进行干扰或上调, 经不同处理的胃癌细胞与人外周血单个核细胞(PBMC) 共培养。RT-qPCR 和蛋白质印迹法(Western blotting) 测定胃癌细胞中ZEB1、NNMT 和程序性死亡配体1 (PD-L1) 的表达情况。流式细胞术和Elisa 实验分别检测Treg 细胞、NK 细胞的比例以及细胞因子的含量。结果　ZEB1 和NNMT 均在胃癌细胞中显著上调, 干扰ZEB1 表达引起了NNMT 的下调。此外, 干扰ZEB1 或NNMT 的表达显著抑制胃癌细胞中PD-L1 的表达, 降低共培养体系中Treg 细胞的比例以及TGF-β 和IL-10 的含量, 提高NK 细胞占比和IFN-γ、TNF-α 的含量。过表达NNMT 可逆转干扰ZEB1 的表达对免疫逃逸的抑制作用。结论　干扰ZEB1 表达通过诱导NNMT 表达的下调阻碍胃癌细胞发生免疫逃逸。

【摘要】　目的　研究槲皮素抗结肠癌细胞SW480 生长的作用, 并探索其可能的作用机制。方法　通过CCK-8 法来检测SW480 细胞在槲皮素处理下的增殖变化; 运用HE 染色、电镜观察和流式细胞术方法检测SW480 细胞在槲皮素处理下的凋亡变化; 运用Transwell 检测槲皮素处理情况下SW480 细胞在体外的粘附、运动和侵袭能力变化; 运用明胶酶谱分析法检测槲皮素处理情况下SW480 细胞基质金属蛋白酶分泌能力的变化。结果　CCK-8 法检测显示槲皮素处理使SW480 细胞受到了显著的增殖抑制, 且具有剂量和时间依赖
性; HE 染色、流式细胞术及电镜分析发现槲皮素明显诱导细胞凋亡, 并将SW480 细胞周围阻滞于G2 / M期; 此外, 槲皮素也能够使结肠癌SW480 细胞的体外侵袭和运动能力受到抑制, 且该抑制作用呈剂量依赖性关系; 明胶酶谱法显示槲皮素处理后, SW480 细胞对金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)和金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9, MMP-9) 的分泌均下降。结论　槲皮素对人结肠癌SW480 细胞的增殖有明显的抑制作用, 并能促进SW480 细胞发生凋亡。槲皮素对结肠癌SW480 细胞的迁移及侵袭能力均表现出抑制作用, 并且呈剂量依赖性, 这可能和槲皮素能够抑制MMP-2 及MMP-9 的分泌有关。

【摘要】　目的　探究积雪草苷对链脲佐菌素(STZ) 诱导的大鼠糖尿病及其并发肝肾损伤的保护作用。方法　取40 只SPF 级SD 大鼠随机分为对照组、模型组、积雪草苷8、16、32 mg/ kg 组。除对照组外, 其余各组大鼠腹膜内注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ) (65 mg/ kg)。3 d 后测尾静脉空腹血糖高于16. 7 mmol/ L, 表示建模成功。积草雪苷各剂量组大鼠腹膜内注射相应剂量药物, 对照组和模型组大鼠腹膜内注射等量生理盐水, 每天1 次, 持续4 周。检测尾静脉空腹血糖、肥胖指数, 全自动生化分析仪检测尿蛋白、
总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血清尿素氮(BUN) 和血清肌酐(Scr), qRT-PCR 和WB 检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素(IL) -6、IL-1β 和IL-10 表达; 取肝脏和肾脏进行HE 染色, 观察肝肾组织病理形态学变化, Western 印迹法检测肾脏组织中线粒体凋亡通路相关蛋白的表达和AKT/ GSK3β 的磷
酸化。结果　积草雪苷16 mg/ kg 和32 mg/ kg 明显降低DM 大鼠血糖、肥胖指数和尿蛋白含量(P<0. 05), 以及血清中HDL、LDL、TG、TC、ALT、AST、BUN、Scr、iNOS、IL-6、IL-1β 和IL-10 水平(P < 0. 05); 明显减轻DM 大鼠肝肾组织病理损伤, 减少炎性细胞浸润; 显著减少DM 大鼠肝肾组织细胞凋亡率, 逆转 DM 大鼠cleaved Cas-9/ Cas9、cleaved Cas-3/ Cas3、p-AKT/ AKT 和p-GSK3β/ GSK3β 比值的上调(P< 0. 05)。 结论　积草雪苷对DM 具有显著的降糖降脂功效, 对DM 并发的肝肾功能损伤也起到重要的保护作用, 其作用机制可能与AKT/ GSK3β 通路有关。

【摘要】　目的　人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV) 感染情况及亚型分布具有明显的地域差异性, 分析来自成都大学附属医院检测的1 117 例女性HPV 感染率及亚型分布, 为开发新一代HPV 疫苗和防治宫颈癌提供更多本土化的数据支持。方法　选取自2019 年10 月至2020 年12 月在成都大学附属医院进行宫颈癌筛查的1 117 例女性为研究对象, 取宫颈脱落细胞进行HPV 基因分型和细胞病理学检测, 统计分析HPV 感染情况和亚型分布。结果　1 117 例受检人员中, HPV 阳性270 例, 感染率为24. 17 %, 感染率最高的前3 种亚型依次是HPV52 (60 例)、HPV16 (42 例)、HPV58 (38 例), 单一感染阳性率为17.82 %, 构成比为73. 70 %。HPV 感染率最高的年龄组是51 ~60 岁组(32. 30 %), 随后依次为≤30 岁组(28. 67 %)、41 ~50 岁组(22. 42 %)、≥61 岁组(18. 52 %), 31 ~40 岁组HPV 感染率最低(18. 33 %)。宫颈上皮内病变阴性人群中HPV 感染率为19. 39 %, 而在不能明确意义的非典型鳞状细胞(atypical squamous cells of undetermined signification, ASCUS)、低级别鳞状上皮内病变( low-grade squamous intraepithelial lesion,
LSIL)、高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL) 和宫颈癌人群中HPV 感染率分别为32. 73 %、38. 10 %、54. 17 %和70. 27 %。结论　该院检出的HPV 感染率为24. 17 %, 感染亚型以HPV52、HPV16、HPV58 为主。年龄特异性HPV 感染率呈双峰分布, 即≤30 岁和≥51 岁人群感染率较高, 为高风险人群。且HPV 感染率与宫颈病理状态的严重程度呈正相关, 这对我国新一代HPV 疫苗开发与预防具有重要价值。本研究进一步更新和补充了地域性HPV 流行数据, 对宫颈癌的筛查和防治具有重
大意义。

【摘要】　目的　探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9 (caspase recruitment domain containing protein 9, CARD9) 与乳腺癌患者临床特征关系及对乳腺癌MDA-MB-231 细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法　选取2018 年1 月至2019 年9 月咸宁市中心医院保存的乳腺癌标本90 例, 同时选取癌旁组织作为对照, 采用Western 印迹检测CARD9 蛋白表达, 组间差异比较采用t 检验; 选取人类乳腺癌细胞株MDA-MB-231 细胞, 分为对照组、空白转染组和阳性转染组, 其中空白转染组转染空白质粒, 阳性转染组转染CARD9 表达质粒, 采用CCK8试验检测细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞凋亡, Transwell 试验检测细胞侵袭, 组间差异比较采用F 检验。 结果　乳腺癌组织CARD9 蛋白相对表达量为(1. 03 ±0. 22), 明显高于癌旁组织(P< 0. 05); 肿瘤直径> 5 cm、TNM 分期Ⅲ期、ER 表达阳性组织CARD9 蛋白相对表达量分别为(1. 12 ±0. 20)、(1. 27 ±0. 21) 和 (1. 12 ±0. 19), 明显高于肿瘤直径≤5 cm、TNM 分期Ⅰ ~ Ⅱ期、ER 表达阴性组织(P< 0. 05); 阳性转染组细胞培养24、48 和72 h 时A 值分别为(0. 487 ±0. 102)、(0. 702 ±0. 107) 和(0. 972 ±0. 106), 明显高于对照组和空白转染组(P<0. 05); 阳性转染组、空白转染组和对照组细胞凋亡率比较差异无统计学意义 (P>0. 05); 阳性转染组细胞侵袭数为(101. 2 ±11. 4) 个, 明显多于空白转染组和对照组(P<0. 05)。结论　乳腺癌组织CARD9 蛋白表达上调, 与肿瘤直径、TNM 分期及ER 表达有一定关系; CARD9 表达对乳腺癌MDA-MB-231 细胞增殖及侵袭能力有一定影响, 对细胞凋亡无明显影响。

【摘要】　低氧性肺血管收缩(hypoxic pulmonary vasoconstriction, HPV) 与肺血管重构(hypoxic pulmonary vascular remolding, HPVR) 是低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension, HPH) 发生发展过程中的两个主要阶段, 其中低氧性肺血管重构是HPH 的主要病理生理特征。血管壁的肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞异常的增殖、凋亡和代谢变化会导致肺血管重构和阻塞, 是HPH 进行性加重的主要原因。目前发现缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factors, HIF) 与微小核糖核酸(miRNA) 均可引起与低氧性肺动脉高压肺血管重构相关的血管壁细胞的改变, 导致细胞增殖与凋亡的失衡, 并进一步诱导HPH 的形成。了解HIF 和miRNA 在低氧性肺血管重构中作用的最新研究成果, 有助于了解HPH 发病的分子基础, 确定新的预后标志物及治疗靶点, 为靶向治疗疾病提供新的导向。

【摘要】　非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD) 是目前最常见的慢性肝病。近期, 国际专家小组建议将NAFLD 改为代谢相关性脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease, MAFLD), 以反映对该疾病发展的理解。区分MAFLD 和代谢性脂肪性肝炎(metabolic associated steatohepatitis, MASH) 是评估MAFLD 的关键一步, 有创诊断———肝活检作为“金标准” 具有侵入性、费用高的特点, 使之难以普及, 而无创诊断中影像诊断成本高, 故血清分子标志物的检测因其简单、便捷、经济等特点得到
快速发展。目前, MAFLD 分子标志物的开发和检测取得了很大进展, 但单一分子标志物不能高敏感和特异地区分MASH 和MAFLD, 结合多变量分子标志物的预测模型或影像学检测以及模型评分联用的方法使灵敏度和精确度大大提高, 能用于MAFLD 的初筛。文章重点综述了MAFLD 分子标志物的研究现状, 并对分子标志物的应用前景进行了展望。

【摘要】　气管插管、外部创伤、喉气管手术均会导致气道损伤, 产生组织细胞变性坏死、炎性细胞浸润, 继而引发纤维组织增生修复, 表现为黏膜增厚、胶原沉积和骨软骨膜炎, 最终形成喉气管狭窄, 严重者发生呼吸困难。近年来, 对Wnt 信号通路的研究取得了诸多实质性进展, 许多研究表明, 该信号通路与气道损伤及修复有重要关联。文章对Wnt 信号转导通路在气管损伤与修复方面的作用机制的研究进展进行总结, 这将有助于我们对气道损伤、气道重塑过程的进一步认识, 并为气道损伤的针对性治疗提供新思路与新方向。