医学分子生物学杂志

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1. 神经胶质瘤 U251 细胞中 TRIM21 和 TRIM8 之间相互作用研究 #br#

王琳∗ , 刘雪梅∗ , 李慧, 黄皑雪, 赵越超, 肖参, 高波, 邵宁生

医学分子生物学杂志 2024, 21 (3): 187-195. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.001

摘要（1008）

PDF （4634KB）（409）

目的探讨 TRIM21 和 TRIM8 在神经胶质瘤 U251 细胞中的相互作用机制及其生物学效应。方法在 U251 细胞中分别过表达和敲低 TRIM21 或 TRIM8, 通过蛋白质印迹和 RT-PCR 法检测两者的蛋白和mRNA 表达水平。利用免疫荧光实验分析 TRIM21 和 TRIM8 的亚细胞定位。通过免疫共沉淀实验验证TRIM21 和 TRIM8 之间的相互作用。应用胞内泛素化实验检测 TRIM21 和 TRIM8 的泛素化修饰。蛋白酶体抑制剂 MG-132 用于抑制蛋白酶体活性。利用流式细胞术检测 U251 细胞凋亡。结果在 U251 细胞中, TRIM21 负向调控 TRIM8 蛋白水平, 反之, TRIM8 也可以负向调控 TRIM21 蛋白水平, 并且都能抑制细胞凋亡。机制研究显示, U251 细胞中 TRIM21 和 TRIM8 之间存在相互结合, 两者相互调控是通过催化泛素化介导的泛素-蛋白酶体依赖性降解途径实现的。结论 U251 细胞中 TRIM21 与 TRIM8 可以通过泛素化修饰促进泛素-蛋白酶体依赖性的蛋白质降解相互负向调控, 提示体内细胞正常生长分化需要 TRIM21-TRIM8 之间蛋白质水平的相对稳态, 也即可能存在 E3 泛素连接酶蛋白稳态, 稳态失衡可能与肿瘤的发生发展密切相关。

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2. 肺动脉高压大鼠模型中 PKM2 Neddylation 修饰促进右心室纤维化的研究 #br#

郭文昀, 王丽霞, 王金琳

医学分子生物学杂志 2024, 21 (2): 108-114. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.003

摘要（888）

PDF （3637KB）（1118）

目的探究 PKM2 拟素化 (neddylation) 修饰对肺动脉高压大鼠右心室纤维化的影响。方法将SD 大鼠随机分为对照组、模型组和 MLN4924 组, HE 染色法检测肺动脉, Masson 染色检测右心室纤维化程度。提取大鼠原代心脏成纤维细胞, 免疫荧光法检测 α-平滑肌肌动蛋白 ( α-SMA) 表达, 使用 si-NC、 siPKM2、 pcDNA3. 1-PKM2 转染原代心脏成纤维细胞后, 蛋白质免疫印迹法检测 PKM2 及纤维化相关Ⅰ 型胶原蛋白 (Collagen Ⅰ )、 Ⅲ 型胶原蛋白 ( Collagen Ⅲ )、基质金属蛋白酶 2 ( MMP2)、基质金属蛋白酶 9(MMP9) 等蛋白水平。蛋白质免疫共沉淀法检测 PKM2 neddylation 修饰。实时荧光定量 PCR 法检测大鼠心脏组织中 PKM2 的 mRNA 表达水平。蛋白质免疫印迹法检测 PKM2 蛋白质降解时间。结果 HE 染色结果显示, 模型组肺小动脉 (纤维层) 和内膜 (内转运蛋白) 之间的距离显著加宽, 中间层的厚度增加, Masson染色显示, 与对照组相比, 模型组显示更多的胶原沉积, 纤维化更严重的。模型组的 PKM2 蛋白表达水平高于对照组, 而 mRNA 水平无显著性差异。 PKM2 在大鼠肺动脉高压模型中右心室组织存在 neddylation 修饰。在心脏成纤维细胞中敲低 Nedd8 或用 MLN4924 抑制 neddylation 修饰可下调 PKM2 及纤维化相关蛋白Collagen Ⅰ 、 Collagen Ⅲ 、 MMP2、 MMP9 等蛋白水平, 促进 PKM2 蛋白质降解速率 [ (3. 03 ± 0. 23) ~(11. 97 ± 0. 66) h, t = - 12. 82, P< 0. 001, 过表达 Nedd8 则提高 PKM2 蛋白表达。 MLN4924 组大鼠右心室纤维化程度及 α-SMA 蛋白表达水平低于模型组。结论在肺动脉高压大鼠模型中, neddylation 修饰增强了PKM2 的蛋白质稳定性进而促进右心室纤维化过程。

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3. 星形胶质细胞在蛛网膜下腔出血中的作用研究进展 #br#

岁晨, 孙新刚

医学分子生物学杂志 2025, 22 (1): 91-96. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2025.01.014

摘要（874）

PDF （719KB）（202）

蛛网膜下腔出血 ( subarachnoid hemorrhage, SAH) 是具有高致残率和高死亡率的一种脑血管疾病。星形胶质细胞在 SAH 后的脑损伤和恢复中起着至关重要的作用。文章对 SAH 基本概念、 SAH 后星形胶质细胞的活化和极化、星形胶质细胞参与和介导 SAH 后的早期脑损伤及迟发性脑缺血等环节以及星形胶质细胞在 SAH 后与其他脑细胞 (如神经元、小胶质细胞和血管内皮细胞) 进行大量串扰的情况进行了综述。此外, 文章还总结了 SAH 后关于调节星形胶质细胞功能的相关靶点及治疗方法, 为减轻 SAH 的严重后果及未来的转化疗法提供了一些新的策略。

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4. 五味子木脂素改善睡眠剥夺模型大鼠神经细胞凋亡和线粒体损伤 #br#

赵艺, 李华, 胡霞, 常海霞

医学分子生物学杂志 2025, 22 (5): 423-429. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2025.05.002

摘要（712）

PDF （5850KB）（46）

目的探究五味子木脂素 ( Schisandra chinensis lignans, SCL) 改善睡眠剥夺 ( sleep deprivation,SD) 模型大鼠神经细胞凋亡和线粒体损伤的作用及机制。方法将 48 只大鼠分为对照 ( Control) 组、睡眠剥夺模型 (SD) 组、莫达非尼 (modafinil, MOD) 组 (阳性对照) 和不同浓度 SCL 治疗组。 Morris 水迷宫和 Y 迷宫实验分别检测各组大鼠的逃避潜伏期和行为正确率, HE 染色检测大鼠海马组织病理损伤,TUNEL 染色检测细胞凋亡。 JC-1 染色和 ELISA 法分别检测各组大鼠脑组织或细胞线粒体膜电位 ( mitochondrial membrane potential, MMP) 水平和 ROS 水平。 ROS 诱导剂 2, 3-二甲氧基-1, 4-萘醌 (2, 3-dimethoxy- 1, 4-naphthoquinone, DMNQ) 刺激 HT-22 细胞建立体外神经细胞损伤模型。 CCK-8 检测细胞活力。蛋白质印迹检测细胞中 TLR4, MyD88 和 p-NF-κB P65 蛋白表达。结果与 Control 组相比较, SD 组大鼠的逃避潜伏期增加, 行为正确率降低; 接受 Mod 或 SCL 治疗的大鼠逃避潜伏期降低且行为正确率较 SD 组增加 (P均 < 0. 05)。此外, 与 Control 组比较, SD 组大鼠海马组织病理损伤明显, 细胞凋亡增加, MMP 水平降低且 ROS水平增加。 Mod 或 SCL 干预则改善了 SD 组大鼠的海马组织损伤和细胞凋亡, 减少了神经细胞线粒体损伤(P均 < 0. 05)。细胞实验结果显示, 与 Control 组比较, DMNQ 组 HT-22 细胞活力降低、凋亡增加、线粒体损伤和 ROS 水平增加。而 Mod 或 SCL 处理则显著改善了 DMNQ 导致的 HT-22 细胞损伤。此外, 与 Control组比较, DMNQ 组细胞中 TLR4、 MyD88 和 p-NF-κB P65 蛋白质表达升高, Mod 或 SCL 干预显著抑制 DMNQ处理的 HT-22 细胞中 TLR4、 MyD88 和 p-NF-κB P65 水平。结论 SCL 通过抑制 TLR4-MyD88-NF-κB 通路激活改善睡眠剥夺大鼠神经细胞凋亡和线粒体损伤。

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5. 脂质组学在肺癌研究中的应用进展 #br#

梁益, 俞万钧, 李佳维, 徐涛

医学分子生物学杂志 2024, 21 (4): 386-390. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.04.015

摘要（643）

PDF （802KB）（365）

近年来, 脂质组学逐渐在肺癌研究领域崭露头角, 为深入研究肺癌的发病机制和治疗策略提供了新的视野。医学技术的不断进步使得脂质组学在肺癌研究中扮演了越来越关键的角色。这不仅有助于肺癌的早期诊断和病情监测, 还能为个体化治疗提供更为精准的生物标志物和药效评价。文章重点讨论质谱技术和生物信息学等脂质组学的核心技术在肺癌研究中的应用, 并着重分析基于血清和组织样本的脂质组学研究在寻找肺癌特异性生物标志物和识别不同亚型差异方面的重要性。

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6. RIPK3 在 LPS / D-GalN 诱导急性肝衰竭中的作用研究 #br#

于倩, 边姝, 张钰婷, 赵赛, 刘亮明

医学分子生物学杂志 2024, 21 (3): 196-202. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.002

摘要（558）

PDF （3406KB）（198）

目的研究受体相互作用蛋白激酶 3 ( receptor-interacting protein kinases 3, RIPK3) 在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) / D-氨基半乳糖 ( D-galactosamine, D-GalN) 诱导的急性肝衰竭 ( acute liver failure, ALF) 中的作用。方法体内实验使用 SPF 级雄性 BALB / c 小鼠 15 只, 随机分为对照组 ( Control),模型组 (LPS / D-GalN), 抑制剂预处理组 ( GSK872 + LPS / D-GalN), 每组 5 只。 ALF 动物模型采用 LPS 联合 D-GalN 腹腔注射的方式制备。药物腹腔注射前1 h, 分别以0. 1 % DMSO 和 RIPK3 特异性拮抗剂 GSK872(溶于 0. 1 % DMSO) 尾静脉注射进行预处理。肝损伤程度采用血生化检测和肝脏组织学变化来评估; 基因mRNA 表达采用 PCR 检测, 蛋白表达采用蛋白质印迹和免疫组化分析。结果动物实验结果显示, 与正常对照组 (Control) 相比, 模型组 ( LPS / D-GalN) 小鼠肝组织见显著炎症出血坏死性损伤, 肝内 F4 / 80 + 细胞浸润增多, 血清 ALT 和 AST 水平明显升高 ( P均 < 0. 01)。同时, 肝组织 F4 / 80、 Mcp-1、 Tnf-α、 Il-6、Ripk3 和 Mlkl mRNA, 以及 RIPK3 蛋白和 p-MLKL / MLKL 蛋白比值均上调, 差异均存在统计学意义 ( P均 <0. 05)。与模型组相比, 预处理组 (GSK872 + LPS / D-GalN) 小鼠肝脏炎症损伤程度明显减轻, 肝内 F4 / 80 +细胞浸润明显减少, 且血清 ALT 和 AST 水平显著下降 ( P均 < 0. 01)。肝组织 F4 / 80、 Mcp-1、 Tnf-α、 Il-6、Ripk3 和 Mlkl mRNA, 以及 RIPK3 蛋白和 p-MLKL / MLKL 蛋白比值下调, 差异均有统计学意义 ( P均 <0. 05)。结论在 LPS / D-GalN 联合诱导的小鼠急性肝衰竭模型中, RIPK3 抑制剂的应用可能直接通过靶向肝细胞, 减少肝细胞的坏死性凋亡, 从而减少巨噬细胞浸润, 最终改善肝脏炎症状态。这提示 RIPK3 可能通过对肝细胞坏死性凋亡通路分子的影响促进 ALF 的发生和发展。

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7. GATA3 通过调控 LIFR 抑制人乳腺癌细胞的迁移能力 #br#

张璐, 张瑞, 刘俊, 杨安钢,

医学分子生物学杂志 2024, 21 (4): 293-299. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.04.001

摘要（494）

PDF （2983KB）（193）

目的探究 GATA 结合蛋白 3 (GATA binding protein 3, GATA3) 对乳腺癌细胞迁移能力的影响。方法在 MCF7 细胞中利用慢病毒载体介导的基因干涉技术敲低 GATA3 基因, 使用实时定量荧光 PCR (qRT-PCR) 和蛋白质印迹检测 GATA3 和 LIFR 的 mRNA 和蛋白表达水平, Transwell 实验检测 MCF7 细胞的迁移能力。在 MCF7 和 T47D 细胞中用染色质免疫沉淀 (ChIP-qPCR) 实验检测 GATA3 在 LIFR 的启动子区的结合位点。在敲低 GATA3 基因的 MCF7 细胞中回补 LIFR, 通过细胞划痕实验和 Transwell 实验检测 MCF7细胞的迁移能力。结果与对照组相比, 敲低 GATA3 基因的 MCF7 细胞的迁移能力增强 ( P_均 < 0. 05)。与对照组相比, 敲低 GATA3 基因的 MCF7 细胞的 LIFR 表达水平降低 ( P_均 < 0. 05)。乳腺癌细胞 MCF7 与T47D 中 GATA3 在 LIFR 的启动子区有结合 ( P_均 < 0. 05)。在敲低 GATA3 基因的 MCF7 细胞中稳定过表达LIFR 可以部分挽救 GATA3 基因敲低引起的细胞迁移能力的增强 ( P_均 < 0. 05)。结论 GATA3 通过转录激活 LIFR 抑制乳腺癌细胞 MCF7 的迁移。

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8. 幽门螺杆菌毒力因子 CagA 的基因表达调控机制研究进展 #br#

王萌萌, 余梦超, 王莉莉, 赵振宇, 董全江

医学分子生物学杂志 2024, 21 (2): 171-175. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.013

摘要（377）

PDF （747KB）（996）

全球约有一半人口感染了幽门螺杆菌 ( Helicobacter pylori, H. pylori), 特别是发展中国家的感染率极高。目前, 幽门螺杆菌感染已被列为胃癌发生的高危因素。幽门螺杆菌感染的致病机制被认为与环境因素、宿主易感性和细菌毒力等因素之间复杂的相互作用有关。文章主要对幽门螺杆菌毒力因子细胞毒素相关基因 (cytotoxin-associated gene A, cagA) 表达调控的分子机制进行综述, 以便更好地理解 cagA 的致病性, 为今后预防和治疗由幽门螺杆菌所引起的疾病提供理论参考。

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9. 血浆 SPARC 介导的外周血嗜酸性粒细胞在胃癌中的作用:基于多变量孟德尔随机化研究和中介分析 #br#

韩政轩, 杨朝纲, 熊浩, 熊斌,

医学分子生物学杂志 2024, 21 (2): 100-107. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.002

摘要（367）

PDF （3622KB）（572）

目的外周血免疫细胞计数与胃癌的发生发展以及胃癌患者的预后之间的联系往往易受到反向因果关系和混杂因素的影响, 研究旨在运用孟德尔随机化分析排除相关偏倚, 阐明外周免疫细胞计数和胃癌的因果关系。方法主要采用单因素和多因素孟德尔随机化的方法, 利用全基因组关联研究 ( genomewide association study, GWAS) 数据, 探究外周血中各免疫细胞亚型与胃癌发生风险之间的因果关系。将白细胞、粒细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞计数作为暴露因素, 选用逆方差加权法作为单变量孟德尔随机化分析的主要方法。随后进行了两步法中介分析, 探究血浆蛋白可能起到的作用。结果淋巴细胞 (OR = 1. 094, 95 % CI: 1. 009 ~ 1. 185, P = 0. 029)、嗜酸性粒细胞 (OR = 0. 881, 95 % CI: 0. 813 ~ 0. 955, P = 0. 002) 与胃癌之间存在因果关系, 敏感性分析进一步证实了此结果的可靠性。而嗜酸性粒细胞降低胃癌发生风险之间的关联在多变量孟德尔随机化分析中仍然显著 ( OR = 0. 807, 95 % CI: 0. 671 ~ 0. 970, P = 0. 023), 反向因果关系不显著。酸性富含半胱氨酸分泌蛋白 ( secreted protein acidic and rich in cysteine, SPARC) 是一种细胞外基质蛋白, 参与多种细胞-基质相互作用和细胞信号转导途径, 在肿瘤发展中发挥重要作用。对 1 124 种血浆蛋白进行中介分析, 结果提示血浆 SPARC 可能介导了嗜酸性粒细胞对胃癌的保护作用 (Beta = - 0. 030, 95 % CI: - 0. 072 ~ 0. 000, P = 0. 024)。结论孟德尔随机化分析证明嗜酸性粒细胞计数是降低胃癌发病率的独立因素, 血浆 SPARC 在此过程中起中介作用, 外周嗜酸性粒细胞计数和外周血 SPARC 有潜力成为胃癌发生的早期临床指标和治疗靶点, 孟德尔随机化的方法还有效地避免了反向因果关系和社会心理等因素造成的偏倚, 但是未来仍需要更多的研究来证明其内部的生物学机制。

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10. 血清 Asprosin 水平与老年 2 型糖尿病肾病的相关性分析 #br#

刘田, 范静静, 陈梦楠, 郭梦圆, 卢海龙

医学分子生物学杂志 2024, 21 (2): 124-128. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.005

摘要（354）

PDF （920KB）（221）

目的分析血清白脂素 (Asprosin) 水平与老年 2 型糖尿病肾病 ( diabetic nephropathy, DN) 的相关性, 为临床上寻找新的 DN 早期标志物提供线索。方法选取 2021 年 8 月至 2022 年 3 月徐州医科大学附属医院收治的老年 2 型糖尿病 ( type 2 diabetes, T2DM) 患者 183 例纳入研究, 根据患者是否合并 DN,将其分为单纯 T2DM 组 (85 例) 及合并 DN 组 (98 例)。另选取体检健康者 50 例纳入对照组, 检测各组血清 Asprosin 水平, 分析 Asprosin 对早期 DN 的诊断效能。结果与对照组比较, T2DM 组及合并 DN 组 Asprosin 水平明显较高 [ (1. 15 ± 0. 23)、 (1. 64 ± 0. 41)、 (2. 45 ± 0. 52)] ng / mL, 且合并 DN 组高于 T2DM 组(P< 0. 05); Asprosin 与 BUN、 Cr、 UA、 HbA1c、 FINS、 HOMA-IR、 UAER 均呈正相关 (P< 0. 05); Asprosin、 HbA1c 及 UAER 是影响 DN 发生的危险因素 (P< 0. 05); Asprosin 联合 UAER 诊断 DN 的曲线下面积为0. 879 (95 % CI: 0. 813 ~ 0. 974, P ﹤ 0. 05), 诊断特异度为 84. 19 % , 敏感度为 94. 57 % 。结论老年 DN患者血清 Asprosin 水平表达较高, 可能是 T2DM 患者合并肾病的早期诊断标志物。

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11. CC 类趋化因子受体 2、 Th1 / Th2 细胞在 IgA 肾病大鼠肾间质纤维化中的表达及意义 #br#

朱建萍, 何玲慧, 向勇

医学分子生物学杂志 2024, 21 (5): 458-463. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.05.011

摘要（345）

PDF （4061KB）（164）

目的检测 IgA 肾病大鼠肾间质纤维化中 CC 类趋化因子受体 2 ( C-C motif chemokine receptor 2,CCR2) 的表达和辅助性 T 细胞 1 / 2 (helper T cell 1 / 2, Th1 / Th2) 的含量, 并观察其在肾脏纤维化中的作用。方法 40 只 SD 雄性大鼠, 随机分为模型组和对照组, 每组 20 只。采用脂多糖 + 改良牛血清白蛋白 +四氯化碳法构建免疫球蛋白 A (IgA) 肾病模型。观察大鼠肾组织病理改变和 IgA 沉淀, 计算胶原纤维占肾组织百分比, 采用 Katafuchi 评分标准评估肾小管间质损伤程度。蛋白质印迹测定肾组织 CCR2 水平。双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-4 ( IL-4) 和干扰素-γ ( IFN-γ) 水平。流式细胞术检测 Th1 / Th2 细胞比例。结果模型组大鼠肾组织胶原纤维面积百分比和 Katafuchi 评分显著高于对照组 (P< 0. 05);模型组大鼠肾组织 CCR2、血清 IL-4 水平、 Th2 细胞含量及 IL-4 / IFN-γ 比值显著高于对照组, 血清 IFN-γ 水平、 Th1 细胞含量显著低于对照组 ( P< 0. 05); CCR2 和 IL-4 水平及 IL-4 / IFN-γ 比值与胶原纤维面积百分比、 Katafuchi 评分呈正相关 (P< 0. 05); IFN-γ 水平与胶原纤维面积百分比、 Katafuchi 评分呈负相关 ( P< 0. 05)。结论 CCR2 和 Th1 / Th2 失衡参与 IgA 肾病大鼠肾间质纤维化发生和发展, 拮抗 CCR2 和调节 Th1 / Th2 平衡有可能减轻 IgA 肾病大鼠肾脏纤维化改变。

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12. GSK484 抑制强直性脊柱炎中中性粒细胞胞外诱捕网形成和炎症反应 #br#

李儒琳, 杜壮文, 王恩梁

医学分子生物学杂志 2024, 21 (3): 264-269. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.012

摘要（342）

PDF （2104KB）（761）

目的探究 GSK484 对强直性脊柱炎 (ankylosing spondylitis, AS) 中性粒细胞胞外诱捕网 ( neutrophil extracellular traps, NETs) 形成和炎症反应的作用及其相关机制。方法检测 AS 患者和健康受试者外周血 PAD4、 H3cit、 IL-1β、 IL-6 水平和 NETs 形成差异。将 30 只 Balb / c 小鼠分为: 对照组、模型组、GSK484 给药组。模型组、 GSK484 给药组进行 AS 造模, GSK484 给药组造模后连续一周灌胃 4 mg / kg GSK484, 其余组灌胃同体积生理盐水。结束后比较各组小鼠踝关节损伤评分, NETs 水平和 PAD4、 H3cit、IL-6、 IFN-γ 水平。结果与健康受试者比较, AS 患者外周血 PAD4、 H3cit、 IL-1β、 IL-6 水平升高, NETs 形成和 IL-1β、 IL-6 水平升高。与模型组比较, GSK484 给药组小鼠踝关节损伤评分、 NETs 形成和 PAD4、 H3cit、IL-1β、 IL-6 水平降低。结论 GSK484 可抑制 NETs 形成, 为缓解 AS 炎症反应提供了新的治疗策略。

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13. 紫檀芪在舌鳞癌 CAL-27 细胞中的抗肿瘤作用研究 #br#

戴骁焱, 王岩松, 戴娟, 翟妍

医学分子生物学杂志 2024, 21 (6): 515-520. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.06.003

摘要（339）

PDF （4441KB）（654）

目的探讨紫檀芪对人舌鳞癌 CAL-27 细胞生物学行为的影响。方法将 CAL-27 细胞分为对照组和实验组, 实验组用紫檀芪 10、 20、 40 μmol / L 进行处理。 CCK-8 法、克隆形成实验和 EdU 检测不同浓度紫檀芪对 CAL-27 细胞增殖的影响; 流式细胞术检测 CAL-27 细胞凋亡情况; 划痕实验和穿孔实验实验观察 CAL-27 细胞的迁移和侵袭能力; 蛋白质印迹检测 CAL-27 细胞内上皮间质转化 ( epithelial-mesenchymal transition, EMT) 相关蛋白的表达。异种移植瘤验证紫檀芪对体内肿瘤的作用。结果与对照组比较, 紫檀芪 20 和 40 μmol / L 处理 24 h 后 CAL-27 细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱, 细胞凋亡率增加, 细胞内 Bax、E-cadherin 和 Claudin1 蛋白表达量增加, Bcl-2、 N-cadherin、波形蛋白和 Snail 蛋白的表达量减少 ( P < 0. 05)。紫檀芪 30 mg / kg 治疗后裸鼠体内移植肿瘤重量和体积明显减小, Ki67 和波形蛋白阳性细胞数明显减少, TUNEL 阳性细胞数明显增加 ( P< 0. 05)。结论紫檀芪能抑制 CAL-27 细胞增殖、迁移、侵袭和EMT, 同时诱导其凋亡。

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14. 胰管注射 AAV8-gRNA 实现胰岛 β 细胞 Adra2a 基因编辑 #br#

张欣, 汪欣欣, 吕婷婷, 韩晓, 朱云霞

医学分子生物学杂志 2025, 22 (4): 305-310. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2025.04.001

摘要（328）

PDF （6060KB）（116）

目的旨在利用 CRISPR / Cas9 系统通过腺相关病毒 8 型 ( adeno-associated virus serotype 8,AAV8) 携带靶向 Adra2a 基因的向导 RNA (guide RNA, gRNA) 实现胰岛 β 细胞特异性基因敲除。方法本研究采用 RIP2 (rat insulin Ⅱ promoter) -Cre; Cas9KI / + 小鼠模型, 其中 RIP2 启动子驱动 Cre 重组酶在胰腺 β 细胞中特异性表达, 进而激活 Cas9 酶的表达, 实现 Cas9 在 β 细胞内的特异性表达。为实现 Adra2a基因的高效编辑, 使用免疫原性较低的腺相关病毒 ( adeno-associated virus, AAV) 作为递送载体, 通过胰腺导管注射携带针对 Adra2a 基因的 gRNA 的 AAV8 病毒颗粒, 从而在 β 细胞中实现对目标基因的特异性敲除。结果通过胰腺导管注射技术成功地在小鼠胰岛中实现了 Cas9 系统介导的靶基因破坏。通过组织切片观察, 确认了胰腺注射后 GFP 标记的成功表达, 且未见肝脏和脾脏有 GFP 信号, 表明病毒通过胰管注射效果良好。通过 PCR 分析, 胰岛样本中成功检测到 Cas9 介导的靶基因破坏, 且 Adra2a 蛋白水平在实验组小鼠胰岛中显著下调。结论通过胰腺导管注射携带 gRNA 的腺相关病毒到 RIP2-Cre; Cas9KI / + 小鼠, 可以实现胰岛 β 细胞特异性基因敲除, 为未来胰岛基因功能研究提供了有效的技术支持。

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15. TLR2 介导小胶质细胞激活和神经炎症促进血管性痴呆进展的分子机制研究 #br#

孙洋子, 伍贞宇, 曾超胜, 游咏

医学分子生物学杂志 2024, 21 (4): 315-322. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.04.004

摘要（325）

PDF （2129KB）（233）

目的探讨 TLR2 是否在血管性痴呆 (vascular dementia, VaD) 中参与介导小胶质细胞的病理性激活和神经损伤及其分子机制。方法体外实验使用 LPS-诱导激活人小胶质细胞系 HMC3 细胞。 CCK-8 法测定 HMC3 细胞增殖能力。构建腺病毒 Adv-TLR2 shRNA 和 Adv-shRNA NT 载体并介导全身性敲低 TLR2。通过永久性双侧颈总动脉闭塞 (2VO) 建立 VaD 大鼠模型。蛋白质印迹法测定 HMC3 细胞和大鼠脑白质组织中 TLR2、 NF-κB、 Iba-1、 Claudin-5 和 ZO-1 的表达水平。 ELISA 法测定大鼠脑白质组织中炎症因子 IL-6、IL-1β 和 TNF-α 的水平以及铁死亡相关指标 Fe2 + 离子、丙二醛 ( MDA) 和谷胱甘肽 ( GSH) 的水平。 Morris 水迷宫测试大鼠脑神经损伤。结果体外细胞实验, 与对照组相比, 脂多糖组细胞内 TLR2、 NF-κB 和Iba-1 表达水平增强 (P< 0. 05); 与脂多糖组相比, 腺病毒-TLR2 shRNA 敲低组逆转了上述指标的表达水平(P< 0. 05)。在体大鼠模型实验, 与假手术组相比, 模型组大鼠脑白质组织中 TLR2 / NF-κB 和 Iba-1 表达水平上调, Claudin-5 和 ZO-1 的表达水平降低 ( P < 0. 05); 炎症因子 IL-6、 IL-1β 和 TNF-α 水平上调 ( P < 0. 05); Fe2 + 离子和 MDA 水平升高, GSH 水平降低 ( P< 0. 05); 与模型组相比, 模型 + 腺病毒-TLR2 shRNA 敲低组逆转了上述指标的水平 (P< 0. 05)。 Morris 水迷宫测试, 与假手术组相比, 模型组和模型 + 腺病毒-TLR2 shRNA 敲低组大鼠找到目标象限 (左上象限) 所用时长较长 (P< 0. 05), 停留在目标象限 (左上象限) 的时间百分比 (% ) 缩短 (P< 0. 05), 大鼠在 MWM 中 4 个象限的游泳路线分布较为均匀; 与模型组相比, 模型 + 腺病毒-TLR2 shRNA 敲低组逆转了上述指标并且在 MWM 中目标象限 (左上象限) 的游泳路线分布较为密集。结论敲低 TLR2 可抑制小胶质细胞的激活及其介导的紧密连接蛋白降解和脑血管屏障网络渗漏, 降低血管性痴呆大鼠模型的神经损伤。

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16. 全反式维甲酸减轻内质网应激反应改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化与心肌重构 #br#

魏俊萍, 孟庆雯, 林道飞, 林燕仔, 符达佳

医学分子生物学杂志 2024, 21 (3): 203-210. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.003

摘要（323）

PDF （4148KB）（238）

目的全反式维甲酸 (all-trans retinoic acid, ATRA) 对异丙肾上腺素 ( isoprenaline, ISO) 诱导下大鼠心肌纤维化和心肌重构的影响及作用机制。方法将大鼠按随机数表法分为 4 组: 对照组、 ISO 组、ATRA + ISO 组、 4-PBA (4-苯基丁酸, 4-phenylbutyric acid) + ISO 组, 每组 10 只; ATRA + ISO 组和 4-PBA + ISO 组预先分别通过腹腔注射 ATRA 与 4-PBA, 然后再通过背部皮下注射 ISO 进行诱导。心脏超声检测各组大鼠左心室舒张末期内径 (left ventricular internal diameter in diastole, LVIDd)、左心室收缩末期内径 ( left ventricular internal diameter in systole, LVIDs)、左心室的射血分数 ( ejection fraction, EF) 及短轴缩短率(fractional shortening, FS), 称量各组大鼠体重、全心质量及左心室质量, 计算全心质量指数 ( heart mass index, HMI) 与左心室质量指数 (left ventricle mass index, LVMI)。 ELISA 测定各组大鼠血清 N 端 B 型利钠肽原 (N terminal pro B type natriuretic peptide, NT-proBNP) 含量。 HE 染色和 Masson 染色观察各组大鼠心肌组织病理学变化与胶原纤维化程度。蛋白质印迹检测心肌组织中 G 蛋白偶联受体 78 ( glucose-regulated protein 78, GRP78)、 C / EBP 同源蛋白 (C / EBP homology protein, CHOP)、蛋白激酶 R 样内质网激酶 ( protein kinase R-like ER kinase, PERK)、磷酸化真核翻译起始因子 2α (phosphorylated eukaryotic translation initiation factor 2α, p-eIF2α)、转化生长因子-β1 ( transforming growth factor-β1, TGF-β1)、 α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、胶原蛋白 Collagen-Ⅰ 及 Collagen-Ⅲ 的蛋白表达。结果与对照组比较, ISO 组大鼠 EF 和 FS 显著降低 ( P< 0. 05), LVIDd、 LVIDs、 HMI 及 LVMI 显著升高 ( P< 0. 05), 血清 NTproBNP 含量显著增加 (P< 0. 05), 心肌组织病理损伤明显, 胶原纤维面积显著增加 ( P< 0. 05), 心肌组织中 GRP78、 CHOP、 PERK、 p-eIF2α、 TGF-β1、 α-SMA、 Collagen-Ⅰ 及 Collagen-Ⅲ 蛋白表达均显著上调 ( P< 0. 05); 与 ISO 组比较, ATRA + ISO 组和 4-PBA + ISO 组的大鼠 EF 和 FS 显著升高 ( P < 0. 05), LVIDd、LVIDs、 HMI 及 LVMI 显著降低 (P< 0. 05), 血清 NT-proBNP 含量显著减少 (P< 0. 05), 心肌组织损伤程度明显减轻, 胶原纤维面积显著减小 (P< 0. 05), 心肌组织中 GRP78、 CHOP、 PERK、 p-eIF2α、 TGF-β1、 α- SMA、 Collagen-Ⅰ 及 Collagen-Ⅲ 蛋白表达均显著下调 (P< 0. 05)。结论 ATRA 能够减轻 ISO 诱导的大鼠心肌损伤及其纤维化, 抑制心肌重构, 改善心功能, 该作用与其抑制内质网应激反应有关。

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17. 高葡萄糖诱导的氧化应激和炎症反应介导髓核细胞的凋亡和细胞外基质代谢失衡 #br#

郭晓燕, 曹胜, 王玲玲, 徐昆, 杨佳琦, 杨雪, 王晶

医学分子生物学杂志 2025, 22 (1): 48-54. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2025.01.008

摘要（315）

PDF （2204KB）（321）

目的探讨高浓度葡萄糖处理对大鼠髓核细胞 (nucleus pulposus cells, NPC) 凋亡和细胞外基质(extracellular matrix, ECM) 代谢的影响, 并初步探讨可能的潜在机制。方法从雄性 Wistar 大鼠腰椎组织中分离 NPC。将 NPC 分为 6 组: 对照组, 葡萄糖 5、 15、 25 mmol / L 组, 葡萄糖 + NAC 组 (25 mmol / L 葡萄糖 + 3 mmol / L 抗氧化剂 NAC), 葡萄糖 + PDTC 组 (25 mmol / L 葡萄糖 + 10 μmol / L NF-κB 通路抑制剂PDTC)。分别采用 CCK-8、流式细胞术检测细胞活力和凋亡。采用荧光探针检测细胞内活性氧 (reactive oxygen species, ROS) 水平。酶联免疫吸附法用于检测 IL-1β、 IL-6 和肿瘤坏死因子 α ( TNF-α) 水平。蛋白质印迹检测相关蛋白表达。结果与对照组比较, 5 mmol / L 葡萄糖组和 15 mmol / L 葡萄糖组的细胞活力和凋亡无明显变化, 而25 mmol / L 葡萄糖组细胞活力明显降低、细胞凋亡明显增加 (P< 0. 05)。与25 mmol / L葡萄糖组比较, 葡萄糖 + NAC 组和葡萄糖 + PDTC 组 Bcl-2 关联 X 蛋白 ( Bcl-2-associated X protein, Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 ( Caspase-3)、基质金属蛋白酶 MMP-3、 MMP-9、 MMP-13、金属蛋白酶 ADAMTS (A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs) -4 和 ADAMTS-5 表达均明显降低, 而Bcl-2 蛋白、 Ⅱ 型胶原蛋白 (collagenⅡ , COLⅡ ) 和聚集蛋白聚糖 ( aggrecan) 表达均明显升高(P< 0. 05)。与 25 mmol / L 葡萄糖组比较, 葡萄糖 + NAC 组和葡萄糖 + PDTC 组细胞内 ROS 水平和上清液中 IL-1β、 IL- 6、 TNF-α 水平均明显降低 (P< 0. 05)。与 25 mmol / L 葡萄糖组比较, 葡萄糖 + NAC 组和葡萄糖 + PDTC 组细胞 p-P65 / P65 和 p-IκBα / IκBα 水平均明显降低 (P< 0. 05)。结论高葡萄糖处理可通过诱导氧化应激和炎症反应促进 NPC 的凋亡和 ECM 降解, 这一过程涉及其对 ROS / NF-κB 信号通路的激活。

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18. Fam172a 基因敲除活化 ERK 通路加重肝细胞脂毒性损伤的研究 #br#

李梦绮, 韦何锐, 罗婧, 安稳, 宋阿倩, 何玲玲, 杨君茹, 魏红山, #, 肖凡, #

医学分子生物学杂志 2024, 21 (6): 501-507. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.06.001

摘要（305）

PDF （2261KB）（319）

目的初步探讨 Fam172a 基因敲除加重脂毒性肝细胞损伤的作用机制。方法利用 Fam172a 基因敲除 (Fam172a - / - ) 小鼠, 检测肝功能、肝组织脂质堆积和炎症细胞因子水平。利用 Fam172a 基因敲减的 HepG2 细胞系, 检测细胞内脂质堆积和炎症细胞因子水平。蛋白质印迹检测蛋白质水平。结果与对照组相比, Fam172a - / - 小鼠血浆 ALT 和 AST 水平明显升高; 肝脏结构损伤、脂质堆积和炎症加重; pERK / ERK 相对表达水平显著上调。 Fam172a 基因敲减后, HepG2 细胞内甘油三酯含量和炎症细胞因子水平增加,且 pERK / ERK 相对表达水平也显著升高。然而, 应用 ERK 抑制剂后可明显减轻 Fam172a 基因敲减造成的脂毒性肝细胞损伤。结论 Fam172a 基因敲除可通过活化 ERK 加重肝细胞脂毒性。

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19. 白藜芦醇抑制肾纤维化减轻单侧输尿管梗阻诱导的肾损伤 #br#

詹宏义, 宋亚玲, 贺绍林, 周杨洋

医学分子生物学杂志 2024, 21 (2): 146-153. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.009

摘要（302）

PDF （5013KB）（355）

目的研究白藜芦醇抑制肾纤维化对单侧输尿管梗阻诱导的肾损伤的减轻作用及相关机制。方法以 Sprague-Dawley (SD) 大鼠和成纤维细胞 NRK-49F 为实验对象, 分别进行体内研究和体外验证, 体内: SD 大鼠行单侧输尿管梗阻诱导建立 TIF 大鼠模型, 将大鼠随机分为 4 组 (假手术 + 空白组、假手术 +白藜芦醇组、模型 + 空白组和模型 + 白藜芦醇组), 每组 12 只大鼠。体外: 将 NRK-49F 细胞用重组 TGF- β1 (5 ng / mL) 或白藜芦醇 (10 和 100 μmol / L) 处理后随机分为 4 组 (对照组、 TGF-β1 组、 TGF-β1 + 白藜芦醇低剂量组和 TGF-β1 + 白藜芦醇高剂量组)。 Masson’ s 染色检测肾脏中总胶原蛋白沉积; 免疫组织化学染色检测组织中 E-cadherin、 GFAP 和 Ki67 阳性细胞的表达; 免疫荧光染色检测细胞中 Ki67 阳性细胞的表达; 蛋白质印迹检测组织中 E-cadherin、 Vimentin、 N-cadherin、 Rac1、 c-Myc、 Bcl-2、 Cyclin D1、 α-SMA、Ⅰ 型胶原和Ⅲ 型胶原的表达。结果与对照组比较, 白藜芦醇可以抑制大鼠体内单侧输尿管梗阻 ( unilateral ureteral obstruction, UUO) 肾脏中总胶原蛋白的过度沉积, 下调 α-SMA 阳性成肌纤维细胞减少波形蛋白、Ⅰ 型和Ⅲ 型胶原, 抑制 Rac1、 GFAP 和 N-cadherin 的上调以及 E-cadherin 的下调; 与假手术组比较, 白藜芦醇可显著降低 UUO 大鼠中 Ki67 阳性细胞比率, 并抑制 c-Myc, Bcl-2 和 cyclin D1 的表达; 白藜芦醇抑制体内增殖相关途径 Wnt / β-catenin 的激活; 体外实验表明白藜芦醇治疗可减少成纤维细胞和 TECs 的增殖, 从

而抑制 TGF-β1 介导的表型转化和 ECM 积累。结论成肌纤维细胞的积累, 并减轻了肾小管间质纤维化。

白藜芦醇通过抑制 Wnt / β-catenin 通路的活性, 抑制

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20. KCNQ1 通道结构及功能研究进展 #br#

刘宏瑜, 谢金燕,

医学分子生物学杂志 2024, 21 (5): 487-491. doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.05.016

摘要（293）

PDF （689KB）（527）

KCNQ1 通道是电压门控钾通道 α 亚单位, 它和 KCNE 家族蛋白组装形成功能性钾通道。 KCNQ1

通道的结构和功能变化影响体内多种疾病的病理生理过程。综述从 KCNQ1 基本结构及其在多种分子生物学过程中的作用, 特别是 KCNQ1 与 KCNE 家族或非 KCNE 家族之间的相互作用等角度对 KCNQ1 通道的结构功能和生物物理学方面的研究进展进行了系统的总结。

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