医学分子生物学杂志 ›› 2022, Vol. 19 ›› Issue (1): 1-9.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2022.01.001
• 论著 • 下一篇
摘要: 目的 制备融合 IL2 的慢病毒以提高对人原代 T 淋巴细胞的转导效率。 方法 将白细胞介素-2 (IL2) 基因定向克隆至水疱性口炎病毒 G 蛋白 (VSV-G) 编码基因 5′端, 构建新型慢病毒包装辅助质粒 pMD2.IL2-G。 使用不同剂量 pMD2.IL2-G 进行慢病毒包装, 应用免疫印迹和 ELISA 比较病毒滴度, 流式细胞 术检测病毒对 T 细胞的转导效率。 结果 单独使用 pMD2.IL2-G 显著降低病毒得率。 与传统慢病毒相比, pMD2.IL2-G 与原始辅助质粒 pMD2.G 以 1∶4 混合制备的慢病毒, 能够显著提高 EGFP 基因导入 T 细胞的效率 (89. 2 % vs. 40. 2 % ), 且病毒得率相当。 结论 融合 IL2 的慢病毒能够对 T 细胞进行高效的基因转导, 为 基因修饰 T 细胞的临床应用提供有力支持。
中图分类号: