医学分子生物学杂志 ›› 2024, Vol. 21 ›› Issue (3): 239-246.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.03.008
摘要: 目的 探究 miR-592 靶向调控 PR 结构域锌指蛋白 5 ( PR domain zinc finger protein 5, PRDM5)影响肾细胞癌 (renal cell carcinoma, RCC) 侵袭转移及自噬的机制。 方法 RT-qPCR、 蛋白质印迹检测RCC 组织和细胞中 miR-592、 PRDM5 mRNA 和蛋白水平。 A498、 786-O 细胞分为 anti-miR-NC 组、 anti-miR- 592 组、 anti-miR-592 + si-NC 组、 anti-miR-592 + si-PRDM5 组。 RNA 免疫共沉淀 ( RIP) 检测 miR-592 和PRDM5 的结合; CCK-8、 Transwell 实验检测细胞增殖、 迁移和侵袭能力; 透射电镜观察自噬小体形成; 蛋白质印迹检测细胞 PRDM5、 基质金属蛋白酶 (MMP) -2、 MMP-9、 Beclin1、 微管相关蛋白 1 轻链 3 ( LC3)Ⅱ / Ⅰ 水平。 建立移植瘤裸鼠模型, 分析敲低 miR-592 表达对移植瘤生长的影响。 结果 RCC 组织和细胞中PRDM5 mRNA 和蛋白水平降低, miR-592 水平增加 (P< 0. 05)。 敲低 miR-592 表达后, 细胞 A450 nm、 迁移和侵袭细胞数、 MMP-2、 MMP-9 水平降低, 自噬小体数量、 Beclin1、 LC3Ⅱ / Ⅰ 水平增加 ( P < 0. 05)。 敲低PRDM5 表达能部分逆转敲低 miR-592 对细胞增殖、 侵袭及自噬的影响 ( P< 0. 05)。 敲低 miR-592 表达能够抑制裸鼠移植瘤生长 (P< 0. 05)。 结论 miR-592 通过靶向抑制 PRDM5 表达, 促进 RCC 细胞增殖、 侵袭转移能力, 并抑制自噬能力。
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