医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (6): 506-511.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.007
摘要: 目的 探讨长链非编码 RNA ( long non-coding RNA, LncRNA) 核富集转录本 1 ( nuclear-enriched abundant transcript 1, Neat1) 调控微小 RNA miR-22-3p 对脂多糖 (lipopolysaccharide, LPS) 诱导的人牙龈成纤维细胞 (human gingival fibroblasts, HGFs) 生物学活性的影响。 方法 取对数生长期的 HGFs 细胞分为对照组、 LPS 组、 si-NC 组、 si-Neat1 组、 si-Neat1 + inhibitor NC 组、 si-Neat1 + miR-22-3p inhibitor 组。RT-qPCR 检测 Neat1、 miR-22-3p 表达水平; 双荧光素酶验证 Neat1、 miR-22-3p 的靶向关系; 流式细胞仪、CCK-8、 ELISA 法分别检测细胞凋亡、 细胞活力及肿瘤坏死因子-α ( tumor necrosis factor-α, TNF-α)、 白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β) 水平; 蛋白质印迹检测 Caspase-3、 磷酸化核转录因子-κB ( phosphorylated nuclear factor-κB, p-NF-κB) P65 / NF-κB P65 水平。 结果 与对照组比较, LPS 组细胞活力、 miR-22-3p表达显著降低, TNF-α、 IL-1β、 细胞凋亡率、 p-NF-κB P65 / NF-κB P65、 Neat1、 Caspase-3 表达显著增加 (P < 0. 05); 与 LPS 组、 si-NC 组比较, si-Neat1 组细胞活力、 miR-22-3p 表达显著增加, TNF-α、 IL-1β、 细胞凋亡率、 p-NF-κB P65 / NF-κB P65、 Neat1、 Caspase-3 表达显著降低 ( P< 0. 05); 下调 miR-22-3p 表达逆转了沉默 Neat1 对 LPS 诱导 HGFs 生物学活性的影响 (P< 0. 05)。 结论 沉默 Neat1 可以抑制 LPS 诱导 HGFs的细胞凋亡、 炎症反应, 可能与上调 miR-22-3p 表达有关。
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