医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (6): 500-505.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.006
摘要: 目的 探究 LncRNA ZFAS1 是否通过调节 miR-34b-5p 促进弥漫大 B 细胞淋巴瘤 ( diffuse large Blymphoma, DLBCL) 细胞增殖并抑制细胞凋亡。 方法 实时荧光定量 PCR ( RT-qPCR) 检测 30 例 DLBCL患者肿瘤组织及 DLBCL 细胞株中 LncRNA ZFAS1 和 miR-34b-5p 转录水平。 将含有敲低 ZFAS1 序列的载体和抑制或过表达 miR-34b-5p 的序列使用 Lipofectamine 2000 试剂转染到 SU-DHL-4 细胞, RT-qPCR 检测敲低和过表达效率, 双荧光素酶报告基因实验分析 ZFAS1 和 miR-34b-5p 的靶向关系。 最后 SU-DHL-4 细胞随机分组为对照组、 sh-ZFAS1 组、 miR-34b-5p inhibitor 组和 shRNA-ZFAS1 + miR-34b-5p inhibitor 组, 克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡; 蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白的表达。 结果 在 DLBCL 患者和细胞系中 ZFAS1 的表达量增加, 而 miR-34b-5p 的表达量减少, 同时 ZFAS1 靶向负调节 miR-34b-5p 的表达。 与对照组相比较, sh-ZFAS1 组 miR-34b-5p 的表达量增加, miR-34b-5p inhibitor 组 miR-34b-5p 的表达量减少。 与 miR-34b-5p inhibitor 组相比较, sh-ZFAS1 和 miR-34b-5p inhibitor 共转染组中 miR-34b-5p 的表达量增加。 敲低 ZFAS1 的表达抑制 SU-DHL-4 细胞增殖, 促进细胞凋亡, 并降低线粒体膜电位, 同时升高 Bax /Bcl-2 和 cleaved caspase-3/caspase-3比值。结论 LncRNA ZFAS1 通过下调miR-34b-5p促进SU-DHL-4细胞增殖并抑制细胞凋亡。
中图分类号: