医学分子生物学杂志 ›› 2021, Vol. 18 ›› Issue (6): 409-.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2021.06.001

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GST pull-down 结合质谱技术鉴定 Muted 蛋白相互作用蛋白

郝振华, 李巍
  

  1. 国家儿童医学中心, 首都医科大学附属北京儿童医院, 遗传与出生缺陷防治中心; 北京市儿科研究所, 出生缺陷遗传学研究北京市重点实验室; 儿科重大疾病研究教育部重点实验室 北京市, 100045
  • 出版日期:2021-11-30 发布日期:2021-12-22
  • 通讯作者: 李巍(电话:010-59616628,E-mail:liwei@ bch. com. cn)
  • 基金资助:
    国家自然科学基金( No. 31601087,91854110),北京市自然科学基金项目(No. 5164032)

Identification of Muted-interacting Proteins by GST Pull-down and Mass Spectrometry

HAO Zhenhua, LI Wei   

  • Online:2021-11-30 Published:2021-12-22

摘要:

目的   鉴定 Muted 蛋白相互作用蛋白

方法   表达并纯化 GST-Muted 蛋白融合蛋白与小鼠脑组织蛋白共孵育银染获得与 Muted 互作的蛋白条带利用质谱技术获得这些条带的氨基酸序列鉴定Muted 的相互作用蛋白。 

结果   初步鉴定出 31 个与 Muted 特异结合的互作蛋白包括外泌体蛋白、 细胞骨架蛋白及马达蛋白等进一步应用免疫共沉淀技术验证了 Muted 与 Stxbp1 的相互作用。 

结论   从小鼠脑组织初步鉴定了 Muted 蛋白的结合蛋白为进一步研究 Muted 蛋白在 LDCVs 形成和分泌过程中的功能及机制提供了新的线索

关键词:

大致密核心颗粒, GST pull-down, 质谱, Muted 蛋

中图分类号: