医学分子生物学杂志 ›› 2022, Vol. 19 ›› Issue (4): 300-306.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2022.04.006
摘要: 目的 探究肝细胞癌 ( hepatocellular carcinoma, HCC) 患者血清外泌体中程序性死亡配体-1 (programmed death ligand 1, PD-L1) 的表达水平及临床意义。 方法 采用 ExoQuick 试剂盒提取 75 例 HCC 患者和 15 名健康对照者血清样本中的外泌体, 分别利用透射电镜、 NanoSight 以及 Western 印迹对其进行鉴 定; 采用 RT-qPCR 检测血清外泌体中 PD-L1 mRNA 的表达差异; 采用卡方检验分析血清外泌体 PD-L1 mRNA 表达水平与患者临床病理学特征的关系; 采用 Kaplan-Meier 法结合 Cox 回归分析探究血清外泌体 PD-L1 mRNA 表达的预后价值。 结果 透射电镜和 NanoSight 结果显示 HCC 患者和健康对照者血清中的外泌体粒 径主要集中 100 nm 左右, Western 印迹检测可见外泌体均表达 CD9 和 TSG101 标志蛋白, 而不表达细胞骨 架蛋白 Calnexin。 RT-qPCR 检测结果显示, HCC 患者血清外泌体中 PD-L1 mRNA 的表达水平明显高于健康 对照者 (t = 11. 670, P< 0. 001), 其高表达与肿瘤直径、 肿瘤数目、 Child-Pugh 分级、 AFP 水平以及门静脉 癌栓有关 (P均 < 0. 05)。 Kaplan-Meier 生存分析显示, 血清外泌体 PD-L1 mRNA 高表达组 HCC 患者的总生 存期较低表达组明显缩短 (P = 0. 004)。 单因素和多因素 Cox 回归分析表明, 血清外泌体 PD-L1 mRNA 高 表达是 HCC 患者总生存期缩短的独立危险因素 (HR = 2. 013, 95 % CI: 1. 012 ~ 3. 669, P = 0. 015)。 结论 HCC 患者血清外泌体中 PD-L1 表达明显上调, 且与肿瘤的恶性进展和不良预后密切相关, 具有成为 HCC 预后标志物的巨大潜力。
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