目的 探索黄芩素调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 3 ( nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3) / 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 1 ( cysteine aspartate protease 1, Caspase1) 通路对牙周炎大鼠牙槽骨吸收的影响。 方法 将 40 只牙周炎大鼠随机分为模型组、 黄芩素组、 激活剂 组、 黄芩素 + 激活剂组, 另取 10 只正常作为对照组。 检测大鼠釉牙骨质界到牙槽嵴顶 (CEJ-AC) 的距离、 血清中白细胞介素-6 (IL-6)、 转化生长因子-β (TGF-β) 含量以及牙周组织病理变化、 IL-6、 TGF-β 阳性 表达和 NLRP3、 Caspase-1 蛋白表达。 结果 模型组大鼠 CEJ-AC、 NLRP3、 Caspase-1、 IL-6、 TGF-β 水平及 阳性表达水平以及蛋白表达水平均升高 (P< 0. 05); 经黄芩素干预后, 各项指标均降低 (P< 0. 05); 引入 激活剂明显削弱了黄芩素对牙周炎大鼠的抗炎作用。 结论 黄芩素通过抑制 NLRP3 / Caspase-1 通路减轻炎性反应, 控制牙槽骨吸收。

目的 探索跑步运动对脑卒中大鼠的海马可塑性的保护作用及其生物学机制。 方法 成年雄性 大鼠大脑中动脉闭塞 (middle cerebral artery occlusion, MCAO) 90 min, 24 h 后随机分为运动组和非运动 组。 两周后, 对大鼠的神经功能缺损情况进行评分; 水迷宫法检测大鼠的学习和记忆功能; 2, 3, 5 三苯 四氮唑氯化物染色和 HE 染色评估大鼠大脑梗塞水平和组织学损伤; NeuN 染色观察神经元损伤水平; 蛋白 质免疫印迹法检测 COX-2、 IL-1β 和 TNF-α 的蛋白表达水平。 结果 MCAO 后, 运动组的神经功能缺损、 学习和记忆功能、 脑梗死体积指标均优于非运动组。 与这些结果一致, 运动组的大鼠脑组织中的神经元损 伤数目也显著减少, 脑内炎性反应得到了抑制。 结论 运动可以改善 MCAO 后神经功能评分、 减少梗死体 积, 其潜在机制与炎性反应的抑制对神经元的保护有关。

目的 探讨 miR-296-5p 靶向 PLK1 对骨肉瘤 (osteosarcoma, OS) 细胞自噬及抑制上皮-间质转化 (EMT) 的作用机制。 方法 qRT-PCR 检测 miR-296-5p 在 OS 细胞中的表达。 采用生物信息学分析预测 miR-296-5p 的靶基因, 验证 miR-296-5p 对靶基因 PLK1 的直接靶向调控; 细胞转染构建 miR-296-5p 过表达 和干扰细胞, CCK-8、 克隆形成、 Transwell 小室、 流式、 蛋白免疫印迹实验检测 miR-296-5p 的不同表达对 U2OS 细胞中 PTBP1 表达水平及细胞增殖、 侵袭、 凋亡、 自噬及 EMT 的影响。 结果 与对照组比较, miR-296-5p 在 OS 中表达降低, 而 PLK1 则升高 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, mimic 组的克隆形成率、 侵袭 细胞数目及 PTBP1、 p62、 N-cadherin、 Vimentin、 p-PI3K/ PI3K、 p-AKT/ AKT 水平降低, 细胞凋亡率、 Beclin-1、 LC3-Ⅱ/ Ⅰ、 E-cadherin 水平升高 (P< 0. 05); 与 PLK1 组比较, PLK1 + mimic 组的克隆形成率、 侵袭 细胞数目及 PTBP1、 p62、 N-cadherin、 Vimentin、 p-PI3K/ PI3K、 p-AKT/ AKT 水平降低, 细胞凋亡率、 Beclin-1、 LC3-Ⅱ/ Ⅰ、 E-cadherin 水平升高 (P< 0. 05)。 结论 miR-296-5p 可能能够靶向 PLK1 调控 PI3K/ AKT 通路诱导 OS 细胞中的自噬并抑制 EMT。

目的 探究异氟醚对膀胱癌 5637 细胞恶性生物学行为及化疗敏感性的影响。 方法 单独或联合 给予异氟醚及顺铂处理膀胱癌 5637 细胞, 将细胞随机分为 4 组: 对照组、 异氟醚组、 顺铂组和异氟醚 + 顺 铂联合处理组。 BrdU 染色检测 BrdU 阳性细胞数; 流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布; Transwell 检测侵袭细胞数; 划痕愈合实验检测划痕愈合率; Western 印迹检测 Ki67、 PCNA、 Bax、 Bcl-2、 cleaved caspase-3 和 caspase-3 蛋白表达; 结果 与顺铂组相比较, 异氟醚 + 顺铂联合处理组 BrdU 阳性细胞数和 Ki67、 PCNA 蛋白表达降低, G0 / G1期比率和 S 期细胞数降低, G2 / M 期比率升高, 细胞凋亡率和 Bax / Bcl-2、 cleaved caspase-3 / caspase-3 比值升高, 侵袭细胞数、 划痕愈合率降低, 均有显著性差异 (P< 0. 05)。 结论 异氟醚可通过抑制细胞增殖、 侵袭、 迁移, 诱导细胞凋亡, 提高 5637 细胞对顺铂的敏感性。

目的 探究肝细胞癌 ( hepatocellular carcinoma, HCC) 患者血清外泌体中程序性死亡配体-1 (programmed death ligand 1, PD-L1) 的表达水平及临床意义。 方法 采用 ExoQuick 试剂盒提取 75 例 HCC 患者和 15 名健康对照者血清样本中的外泌体, 分别利用透射电镜、 NanoSight 以及 Western 印迹对其进行鉴 定; 采用 RT-qPCR 检测血清外泌体中 PD-L1 mRNA 的表达差异; 采用卡方检验分析血清外泌体 PD-L1 mRNA 表达水平与患者临床病理学特征的关系; 采用 Kaplan-Meier 法结合 Cox 回归分析探究血清外泌体 PD-L1 mRNA 表达的预后价值。 结果 透射电镜和 NanoSight 结果显示 HCC 患者和健康对照者血清中的外泌体粒 径主要集中 100 nm 左右, Western 印迹检测可见外泌体均表达 CD9 和 TSG101 标志蛋白, 而不表达细胞骨 架蛋白 Calnexin。 RT-qPCR 检测结果显示, HCC 患者血清外泌体中 PD-L1 mRNA 的表达水平明显高于健康 对照者 (t = 11. 670, P< 0. 001), 其高表达与肿瘤直径、 肿瘤数目、 Child-Pugh 分级、 AFP 水平以及门静脉 癌栓有关 (P均 < 0. 05)。 Kaplan-Meier 生存分析显示, 血清外泌体 PD-L1 mRNA 高表达组 HCC 患者的总生 存期较低表达组明显缩短 (P = 0. 004)。 单因素和多因素 Cox 回归分析表明, 血清外泌体 PD-L1 mRNA 高 表达是 HCC 患者总生存期缩短的独立危险因素 (HR = 2. 013, 95 % CI: 1. 012 ~ 3. 669, P = 0. 015)。 结论 HCC 患者血清外泌体中 PD-L1 表达明显上调, 且与肿瘤的恶性进展和不良预后密切相关, 具有成为 HCC 预后标志物的巨大潜力。

目的 不同的区域及种族的 BRCA1 / 2 基因突变频率差异较大, 着重分析海南西部地区乳腺癌患 者 BRCA1 / 2 基因的突变状态及对患者预后的影响。 方法 选取 2015 年 10 月 ~ 2020 年 12 月在海南西部中 心医院住院并确诊为原发性乳腺癌的 256 例患者为研究对象, 采用变性高效液相色谱法 ( denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC) 筛查乳腺癌患者是否存在 BRCA1 / 2 基因突变, 分析 BRCA1 / 2 基 因突变状态及 BRCA1 / 2 基因突变患者的临床特征, 并随访分析患者 5 年生存情况, COX 回归分析影响患者 预后的因素。 结果 256 例乳腺癌患者中共检出 53 例患者发生 BRCA1 / 2 基因突变, 其中 BRCA1 突变率 12. 11 % (31 / 256), BRCA2 突变率 8. 59 % (22 / 256), 其中有害变异率为 7. 03 % (18 / 256)。 BRCA1 / 2 基 因突变患者家族病史、 妇科疾病史、 乳腺疾病史、 雌激素受体 (estrogen receptor, ER)、 原癌基因 (CerbB2) 蛋白阳性比例以及临床病理分级、 临床分期与未突变患者比较差异有统计学意义 (P< 0. 05)。 患者总 体生存率为 83. 59 % , BRCA1 / 2 基因突变者生存率低于未突变者 (P< 0. 05), COX 回归分析显示, BRCA1 / 2 基因突变、 乳腺疾病史、 临床分期、 CerbB-2 阳性、 CEA、 CA199 均是影响乳腺癌患者生存的危险因素 (P< 0. 05)。 结论 通过 DHPLC 可有效筛查海南西部地区乳腺癌患者 BRCA1 / 2 基因的有害变异, BRCA1 / 2 基因突变与临床病理特征及预后密切相关。

目的 探讨跨膜丝氨酸蛋白酶 4 ( transmembrane protease serine 4, TMPRSS4)、 线皮素-1 ( ladinin-1, LAD1) 在宫颈癌患者组织中的表达情况及与患者预后的关系。 方法 选取 2015 年 6 月 ~ 2018 年 6 月在丹阳市人民医院手术治疗的宫颈癌患者 79 例为研究对象, 并在术中收集患者 79 例癌组织标本, 60 例 癌旁组织标本, 采用免疫组织化学染色法观察宫颈癌组织中 TMPRSS4、 LAD1 蛋白表达情况, 实时荧光定 量 PCR (qRT-PCR) 法检测组织中 TMPRSS4、 LAD1 mRNA 表达水平。 收集患者临床病理参数并对患者进 行 3 年随访, 分析 TMPRSS4、 LAD1 表达水平与患者临床病理参数的关系及影响宫颈癌患者预后的因素。 Pearson 法分析 TMPRSS4 与 LAD1 表达的相关性, 利用受试者工作特征曲线 (receiver operating characteristic curve, ROC) 分析 TMPRSS4、 LAD1 水平对患者预后的预测价值。 结果 宫颈癌患者癌组织 TMPRSS4、 LAD1 表达水平均高于癌旁组织 (P< 0. 05)。 宫颈癌组织中 TMPRSS4 和 LAD1 的表达水平呈明显正相关 (r = 0. 249, P< 0. 05)。 宫颈癌组织中 TMPRSS4 与 LAD1 蛋白表达与患者 FIGO 分期和肿瘤分化程度有关 (P< 0. 05), FIGO 分期、 肿瘤分化程度、 TMPRSS4、 LAD1 蛋白表达水平是影响患者预后的因素 (P< 0. 05)。 预后存活患者癌组织中 TMPRSS4 和 LAD1 水平均显著低于预后死亡患者 (P< 0. 05)。 ROC 结果显示, TMPRSS4 和 LAD1 水平评估患者预后的曲线下面积分别为 0. 756、 0. 909, 对应的敏感度分别为 91. 11 % 、 52. 94 % , 特异度分别为 85. 29 % 、 85. 29 % ; 二者联合评估患者预后的曲线下面积为 0. 952, 敏感度为 88. 89 % , 特异度为 88. 24 % 。 结论 TMPRSS4、 LAD1 在宫颈癌患者组织中均高表达, 二者表达呈明显正 相关, 可应用于评估患者预后。

目的 探讨 circUBE2D2 对结直肠癌 SW620 细胞增殖、 迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。 方法 收集 2020 年 1 月至 2020 年 5 月大连大学附属新华医院肛肠外科收治的 45 例结直肠癌患者的癌组织及 其相应癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测 circUBE2D2、 miR-376a-3p 的表达量; 以人结直肠癌细胞 SW620 为研究对象, 随机分为 si-NC 组、 si-circUBE2D2 组、 miR-NC 组、 miR-376a-3p 组、 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组和 si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组; CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 划痕实验与 Transwell 实验分别检测细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭; 双荧光素酶报告实验检测 miR-376a-3p 过表达对野 生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性; Western 印迹法检测上皮型钙黏蛋白 (E-cadherin)、 神经型钙 黏蛋白 (N-cadherin) 蛋白表达量。 结果 与癌旁组织比较, 结直肠癌组织中 circUBE2D2 的表达量升高 (P< 0. 05), miR-376a-3p 的表达量降低 (P< 0. 05); 与 si-NC 组比较, si-circUBE2D2 组细胞活力、 划痕愈 合率和 N-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋 白水平升高 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平 降低 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数减少 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05); miR-376a-3p 过表达可抑制野生型载体 WT-circUBE2D2 的荧光素酶活性 (P< 0. 05); 与 si-circUBE2D2 + anti-miR-NC 组比较, si-circUBE2D2 + anti-miR-376a-3p 组细胞活力、 划痕愈合率和 N-cadherin 蛋白水平升高 (P< 0. 05), 细胞克隆形成数和侵袭细胞数增多 (P< 0. 05), E-cadherin 蛋白水平降低 (P< 0. 05)。 结论 干扰 circUBE2D2 表达可通过靶向调控 miR-376a-3p 表达而降低结直肠癌细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭 能力。 

目的 探究右美托咪定 ( dexmedetomidine, DEX) 对口腔鳞癌 ( oral squamous cell carcinoma, OSCC) 细胞生长和运动的调节作用。 方法 人 OSCC 细胞 CAL27 分为 DEX0、 5、 10 及 20 nmol / L 组。 运用 克隆形成实验和 BrdU 实验评估细胞增殖; Transwell 法检测细胞侵袭; 流式细胞术检测细胞凋亡率; ELISA 检测超氧化物歧化酶 (SOD) 和丙二醛 (MDA) 水平; 微管形成实验评估细胞微管形成能力; Western 印 迹检测血管内皮生长因子 (VEGF)、 纤连蛋白 ( FN)、 B 细胞淋巴瘤 2 ( Bcl-2) 和 Bcl-2 相关 X 蛋白 (Bax) 的表达。 结果 与对照组比较, DEX 处理可显著降低 CAL27 细胞克隆形成率和 BrdU 阳性细胞率, 减少侵袭细胞数和微管结节数, 下调 VEGF 和 FN 表达水平。 同时 DEX 处理可促进氧化应激, 提高 Bax / Bcl-2 比率。 结论 DEX 处理可抑制 CAL27 细胞增殖、 侵袭和微管形成能力, 并促进其氧化应激和凋亡。

目的 探究 ATR 抑制剂联合卡铂对裸鼠乳腺癌移植瘤的作用及其对组织 BRG1、 RAD51、 PALB2 的影响。 方法 将 40 只乳腺癌移植瘤模型裸鼠随机分为对照组、 卡铂组、 ATR 抑制剂 M6620 组和卡铂 + M6620 组 (n = 10)。 记录肿瘤体积和质量, RT-qPCR 和 Western 印迹检测肿瘤组织中 Ki67、 MMP2、 N-cadherin、 E-cadherin mRNA 和蛋白表达量, 免疫组化检测 Brahma 相关基因 1 (Brahma related gene 1, BRG1)、 重组酶 51 (recombinase 51, RAD51)、 乳腺癌易感基因 2 定位协作蛋白 ( breast cancer susceptibility gene 2 localization collaboration protein, PALB2) 蛋白水平。 结果 卡铂组和 M6620 组的肿瘤质量、 体积、 Ki67、 MMP2、 N-cadherin mRNA 和蛋白水平, 以及 BRG1、 RAD51、 PALB2 蛋白水平显著低于对照组, E-cadherin mRNA 和蛋白显著高于对照组 (P< 0. 05)。 卡铂 + M6620 组的肿瘤质量、 体积、 Ki67、 MMP2、 N-cadherin mRNA 和蛋白水平, 以及 BRG1、 RAD51、 PALB2 蛋白水平显著低于卡铂组和 M6620 组, 而 E-cadherin mRNA 和蛋白显著高于卡铂组和 M6620 组 (P< 0. 05)。 结论 ATR 抑制剂联合卡铂可抑制裸鼠乳腺癌移植瘤 的生长和组织中 BRG1、 RAD51、 PALB2 的表达。

目的 探究电针联合跑轮训练对大脑中动脉栓塞 (middle cerebral artery embolism, MCAO) 模型 大鼠自噬、 神经细胞凋亡和发生的影响。 方法 30 只 SD 大鼠随机分为 MCAO 模型组、 联合干预组和假手术 组, 每组10 只。 测量神经系统评分和脑梗塞体积。 检测自噬效应蛋白 (Beclin1) 和膜型微管相关蛋白 1A/ 1B-轻 链3 (LC3) (LC3B-Ⅱ) / 胞浆型微管相关蛋白1A/ 1B-轻链3 (LC3) (LC3B-Ⅰ) 表达以及凋亡相关蛋白 B 淋巴细胞 瘤-2 基因 (bcl-2)、 BCL2 关联 X 蛋白 (BAX) 和半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3) 表达。 检测神经细胞凋亡和超 氧化物歧化酶 (SOD) 和过氧化氢酶 (CAT) 的活性以及丙二醛 (MDA)、 p-AMPK 和 p-mTOR 的表达。 结果 MCAO 模型组 Tunel 阳性细胞、 神经系统评分、 脑梗塞体积、 BAX、 Caspase-3、 Beclin-1、 LC3B-Ⅱ/ LC3B-I、 p-AMPK 表达、 MDA 含量增加, SOD 和 CAT 活性、 p-mTOR、 Bcl-2 表达降低 (P<0. 05)。 联合干预组 Tunel 阳性细 胞、 神经系统评分、 脑梗塞体积、 BAX、 Caspase-3、 Beclin-1 和 LC3B-Ⅱ/ LC3B-I、 p-AMPK 表达、 MDA 含量降低, SOD 和 CAT 活性、 Bcl-2、 p-mTOR 表达增加 (P<0. 05)。 结论 联合干预抑制氧化应激、 自噬相关蛋白 Beclin-1 和 LC3B-Ⅱ/ LC3B-I 以及 BAX 和 Caspase-3 表达并促进 Bcl-2 表达。

多囊卵巢综合征 (polycystic ovary syndrome, PCOS) 是一种在育龄期女性中常见的疾病, 它的主 要临床表现是月经紊乱、 不孕、 痤疮、 多毛等症状, 可能伴随有糖脂代谢异常。 Adropin 是新近发现的一种 分泌性蛋白, 已证实其在调节糖脂代谢、 改善胰岛素抵抗中发挥着作用, 但具体作用机制及其临床意义尚 未完全明确。 文章简要综述 Adropin 蛋白的作用机理及其在多囊卵巢综合征中的研究进展及临床意义。