医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (2): 103-109.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.02.001
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摘要: 目的 基于 Wnt 信号通路探讨原花青素改善骨质疏松症的作用与分子机制。 方法 取 50 只 SD 雌性大鼠通过卵巢切除术构建骨质疏松症大鼠模型, 将建模成功的大鼠随机分为模型组、 阿仑膦酸钠组和 原花青素低、 中、 高剂量组。 另取 10 只 SD 大鼠记为对照组, 对照组仅翻动双侧卵巢不做切除。 阿仑膦酸 钠组按 1 mg / kg 灌胃给予阿仑膦酸钠; 原花青素低、 中、 高剂量组分别按 15、 25、 35 mg / kg 灌胃给予原花 青素; 对照组、 模型组分别灌胃给予等量生理盐水。 酶联免疫测试法 (ELISA) 测定各组大鼠血清氧化应 激相关指标 [丙二醛 (MDA)、 超氧化物歧化酶 (SOD)、 谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)] 水平和骨代谢 指标 [抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)、 Ⅰ型胶原羧基末端肽 (PICP)、 血清骨钙素 (BGP)] 含量; 骨密度 扫描仪扫描检测各组大鼠股骨的骨密度 (BMD) 值; 苏木素-伊红 (HE) 染色观察各组大鼠骨组织形态学 变化; 实时荧光定量聚合酶链式反应 (RT-PCR) 和蛋白免疫印迹法 (WB) 检测骨组织 Wnt、 β-连环蛋白 (β-catenin)、 成骨标志蛋白 [Runt 相关转录因子 2 (Runx2)、 Osterix] mRNA 和蛋白表达。 结果 与对照 组比较, 模型组、 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠血清 MDA、 TRAP 升高, SOD、 GSH-Px、 PICP、 BGP 降低 (P< 0. 05); 与模型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠股骨血清 MDA、 TRAP 降低, SOD、 GSH-Px-PICP、 BGP 升高 (P< 0. 05)。 对照组大鼠骨小梁呈网状排列、 连接紧 密。 模型组骨小梁数量降低、 排列稀疏紊乱、 连续性差。 与模型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组骨小梁数量及结构上均存在不同程度的改善。 与对照组比较, 模型组、 阿仑膦酸钠组和原花青素 低、 中、 高剂量组大鼠骨组织 Wnt、 β-catenin、 Runx2、 Osterix mRNA 及蛋白表达均降低 (P< 0. 05), 与模 型组比较, 阿仑膦酸钠组和原花青素低、 中、 高剂量组大鼠骨组织 Wnt、 β-catenin、 Runx2、 Osterix mRNA 及蛋白表达均升高 (P< 0. 05)。 结论 原花青素能有效改善骨质疏松症大鼠氧化应激和骨代谢指标, 发挥 治疗骨质疏松症的作用, 推测是通过调控 Wnt 通路抑制过氧化应激反应, 促进 Wnt、 β-catenin 及成骨标志 蛋白 Runx2、 Osterix 的表达实现此作用的。
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