医学分子生物学杂志 ›› 2025, Vol. 22 ›› Issue (5): 435-441.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2025.05.004
摘要: 目的 探究过表达微小 RNA-193b-5p (miR-193b-5p) 对人宫颈癌顺铂 ( cisplatin, DDP) 耐药细胞株 SiHa / DDP 化疗耐药性的影响及机制。 方法 培养人宫颈癌细胞株 SiHa 和人宫颈癌顺铂耐药细胞株SiHa / DDP, MTT 法检测不同浓度 (5、 10、 15、 20、 25、 30 μmol / L) DDP 处理后两种细胞的存活率, 测定半抑制浓度 (IC50 ) 值。 将实验分为 SiHa 组、 SiHa / DDP 组、 mimics NC 组 (转染 mimics NC 的 SiHa / DDP细胞)、 miR-193b-5p mimics 组 (转染 miR-193b-5p mimics 的 SiHa / DDP 细胞), 实时荧光定量 PCR ( RTqPCR) 法检测细胞中 miR-193b-5p 表达。 DDP 处理上述细胞后, MTT 法和流式细胞术检测各组细胞存活率、 凋亡率, 细胞免疫荧光染色检测细胞中 LC3B 表达, 蛋白质印迹实验检测各组细胞中 LC3Ⅱ / LC3Ⅰ 、Beclin-1、 P62 蛋白质表达。 结果 与 SiHa 细胞比较, 同一浓度 DDP 处理下的 SiHa / DDP 细胞存活率显著升高 (P< 0. 05), SiHa / DDP 细胞的 IC50值显著升高 (P< 0. 05), 而细胞中 miR-193b-5p 相对表达量显著下调 (P< 0. 05)。 细胞转染后, 与对照组和 mimics NC 组比较, miR-193b-5p mimics 组 SiHa / DDP 细胞中 miR-193b-5p 相对表达量显著上调 (P< 0. 05)。 与 SiHa / DDP 组、 mimics NC 组比较, miR-193b-5p mimics 组 SiHa / DDP 细胞存活率显著下降、 细胞凋亡率显著增加 ( P< 0. 05), 细胞中 LC3B 荧光强度明显减弱, LC3Ⅱ / LC3Ⅰ 比值、 Beclin-1 蛋白质相对表达量显著下调 ( P< 0. 05), P62 蛋白质相对表达量显著上调 ( P<0. 05)。 结论 miR-193b-5p 在人宫颈癌顺铂耐药细胞株 SiHa / DDP 中表达下降, 其过表达能够逆转 SiHa /DDP 细胞对 DDP 的耐药性, 该作用可能与其抑制细胞自噬水平有关。
中图分类号:
R737. 33 |