华中科技大学学报(医学版) ›› 2022, Vol. 51 ›› Issue (4): 500-507.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2022.04.010
摘要: 摘要:目的 探讨过表达circRNA_LARP4(circ_LARP4)对鼻咽癌 CNE2和5-8F细胞肿瘤干细胞样特性及线粒体 膜电位的影响。方法 鼻咽癌 CNE2和5-8F细胞转染circ_LARP4过表达载体,qRT-PCR 检测circ_LARP4过表达效 率。克隆形成实验检测克隆形成率,肿瘤细胞成球实验检测成球数和成球直径,流式细胞术检测线粒体膜电位变化,试 剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Westernblot检测 Ki67、 P21、八聚体结合转录因子 4(octamer-bindingtranscriptionfactor4,OCT4)、Nanog、ABCG2、Bcl-2、Bcl-2 相 关 X 蛋 白 (Bcl-2-associatedX,Bax)的蛋白表达水平。结果 与 Control组比较,circ_LARP4组 CNE2和5-8F细胞中circ_LARP4 表达水平显著上调(均P<0.05),克隆形成率显著降低(均P<0.05),成球率和成球直径显著减少(均P<0.05),线粒体 JC-1红/绿荧光比显著降低(均P<0.05),Ki67蛋白水平显著下调,p21蛋白水平显著上调(均 P<0.05),OCT4、Nanog 和 ABCG2蛋白水平显著降低(均P<0.05),Bax/Bcl-2显著增高(均P<0.05),SOD含量显著降低,MDA 含量显著升高 (均P<0.05)。通过Starbase2.0和dbDEMC2初步筛选出circ_LARP4在鼻咽癌中的可能靶分子 miR-135b-5p和 miR-195-5p,并初步发现二者可以逆转circ_LARP4对细胞增殖干性和凋亡的影响(P<0.05)。结论 过表达circRNA_ LARP4能够降低鼻咽癌 CNE2和5-8F细胞的肿瘤干细胞样特性及线粒体膜电位。
中图分类号: