目的 探讨细胞焦亡是否参与脑卒中后中枢痛(central post-stroke pain,CPSP)的病理生理过程,以及VX-765能否通过抑制NLRP3/GSDMD/IL-1β通路改善CPSP所致的中枢敏化。方法 采用远端大脑中动脉电凝法(dMCAO)建立CPSP小鼠模型。将40只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为4组:CPSP+VX-765组、CPSP+Vehicle组、Sham+VX-765组、Sham+Vehicle组。通过Western blot检测脑组织中NLRP3、GSDMD-N、Caspase-1及IL-1β的蛋白表达水平;尼氏染色观察神经元存活与死亡情况;使用von Frey纤维丝测定双侧后爪机械缩足阈值(PWMT);采用Hargreaves法检测双侧后爪热缩足潜伏期(PWTL)。结果 造模后第14天,与Sham+Vehicle组相比,CPSP+Vehicle组脑内NLRP3、GSDMD-N、Caspase-1及IL-1β表达显著升高,梗死灶周围尼氏小体溶解,存活神经元减少,双侧后爪PWMT与PWTL均显著降低。VX-765干预后,CPSP+VX-765组焦亡相关蛋白表达下降,梗死灶周边神经元存活数量增加,双侧后爪PWMT与PWTL均较CPSP+Vehicle组提高。结论 VX-765可能通过抑制NLRP3/GSDMD/IL-1β通路,减少细胞焦亡,发挥神经保护作用,改善CPSP诱导的中枢敏化。

目的 筛选影响胃癌免疫治疗反应的核心基因,基于关键基因建立预测胃癌免疫治疗反应的模型。方法 从GEO数据库、TIDE数据库下载胃癌免疫治疗患者的基因表达谱数据,综合利用差异表达基因分析和加权共表达网络分析(WGCNA)筛选出与胃癌免疫治疗相关的185个基因,进一步利用3种机器学习模型:最小绝对值收敛和选择算子算法(LASSO)、随机森林(Random Forest,RF)和支持向量机-递归特征消除(SVM-RFE)筛选出核心基因,随后基于核心基因构建胃癌免疫治疗预测模型并进行外部验证,采用ROC曲线评估模型预测效能。以GSE62254数据集进一步验证模型的预测能力,并结合单细胞分析探究核心基因在细胞亚群水平的表达差异。结果 基于上述方法,构建出由5个核心基因组成的免疫治疗反应预测模型,并利用预测模型将包含300例胃癌患者的队列分为高风险和低风险两个不同风险亚群,高风险组具有较高的肿瘤微环境细胞浸润、较高的TIDE评分、更明显的T细胞功能障碍、较高的肿瘤相关成纤维细胞评分和某些较高的免疫检查点分子表达,以及较低的微卫星不稳定性(MSI)评分,这些都提示了高风险组具有较高的免疫逃逸潜能,免疫检查点抑制剂对其疗效差。利用单细胞分析,在细胞亚群中鉴定出5个核心基因表达的异质性。结论 建立了基于胃癌免疫治疗反应性的差异表达核心基因的预测模型,该模型对推动胃癌免疫治疗及辅助肿瘤预后预测具有潜在价值。

目的 探讨缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)中线粒体自噬和铁死亡相关的关键基因,研究线粒体自噬、铁死亡与IS的关系。方法 利用基因表达综合数据库、GeneCards数据库和铁死亡相关数据库分别获取IS基因表达谱、线粒体自噬和铁死亡相关基因。筛选出共同差异表达基因,并对其进行功能富集分析和蛋白-蛋白相互作用网络分析,结合2种拓扑算法分析获得候选基因。以数据集GSE137482对候选基因进行基因表达验证,经受试者工作特征(ROC)曲线评估诊断特征的准确性,得到最终靶点基因,最后通过数据集GSE61616和动物实验验证靶点基因。将SD大鼠随机分为假手术组和模型组,每组10只。运用蛋白质免疫印迹技术和实时荧光定量PCR检测靶点基因的表达水平。结果 共筛选出36个共同差异表达基因,经GO和KEGG富集分析,主要参与自噬和铁死亡相关信号通路。选取SIRT3、STAT3、HMOX1和NFE2L2为最终靶点,其中SIRT3在IS中表达明显下降(P＜0.05),STAT3、HMOX1和NFE2L2表达升高(均P＜0.05),且在ROC曲线分析中AUC值均为1。动物实验中,IS模型组STAT3、HMOX1和NFE2L2的蛋白表达量上升,SIRT3表达下降(均P＜0.05)。结论 SIRT3、STAT3、HMOX1和NFE2L2可能是IS中参与线粒体自噬和铁死亡的关键共同基因。

目的 探究右美托咪定对术后认知功能障碍小鼠的神经保护作用,并揭示其具体作用机制。方法 将SPF级健康老年小鼠50只随机分为对照组、模型组、右美托咪定(Dex)组、Nrf2激活剂(SFN)组、Dex+SFN组,除对照组外其余小鼠在异氟醚麻醉下行开腹手术,构建术后认知功能障碍模型。旷场实验和Morris水迷宫实验评估小鼠认知功能,苏木精-伊红染色观察海马神经元的形态和结构变化,TUNEL染色检测海马神经元凋亡,Western blot测定海马组织内Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠表现出显著的行为抑制:运动路程明显缩短[(13.45±1.01)vs.(16.35±1.08)m,P<0.01],旷场中心停留时间明显减少[(11.05±1.07)vs.(14.21±1.14)s,P<0.01];严重的空间学习记忆障碍:逃避潜伏期激增[(52.34±3.25)vs.(11.45±0.52)s,P<0.01],穿越平台次数减少[(2.45±0.13)vs.(8.63±0.41)次,P<0.01];小鼠出现海马神经元排列紊乱、数量减少或结构改变等退行性变化;神经细胞凋亡率显著升高[(51.05 ± 2.58)%vs.(0.12 ± 0.01)%,P<0.01];Nrf2蛋白表达量降低[(0.18±0.05)vs.(1.00±0.00),P<0.01],HO-1蛋白表达量降低[(0.20±0.06)vs.(1.00±0.00),P<0.01]。与模型组比较,各治疗组模型动物的行为抑制均得到显著改善:Dex组小鼠运动路程[(14.50±1.03)m]明显增加,中心停留时间[(12.58±1.08)s]明显增加(均P<0.05),SFN组小鼠运动路程[(14.87±1.02)m]明显增加,中心停留时间[(12.69±1.09)s]明显增加(均P<0.05);所有治疗组的认知功能均显著改善:Dex组逃避潜伏期降低[(30.43±1.82)s,P<0.01],穿越次数增加[(4.85±0.22)次,P<0.01],SFN组潜伏期降低[(28.74±1.76)s,P<0.01],穿越次数增加[(5.12±0.25)次,P<0.01];小鼠海马组织内神经元损伤明显改善;Dex组神经细胞凋亡率降低[(14.71 ± 1.15)%vs.(51.05 ± 2.58)%,P<0.01],SFN组神经细胞凋亡率降低[(18.13 ± 1.32)%vs.(51.05 ± 2.58)%,P<0.01];Dex组和SFN组的Nrf2和HO-1蛋白表达量均升高(P<0.05,P<0.01)。与Dex组相比,Dex+SFN组小鼠运动路程明显增加[(15.68±1.05)m,P<0.05],中心停留时间明显增加[(13.71±1.12)s,P<0.05];潜伏期明显缩短[(20.03±1.17)s,P<0.01],穿越次数明显增加[(6.74±0.36)次,P<0.01];小鼠海马组织内神经元损伤改善更显著;神经细胞凋亡率进一步降低[(10.81 ± 0.94)%vs.(14.71 ± 1.15)%,P<0.01];Nrf2和HO-1蛋白表达量进一步升高(均P<0.05)。结论 Dex对异氟醚引发的术后认知功能障碍小鼠具有明显的神经保护作用,其机制可能与调控Nrf2/HO-1信号通路有关。

目的 明确产前酒精暴露(prenatal alcohol exposure,PAE)对小鼠海马体γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)能中间神经元的损伤效应。方法 将妊娠C57BL/6小鼠随机分为配对喂养对照(pair-fed control,PF-Cont)组与PAE组,PAE组于妊娠第5~10天灌胃4.5 g/kg乙醇、第11~20天灌胃6.0 g/kg乙醇,PF-Cont组灌胃等热量麦芽糖糊精溶液。子代出生后,采用全细胞膜片钳技术检测出生后第10天(PND10)子代海马GABA能神经元自发性抑制性突触后电流(spontaneous inhibitory postsynaptic currents,sIPSC);利用高尔基-考克斯染色结合Sholl分析量化海马CA1、CA2/3及齿状回(dentate gyrus,DG)区神经元树突结构;利用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)检测72~89日龄雄性子代脑形态指标;采用免疫荧光染色结合体视学方法分析PND10雄性子代海马GABA能神经元小白蛋白(parvalbumin,PV⁺)、钙视网膜蛋白(calretinin,CR⁺)及总神经元特异性核蛋白(neuronal nuclei,NeuN⁺)密度。结果 PAE组雄性子代海马GABA能神经元sIPSC频率显著高于PF-Cont组(P<0.05);44 mmol/L乙醇可进一步升高PAE组雄性子代sIPSC频率(P<0.01),88 mmol/L乙醇则显著抑制(P<0.01)。PAE组雄性子代海马CA1区(10~50 μm)、CA2/3区(50~140 μm)、DG区(100~140 μm)树突交叉点数显著高于PF-Cont组(均P<0.01),树突总长度(CA1区增加31.5%、CA2/3区增加38.17%、DG区增加33.2%)及初级树突数量也显著增加(均P<0.05)。PAE组雄性子代成年后体重[(19.64±0.43)vs.(21.32±0.51)g]、脑体积[(0.42±0.01)vs.(0.47±0.01)cm³]、脑表面积[(74.81±2.05)vs.(83.05±2.03)mm²]及皮质厚度[(869.54±8.02)vs.(900.32±10.13)μm]均显著低于PF-Cont组(均P<0.05);PV⁺、CR⁺ GABA能神经元及NeuN⁺总神经元三维密度显著降低(均P<0.05)。结论 PAE可特异性损伤子代小鼠海马体GABA能中间神经元,表现为雄性子代突触前兴奋性异常、树突分支复杂性增加,且导致子代成年后脑结构发育滞后及GABA能神经元密度下降,该损伤可能是胎儿酒精谱系障碍中认知与行为障碍的重要神经生物学基础。

目的 探讨山奈酚通过调控胰岛素受体(INSR)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)表达抑制肥胖大鼠脂肪积累的作用机制。方法 将实验大鼠随机分为对照组、模型组、山奈酚低剂量组、山奈酚高剂量组、甜菜碱组,除对照组,其余组均构建肥胖模型。计算各组大鼠肝脏指数、Lee's指数和脂体比;检测血清脂质(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、炎症因子(TNF-α、IL-6)、肝损伤标志物(AST、ALT)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木精-伊红(HE)染色检测肝脏组织及脂肪组织病理变化;油红O染色检测肝脏组织脂质情况;免疫组织化学法检测脂代谢相关CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)表达;蛋白质免疫印迹法检测INSR、PPARG蛋白表达水平;qRT-PCR检测C/EBPα、ACC、INSR、PPARG mRNA水平。结果 模型组较对照组脂肪细胞的轮廓及体积增大,增生肥大明显,排列松散;肝组织中肝细胞空泡化明显,伴有较多细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,脂滴明显增多,脂质积累增多;肝脏指数、Lee's指数、脂体比升高,TC、TG、LDL-C、FPG、FINS、HOMA-IR、TNF-α、IL-6、AST、ALT水平升高,C/EBPα、ACC mRNA相对表达量及蛋白染色强度增加,PPARG mRNA及蛋白相对表达量增加,HDL-C水平及INSR mRNA及蛋白相对表达量降低(均P＜0.05)。山奈酚低剂量组、山奈酚高剂量组、甜菜碱组较模型组的脂肪组织及肝脏组织病理损伤均有不同程度减轻,脂滴明显减少,脂质积累减少,上述血清脂质指标、炎症因子、肝损伤标志物、血糖等水平均得到改善(均P＜0.05)。结论 山奈酚可能通过促进INSR表达及抑制PPARG表达,抑制肥胖大鼠的脂肪积累。

目的 基于靶向血清胆汁酸代谢组学,构建妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)发病风险预测模型。方法 依托前瞻性出生队列人群,测定孕早期血清中32种胆汁酸水平。采用最小绝对值收敛和选择算子(LASSO)筛选GDM生物标志物组,利用极限梯度提升树算法(XGBoost)构建预测模型,并采用bootstrap法评估模型性能;通过SHapley加性解释(SHAP)方法评估各胆汁酸在模型中的重要性及其预测价值。结果 基于胆汁酸代谢组学构建的预测模型表现良好(AUC≥0.840),优于传统风险因素预测模型(AUC=0.828),联合传统风险因素后预测性能更佳(AUC≥0.885)。筛选出的关键胆汁酸包括甘氨熊去氧胆酸-3-硫酸(GUDCA-3S)、牛磺脱氧胆酸-3-硫酸(TDCA-3S)、牛磺石胆酸(TLCA)、甘氨猪胆酸(GHCA)、熊脱氧胆酸(UDCA),以及甘氨胆酸∶胆酸(GCA∶CA)与胆酸∶鹅脱氧胆酸(CA∶CDCA)比值。其中,GUDCA-3S、TDCA-3S浓度升高及GCA∶CA、CA∶CDCA比值升高与GDM风险增加相关;TLCA、GHCA及UDCA浓度升高则与GDM风险降低相关。结论 基于胆汁酸代谢组学构建的GDM发病风险预测模型具有良好效能,相关胆汁酸指标可作为潜在生物标志物,为GDM早期识别、代谢调控及机制研究提供支持。

目的 利用两步双样本孟德尔随机化方法探究免疫细胞介导下炎症蛋白与骨质疏松症的因果关系。方法 本研究采用孟德尔随机化方法,将已发表的大规模全基因组关联研究的91种炎症蛋白作为暴露因素,731种免疫细胞表型作为潜在的中介变量,骨质疏松症作为结局因素,探讨三者之间的因果关系,并探究免疫细胞在炎症蛋白影响骨质疏松症发展途径中的介导作用。以逆方差加权作为主要统计方法,并辅以多层级敏感性分析以加强结果的稳定性。结果 逆方差加权法分析结果显示,4种炎症蛋白与骨质疏松症存在显著相关性,且4种炎症蛋白与骨质疏松症风险呈正相关;48种免疫细胞与骨质疏松症存在显著相关性,其中29种免疫细胞与骨质疏松症风险呈正相关,19种免疫细胞与骨质疏松症风险呈负相关。反向孟德尔随机化分析未发现显著相关性。敏感性分析未发现显著的异质性和水平多效性。此外,中介分析结果显示,BAFF-R on IgD^-CD38br部分介导了神经鞘胚素(Artemin,ARTN)(β=0.051,OR=1.053,P=0.002)与骨质疏松症的因果效应,中介效应为0.002,中介占比为3.9%,直接效应为0.049。结论 孟德尔随机化分析为炎症蛋白与骨质疏松症之间的双向因果关系提供了支持证据,确定了ARTN可能通过增加BAFF-R on IgD^- CD38br水平导致骨质疏松症的发生。

目的 探讨通窍活血汤(TQHXD)调控天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)/ Gasdermin E(GSDME)通路介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认知功能的作用机制。方法 大鼠随机分为正常组、AD组、TQHXD低剂量组、TQHXD高剂量组、多奈哌齐组、TQHXD高剂量+Caspase-3激活剂(Raptinal)组,每组12只。除正常组外,其他组大鼠均通过双侧海马注射β淀粉样蛋白25-35(Aβ_25-35)法构建AD模型,建模成功后分组给药处理,持续4周。Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠脑海马CA1区组织病理改变并进行神经病理评分;免疫荧光染色检测海马CA1区GSDME氨基端片段(GSDME-N)阳性细胞数;ELISA法检测海马CA1区中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18水平;Western blot检测海马CA1区中裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)、GSDME-N蛋白表达水平。结果 与正常组比较,AD组大鼠神经元排列紊乱,核固缩,炎性细胞浸润明显;逃避潜伏期增加,跨越平台数减少;神经病理评分,海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数,IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达水平升高(均P＜0.05)。与AD组比较,TQHXD低剂量组、TQHXD高剂量组、多奈哌齐组大鼠海马CA1区病理损伤减轻;逃避潜伏期减少,跨越平台数增加;神经病理评分,海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数,IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达水平降低(均P＜0.05)。与TQHXD高剂量组比较,TQHXD高剂量+Raptinal组海马CA1区病理损伤更为严重;逃避潜伏期增加,跨越平台数减少;神经病理评分,海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数,IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达升高(均P＜0.05)。结论 TQHXD可能通过抑制Caspase-3/GSDME通路抑制AD大鼠神经元焦亡及神经炎症,改善认知功能。

目的 研究补肾化痰方(BSHT)对绝经后骨质疏松症模型大鼠环磷酸腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)-cAMP效应元件结合蛋白(CREB)信号通路及β₂肾上腺素能受体(β₂ adrenergic receptor,β₂AR)通路的影响。方法 取SD大鼠30只,随机分为假手术(Sham)组、模型(OVX)组、BSHT组,每组10只,去卵巢法复制绝经后骨质疏松模型。从造模后第5周开始,各组分别以生理盐水(Sham组和OVX组)或BSHT药液(BSHT组)灌胃;于造模第12周末处死大鼠,取材后进行指标检测。采用微型计算机断层扫描技术(micro CT)检测大鼠股骨的微结构;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测骨组织中相关信号通路分子,如β₂AR、PKA、CREB的基因和蛋白表达水平;采用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测蛋白的组织定位。结果 与Sham组相比,OVX组大鼠的骨微结构指标,包括骨密度(bone mineral density,BMD)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(trabecular number,Tb.N)均明显下降,骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)升高;信号通路指标中,PKA、CREB的mRNA及蛋白表达水平明显下降,β₂AR mRNA及蛋白表达明显增加(均P<0.05)。与OVX组相比,BSHT组大鼠的骨微结构相关指标(BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N)及PKA、CREB表达明显增加,而Tb.Sp、β₂AR表达水平明显下降(均P<0.05)。IHC结果显示骨小梁周边的成骨细胞和骨髓基质细胞的胞质中,β₂AR、PKA、CREB呈阳性表达。结论 BSHT能够通过调节去势骨质疏松症大鼠β₂AR及cAMP-PKA-CREB信号通路,影响骨重建,从而起到防治骨质疏松的作用。

目的 探究康复新液(KFX)对脂多糖(LPS)诱导的口腔黏膜上皮细胞(OMECs)炎症损伤的影响及其机制。方法 体外分离、鉴定、培养小鼠口腔黏膜上皮细胞(mOMECs),以不同稀释倍数(0、0.078%、0.156%、0.313%、0.625%、1.25%、2.5%、5%、10%)KFX及不同浓度(0、0.1、1、10 μg/mL)LPS分别处理mOMECs 48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡水平,确定KFX和LPS干预的最佳浓度。将mOMECs分为对照组(Control)、LPS组(1 μg/mL LPS)、KFX组(0.625% KFX)、KFX+抑制剂对照组(KFX+inhibitor-NC)、KFX+miR-449a抑制剂组(KFX+miR-449a inhibitor)。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡水平,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α和IL-1β水平,qRT-PCR检测细胞中miR-449a和Notch1 mRNA表达水平,Western blot检测细胞中Notch1、cleaved-Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。通过生物信息学方法预测miR-449a与Notch1的靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot验证miR-449a与Notch1的靶向调控关系。结果 与Control组比较,LPS组细胞增殖活性、miR-449a和Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05),细胞凋亡率,TNF-α和IL-1β水平、Notch1 mRNA及Notch1、cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达水平升高(均P<0.05);与LPS组比较,KFX组细胞增殖活性、miR-449a表达水平和Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞凋亡率,TNF-α和IL-1β水平,Notch1 mRNA及Notch1、cleaved-Caspase-3、Bax蛋白表达水平降低(均P<0.05);与KFX组比较,KFX+miR-449a inhibitor组上述指标变化趋势与之相反(均P<0.05),而KFX+inhibitor-NC组无显著变化(P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot结果表明,miR-449a靶向抑制Notch1表达。结论 KFX可能通过miR-449a/Notch1轴改善LPS诱导的mOMECs炎症损伤。

目的 探讨miR-124调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路在失眠中的作用机制,从而为失眠防治体系的构建开辟新的思路。方法 将32只Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:对照(Con)组、睡眠剥夺(SD)组、SD+miR-124 agomir组、SD+miR-124 antagomir组,采用改良多平台水环境法建立快速眼动-睡眠剥夺(REM-SD)大鼠模型,第1、3、5天进行脑电图(EEG)/肌电图(EMG)记录,并观察一般情况和体质量变化。应用HE染色法观察各组大鼠海马病理变化,透射电镜观察神经元和突触的超微结构,采用qRT-PCR技术检测血清中miR-124表达水平、海马组织中miR-124、PI3K、AKT表达水平;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测PI3K、AKT、p-AKT、NF-κB蛋白的表达水平。结果 (1)体质量变化:与Con组比较,造模后各处理组均有不同程度体质量减轻(均P<0.05),其中SD+miR-124 antagomir组的体质量下降幅度最明显。(2)睡眠时相:EEG/EMG结果显示,随着睡眠剥夺时间的增加,WAKE期时长缩短,NREM期、REM期时长相对增加(均P<0.05),且与SD组比较,SD+miR-124 agomir组REM期时相占比增加幅度大,NREM期时相占比增加少。(3)HE染色:各处理组CA1区,CA3区及DG区均出现不同程度的神经元死亡及炎性细胞浸润的现象,SD+miR-124 antagomir组最重,SD+miR-124 agomir组较轻;透射电镜:各处理组见线粒体肿胀、自噬体增多、核膜皱缩或内质网扩张现象。(4)ELISA结果显示:与Con组比较,SD组血清IL-6、TNF-α、IL-1β含量增加(均P<0.05);与SD组比较,SD+miR-124 antagomir组炎症因子含量增加,SD+miR-124 agomir组则较之减少。(5)qRT-PCR检测结果显示:与Con组比较,SD组海马组织中miR-124、PI3K、AKT含量下降;与SD组比较,SD+miR-124 antagomir组PI3K、AKT含量减少,而SD+miR-124 agomir组海马组织中PI3K、AKT含量增加。(6)WB结果显示:与Con组比较,SD组海马组织中PI3K、p-AKT蛋白表达明显减少(均P<0.05);与SD组比较,SD+miR-124 antagomir组PI3K、p-AKT含量更少(均P<0.05);而SD+miR-124 agomir组中PI3K、AKT、p-AKT含量增加(均P<0.05);与Con组比较,SD组、SD+miR-124 antagomir组、SD+miR-124 agomir组海马组织中NF-κB蛋白表达增加,其中SD+miR-124 antagomir组NF-κB蛋白表达增加最多。结论 miR-124可以改善由于睡眠剥夺造成的大鼠炎症因子累积和睡眠时相改变,这可能与其调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路,发挥抗炎、抗氧化的作用相关。

目的 探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在醛固酮瘤(APA)组织、肾上腺无功能腺瘤(NFA)组织、正常肾上腺组织的表达特征。方法 定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学方法检测APA、NFA和正常肾上腺中CaMKⅡ基因和蛋白表达情况。结果 qRT-PCR和Western blot检测显示,APA组织中CaMKⅡ mRNA和蛋白表达水平明显高于正常肾上腺和NFA(均P<0.05)。免疫组织化学检测显示,CaMKⅡ在正常肾上腺和APA瘤旁组织球状带的表达呈强阳性,在束状带和网状带的表达呈弱阳性,CaMKⅡ主要定位于胞质;正常肾上腺组织中,CaMKⅡ在球状带呈不连续性表达,而在APA瘤旁组织球状带中呈连续性表达;CaMKⅡ在APA沿血管和被膜下分布,且均定位于胞质。CaMKⅡ 免疫组织化学染色的免疫反应积分(IRS)在APA高于正常肾上腺和NFA。与正常肾上腺和NFA瘤旁组织相比,APA瘤旁组织重塑显著增强(均P<0.05)。CaMKⅡ IRS×体积值与卧位血浆醛固酮(PAC)、立位PAC、24 h尿醛固酮呈正相关,而与卧位血浆肾素(PRA)、立位PRA及血钾均无明显相关。结论 CaMKⅡ可能调控病理性醛固酮合成与分泌,参与了肾上腺皮质的重塑。

目的 筛选急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血浆中的细胞外囊泡微小RNA(EV-miRNA)诊断标记物并探讨其临床价值。方法 收集3例AMI患者及3例健康对照者的血浆样品,分别提取其血浆miRNA进行测序,并提取细胞外囊泡miRNA进行EV-miRNA测序。通过生物信息学分析,筛选出与AMI显著相关的EV-miRNA分子标记物;随后,再收集27例AMI患者及25例健康对照者的血浆样品,通过qRT-PCR验证筛选出的差异表达EV-miRNA。使用ROC曲线分析评估EV-miRNA对AMI的诊断效能。将筛选出的miRNA进行靶基因预测并分析其与临床指标的相关性。结果 与健康对照组相比,AMI患者血浆细胞外囊泡中miR-6809-3p、miR-3938、miR-6815-5p、miR-4322、miR-6717-5p和miR-6797-5p的表达水平升高,差异有统计学意义(均P<0.05);miR-6815-5p、miR-4322和miR-6717-5p的曲线下面积(AUC)值均超过0.9,显示出对AMI较高的诊断价值。肌酸激酶同工酶MB与miRNA-4322的表达呈弱相关。结论 血浆EV-miRNA可作为AMI诊断的潜在分子标记物。

目的 分析超微细血管成像(superb microvascular imaging,SMI)技术联合血清白介素-17(IL-17)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、正五聚体蛋白-3(PTX3)评估多发性大动脉炎(Takayasu's arteritis,TA)病情活动性的价值。方法 选取2020年4月~2024年11月期间于河北省人民医院就诊的TA患者52例为研究对象,其中活动期29例,非活动期23例。比较两组患者临床资料;使用东芝Aplio 500彩色多普勒超声诊断仪,观察患者颈动脉中增厚管壁内的血管情况;采用酶联免疫吸附实验检测血清IL-17、MMP-9及PTX3水平;比较活动期组与非活动期组患者SMI分级结果及血清指标水平。采用Spearman等级相关分析评估SMI分级与血清IL-17、MMP-9、PTX3的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析SMI分级和血清IL-17、MMP-9、PTX3单独或联合应用对TA患者病情活动性的评估价值。结果 活动期组与非活动期组患者在年龄、性别构成、身体质量指数(BMI)、病程、临床症状、受累颈动脉等方面的差异均无统计学意义(均P＞0.05);与非活动期组相比,活动期组患者血清IL-17、MMP-9、PTX3水平均明显升高,且两组SMI分级存在显著差异(均P＜0.05);Spearman相关分析结果显示,SMI分级与IL-17、MMP-9、PTX3均呈正相关(r=0.418、0.502、0.459,均P＜0.01);ROC曲线分析结果显示,SMI分级、血清IL-17、MMP-9及PTX3评估TA患者病情活动性的曲线下面积(AUC)分别为0.849、0.723、0.835、0.817,四者联合评估的AUC为0.949,高于单独预测(Z=2.044,P=0.041;Z=3.061,P=0.002;Z=2.050,P=0.040;Z=2.446,P=0.014),敏感度和特异度分别为86.21%、91.30%。结论 SMI分级与血清IL-17、MMP-9、PTX3均可用于评估TA病情活动性,联合应用时价值更高。

猴痘(Mpox)是由猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)引起的新发人畜共患传染病。2022年全球疫情凸显了疫苗接种在疫情防控中的核心作用。目前全球尚无MPXV特异性疫苗获批,仍主要依赖基于痘苗病毒的传统天花疫苗(如ACAM2000、MVA-BN、LC16m8)的交叉免疫提供保护。该文首先评述了传统疫苗的免疫特性、临床保护效果及局限,进而重点综述了新型疫苗平台——包括重组蛋白疫苗(如多价抗原融合体与病毒样颗粒)、核酸疫苗(DNA/mRNA疫苗)以及基于工程化细胞囊泡的仿生疫苗的研发进展。这些平台针对MPXV特异性抗原进行理性设计,旨在诱导更强、更持久的保护性免疫。临床前研究表明,多价mRNA疫苗(如BNT166、mRNA-1769)与多价病毒样颗粒疫苗等在动物模型中展现出优于传统改良安卡拉痘苗病毒(MVA)疫苗的保护潜力。未来猴痘疫苗研发需在明确保护性免疫相关要素、优化抗原组合与递送系统,以及提升资源有限地区可及性等方面持续突破。该文通过对从交叉保护到多平台创新策略的演进进行梳理,为构建科学的猴痘防控体系提供参考。

炎症性肠病是一种慢性非特异性炎症性疾病,其病因及发病机制尚不明确,治疗方面也存在很多难点,曾被称为“绿色癌症”,患者需长期乃至终身治疗,为个人及社会带来沉重负担。中医药在治疗炎症性肠病中有着确切疗效和独特优势。近年来,众多研究揭示肠道菌群在炎症性肠病的发生发展过程中起着关键作用。该文旨在综述肠道菌群和炎症性肠病之间的相互作用,并从调节肠道菌群角度探讨中医药防治炎症性肠病的研究现状,以期为临床治疗炎症性肠病提供新的思路和策略,使中医药在未来炎症性肠病治疗和新药物研发中发挥更大作用。

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是指在无冠心病、高血压及瓣膜性心脏病等其他心脏病变基础上发生的特异性心肌结构与功能异常。研究表明,所有类型的糖尿病均可能引发心肌病变,但从发病率及既往研究重点来看,2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)相关的DCM最为常见。因此,现有研究多聚焦于T2DM背景下的心肌结构与功能改变,其发生发展与能量代谢障碍、慢性炎症反应及免疫失衡等多重机制密切相关。近年来,肠道菌群作为“第二基因组”逐渐被发现参与DCM的关键病理过程。该文系统综述了T2DM及DCM患者肠道菌群结构与功能的异常变化,重点阐述了其通过多种代谢和免疫途径,如胆汁酸-法尼醇X受体/胆汁酸膜受体通路、支链氨基酸代谢-线粒体功能、氧化三甲胺-炎症反应通路、短链脂肪酸/胰高糖素样肽-1/腺苷酸活化蛋白激酶通路、色氨酸-吲哚-芳香烃受体信号轴,以及肠屏障破坏与内毒素入血等机制调控心肌结构与功能的作用。进一步讨论了真菌、噬菌体、肠道病毒等非细菌微生态因子在DCM中的潜在贡献,并总结了益生菌、益生元和粪菌移植等新型微生态干预手段的研究进展。未来需通过大样本、多中心、纵向研究及多组学整合分析,进一步明确肠道菌群-心肌轴的因果关系及转化潜力,为DCM的早期预警与精准干预提供新思路。

脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)是指涉及直径40～200 μm的脑小动脉、微动脉、毛细血管及微静脉的一组脑部症状和形态学改变。这种疾病多发于老年人群,对健康构成重大威胁。糖代谢紊乱是CSVD进展的关键独立危险因素,可通过胰岛素抵抗、慢性炎症反应及氧化应激等机制,诱发血管内皮功能障碍、血脑屏障破坏及脑白质损伤,加速CSVD进程。该文综述了糖代谢在CSVD中作用的研究进展,以期为CSVD的临床治疗提供理论依据,并为CSVD发病机制的探究提供线索。

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)作为一种严重的中枢神经系统疾病,常常导致患者自主神经、感觉和运动功能的损伤或丧失。虽目前治疗策略多样,但其治疗效果短暂且局限,无法达到显著效果。经皮脊髓电刺激(transcutaneous spinal cord electrical stimulation,TSCS)是一种新兴的神经调控技术,因其非侵入性、安全性高、可逆性、耐受性好且成本相对较低等优势,已成为SCI后康复治疗及神经科学研究中一种重要的非药物干预手段,在运动、痉挛、自主神经功能等方面疗效显著,在脊髓损伤后康复方向有很大的发展前景。目前国内TSCS的临床研究正在逐步深入,而临床应用仍缺乏客观和明确的理论依据,该文旨在综述TSCS的基本原理、潜在作用机制以及TSCS治疗SCI后功能障碍的应用研究进展,以期为TSCS治疗SCI后功能障碍的临床应用和科学研究提供参考。

骨关节炎是一种以关节软骨退行性病变为主要病理特征的慢性骨关节疾病。当前的临床治疗主要着眼于延缓疾病进展和控制临床症状,然而在促进软骨再生与修复方面仍面临挑战。近年研究表明,细胞焦亡在骨关节炎发病机制中发挥重要作用,通过NLRP3炎症小体激活和IL-1β等促炎因子释放,加剧关节炎症反应和软骨破坏。该综述系统阐述了蛋白翻译后修饰在调控细胞焦亡中的分子机制,重点关注泛素化、磷酸化、乙酰化和SUMO化等修饰通过动态调控NLRP3炎症小体组装及Gasdermin蛋白活化,调节细胞焦亡过程的分子机制。从而为深入理解骨关节炎发病机制和治疗策略提供新的理论视角。

随着全球人口老龄化进程加速,与年龄相关的血液系统疾病负担日益加重。炎性衰老即伴随衰老出现的慢性、系统性、低度炎症状态,已被证实与心脑血管疾病、神经退行性病变等多种老年性疾病相关,但其在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)这一骨髓衰竭性疾病中的具体作用机制尚未得到系统阐明。该文从炎性衰老及其发生机制、炎性衰老与再生障碍性贫血等方面展开综述,旨在揭示AA通过“骨髓微环境-造血干细胞-免疫系统”三重网络协同驱动AA患者炎性衰老的机制,为未来AA的防治策略提供借鉴和参考。