华中科技大学学报（医学版） ›› 2024, Vol. 53 ›› Issue (3): 328-337.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.23.06.008
摘要： 摘要:目的 探讨乙氧基二氢血根碱(ethoxydihydrosanguinarine,ESG)对结直肠癌细胞的抑制及具体分子机制。方 法 选用结直肠癌细胞系RKO和HRT-18。实验分为空白对照组和加药组(1.0、1.5、2.0μmol/LESG)。通过CCK-8 法、实时无标记细胞分析技术(realtimecellularanalysis,RTCA)及克隆形成实验检测ESG对细胞增殖能力的影响;以流 式细胞术、DAPI染色、JC-1线粒体膜电位和活性氧检测试剂盒检测ESG对细胞凋亡的影响;通过高内涵成像分析技术 及Transwell侵袭实验检测ESG对细胞侵袭、迁移的影响;Westernblot检测细胞凋亡及侵袭、迁移相关蛋白的表达,表 皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)以及下游 Akt/ERK信号通路蛋白的表达及磷酸化水平;通过 过表达EGFR和敲低EGFR探讨EGFR在ESG诱导结直肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖及侵袭迁移过程中的作用;通过 分子对接、靶点稳定性药物亲和反应实验以及微量热泳动实验检测ESG与EGFR的直接结合作用。结果 ESG显著抑 制结直肠癌细胞的增殖及克隆形成能力;ESG诱导结直肠癌细胞发生线粒体途径凋亡并抑制其侵袭、迁移能力;ESG直 接结合EGFR的激酶活性区而抑制其活性,进而下调其下游与肿瘤恶性进展相关的信号分子Akt、ERK的磷酸化水平。 结论 ESG靶向结合并抑制EGFR,进而通过其下游Akt/ERK信号通路抑制结直肠癌细胞侵袭、迁移并诱导线粒体途 径的细胞凋亡,有望成为靶向EGFR治疗结直肠癌的新型靶向药物。
中图分类号:
