华中科技大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 52 ›› Issue (5): 603-609.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.23.02.004
摘要: 摘要:目的 探讨环状 RNAcircIRAK3对滋养层细胞生物学行为的影响及其潜在分子调控机制。方法 采集19 例正常足月妊娠孕妇和25例早发型子痫前期(PE)孕妇的血液和胎盘组织样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析circIRAK3的表达量,受试者工作特征曲线(ROC)分析其对 PE的诊断价值。体外培养人滋养层细胞 HTR-8/SVneo,通过 CCK-8实验、划痕实验和 Transwell实验评估细胞的增殖、迁移 和 侵 袭 能 力;Westernblot实 验 检 测 上 皮 间 充 质 转 化 (EMT)相关蛋白表达。采用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验分析并验证circIRAK3的调控机制。结果 circIRAK3在 PE 患者血液和胎盘组织样本中高表达,且血液中circIRAK3的表达对 PE 具有一定诊断价值(AUC= 0.882)。细胞功能研究显示,过表达circIRAK3能够抑制 HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭。调控机制分析显示, miR-942-5p是circIRAK3的靶 miRNA,而脂多糖诱导肿瘤坏死因子α(LITAF)是 miR-942-5p的靶基因,circIRAK3可 作为 miR-942-5p的分子海绵上调 LITAF的表达;过表达 miR-942-5p或抑制 LITAF表达均能减弱circIRAK3对 HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 circIRAK3通过靶向 miR-942-5p上调 LITAF 的表达,从而抑制 HTR-8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭,提示circIRAK3可能参与 PE的发病。
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