摘要： 摘要:目的 白细胞介素6(interleukin6,IL-6)是心肌细胞损伤后心脏微环境中重要的细胞因子,可以提高心肌细 胞自身的增殖能力从而促进心脏修复。本研究旨在探索IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及其发育依赖性变 化。方法 用酶解法获得胚胎发育早期(earlyembryonicdevelopmentalstage,EDS)和发育晚期(lateembryonicdevelop mentalstage,LDS)的单个心肌细胞,心肌细胞分别在20%DMEM培养液中培养24h,然后再分别加入10ng/mL和50 ng/mLIL-6处理24h;用免疫荧光技术定位α-actinin+心肌细胞并统计BrdU+α-actinin+细胞核数目/α-actinin+细胞核 百分比和BrdU+α-actinin+单核心肌细胞数目/α-actinin+单核心肌细胞数目百分比,研究IL-6对心肌细胞增殖能力的影 响;利用Westernblot技术检测关键信号通路中关键蛋白的磷酸化水平。结果 10ng/mLIL-6不改变EDS心肌增殖 能力,但对LDS心肌细胞增殖能力有显著促进作用;50ng/mLIL-6显著抑制EDSBrdU+α-actinin+单核心肌细胞比例, 增加LDSBrdU+α-actinin+细胞核和BrdU+α-actinin+单核心肌细胞比例。10ng/mLIL-6和50ng/mLIL-6抑制EDS 心肌细胞Akt的磷酸化、对STAT3和ERK的磷酸化水平无显著影响;但在LDS,10ng/mLIL-6和50ng/mLIL-6抑制 心肌细胞的Akt的磷酸化,增加STAT3的磷酸化,对ERK的磷酸化水平无显著影响。检测这3个蛋白质的基础磷酸 化状态发现:STAT3、Akt和ERK的总蛋白量和磷酸化水平均呈发育依赖性下降。结论 IL-6影响胚胎心肌细胞的自 我更新能力,且具有发育依赖性和浓度依赖性。这可能与胚胎发育不同时期的关键蛋白及其磷酸化水平存在差异,因而 IL-6在不同发育阶段靶向不同的信号通路有关。这些发现为细胞替代疗法的研究在心肌微环境层面提供了重要线索。 

中图分类号: 

• R321