华中科技大学学报(医学版) ›› 2025, Vol. 54 ›› Issue (1): 36-44.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.24.07.036
摘要: 摘要:目的 探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响, 为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法 首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的 表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的相关性;通过基因干扰技术构建敲低NPM3的细胞模型(si-NPM3 H292),运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Westernblot)检测干扰效率;通过CCK-8及平板 克隆实验检测敲低NPM3对肺腺癌细胞增殖能力的改变;运用划痕实验和Transwell实验检测敲低NPM3对H292细 胞迁移能力的影响;运用qRT-PCR法和Westernblot检测与上皮间质转化(EMT)相关指标的mRNA及蛋白表达情况; 通过Westernblot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达水平。结果 TCGA数据库分析结果显示,NPM3在肺腺癌 中高表达且与肺腺癌患者临床病理分型密切相关,高表达NPM3的肺腺癌患者的生存预后显著差于低表达NPM3的患 者(P<0.05)。成功构建敲低 NPM3的细胞模型;敲低NPM3的表达降低了 H292细胞的增殖和迁移能力(均P< 0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中E-cadherin的 mRNA及蛋白表达水平均上调,N-cadherin的 mRNA及蛋 白表达水平均下调(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中Akt及PI3K的蛋白表达水平无明显变化,但其 磷酸化水平降低,而PTEN的蛋白表达水平有所上升(均P<0.05)。结论 NPM3在肺腺癌中高表达且与患者不良预 后相关,NPM3可能通过调控PI3K/Akt信号通路发挥对肺腺癌细胞增殖与迁移的促进作用。
中图分类号: