摘要： 摘要:目的 探讨长链非编码 RNA(lncRNA)SMAD 家族成员5反义 RNA1(SMAD5-AS1)在肺腺癌(LUAD)中的 表达及其对 LUAD细胞恶性生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 通过生物信息学网站对 LUAD 组织中lncRNASMAD5-AS1的表达进行分析;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测72例LUAD组织与邻近正常组织以及人 正常支气管上皮细胞(BEAS-2B)与人 LUAD 细胞(SPC-A-1、A549、H1299、LTEP-a-2)中lncRNASMAD5-AS1表达水 平。体外培养对数生长期的 SPC-A-1和 H1299细胞,分 为 SPC-A-1 对 照 组(SPC-A-1-Ctr组)、SPC-A-1+sh-NC 组、 SPC-A-1+sh-SMAD5-AS1组、H1299对照组(H1299-Ctr组)、H1299+LV5-NC 组、H1299+LV5-SMAD5-AS1组。采 用携带lncRNASMAD5-AS1敲除的短发夹 RNA(sh-SMAD5-AS1)和lncRNASMAD5-AS1过表达的重组质粒(LV5- SMAD5-AS1)及相应空载体的重组慢病毒转染细胞,qRT-PCR 验证转染效率;5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)测定细胞增 殖活性;划痕愈合实验和 Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Westernblot检测细胞上皮间质转化(EMT)和 Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路相关蛋白[E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、糖 原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin]的表达。结果 lncRNASMAD5-AS1在 LUAD 组织和细胞中呈高表达(均 P< 0.05);敲低lncRNASMAD5-AS1表达后,SPC-A-1细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及 N-cadherin、Vimentin和细胞核 β-catenin蛋白水平显著降低(均 P<0.05),E-cadherin和 GSK-3β蛋 白 水 平 显 著 升 高(均 P<0.05);过 表 达lncRNA SMAD5-AS1后,H1299细胞的增殖活性、侵袭和迁移能力及 N-cadherin、Vimentin和细胞核β-catenin蛋白水平显著升 高(均P<0.05),E-cadherin和 GSK-3β蛋白水平显著降低(均 P<0.05)。结论 lncRNASMAD5-AS1在 LUAD 中高 表达,其可能通过激活 Wnt/β-catenin通路促进 LUAD细胞增殖、迁移、侵袭和 EMT。 

中图分类号: 

• R734.2