人主动脉血管平滑肌细胞铁死亡模型的建立

doi:10.3870/j.issn.1672-0741.24.04.002

华中科技大学学报（医学版） ›› 2024, Vol. 53 ›› Issue (4): 427-432.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.24.04.002

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人主动脉血管平滑肌细胞铁死亡模型的建立

摘要:目的在人主动脉血管平滑肌细胞(HAVSMCs)中建立铁死亡模型并进行验证。方法主动脉平滑肌细胞来源于在华中科技大学同济医学院附属同济医院心脏大血管外科行心脏移植手术的供体主动脉弓组织,分别使用含 Imidazole ketone erastin (IKE)和胱氨酸缺失(CD)的培养液对 HAVSMCs进行铁死亡诱导,并使用 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)试剂盒、人乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒、细胞流式检测及免疫荧光染色来判断平滑肌细胞的铁死亡模型是否建立成功。结果对 HAVSMCs进行铁死亡诱导后,光学显微镜下可观察到细胞出现明显形态学改变,流式细胞学分析显示IKE/CD诱导下碘化丙啶(PI)染色阳性细胞所占比例明显升高;CCK-8和 LDH 检测结果显示,在IKE/CD 诱导下 HAVSMCs细胞活力明显降低,细胞损伤率明显增加,而铁死亡抑制剂ferrostatin-1则能逆转铁死亡诱导对细胞的毒性作用;BODIPY-C11细胞流式分析及4-羟基壬烯醛(4-HNE)免疫荧光染色显示,IKE/CD诱导的 HAVSMCs中脂质过氧化水平明显上升。结论该研究使用IKE以及胱氨酸缺失培养液成功建立了人主动脉血管平滑肌细胞铁死亡模型,为后续研究提供了实验基础。

收稿日期:2024-03-28 出版日期:2024-08-15 发布日期:2024-08-05
通讯作者: E-mail:xinfengtjh@126.com
作者简介:叶剑楠,男,1996年生,博士研究生,E-mail:920479420@qq.com
基金资助:
国家自然科学基金资助项目(No.82070488)

Establishment of Ferroptosis Model in Human Aortic Vascular Smooth Muscle Cells

Received:2024-03-28 Online:2024-08-15 Published:2024-08-05

摘要/Abstract

关键词: 主动脉, 血管平滑肌细胞, 铁死亡 ,

中图分类号:

R654.31

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