华中科技大学学报(医学版) ›› 2022, Vol. 51 ›› Issue (1): 44-49.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2022.01.008
摘要: 摘要:目的 探讨盐酸石蒜碱(lycolinehydrochloride,LH)对人结直肠癌细胞 SW620细胞增殖、凋亡的影响及其可 能的作用机制。方法 不同剂量的 LH 处理SW620细胞(LH-L组、LH-M 组、LH-H 组),同时将正常培养的 SW620细 胞记为 Con组;实验分组:si-NC 组、si-circSEPT9组、LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组;利用 MTT 法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)法检测circSEPT9、miR-654-5p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circSEPT9与 miR-654-5p的靶向关系;Westernblot法检 测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleavedCaspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved Caspase-9)蛋白表达量。结果 与 Con组比较,LH-L组、LH-M 组、LH-H 组细胞增殖抑制率、miR-654-5p的表达量、细 胞凋亡率和cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9蛋白水平升高(均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均 P<0.05),circSEPT9的表达量降低(均P<0.05),且呈剂量依赖性;circSEPT9可靶向调控 miR-654-5p的表达;与si-NC 组比较,sicircSEPT9组 miR-654-5p的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9蛋白水平升高 (均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均P<0.05);与 LH 组比较,LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组 miR-654-5p的表达量、细胞 增 殖 抑 制 率、细 胞 凋 亡 率 和 cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9 蛋 白 水 平 降 低 (均 P< 0.05),细胞克隆形成数增多(均P<0.05)。结论 盐酸石蒜碱可通过调控circSEPT9/miR-654-5p表达而抑制结直肠癌 细胞增殖、克隆形成及诱导细胞凋亡。
中图分类号: