摘要： 摘要:目的 探究高脂是否通过促进脂肪酸去饱和酶1(Fads1)基因启动子区甲基化抑制其表达。方法 通过高脂 饮食喂养大鼠构建高三酰甘油血症模型,采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠体 内 Fads1表达水平;采用 BSP克隆测序法(bisulfite sequencing PCR)评估 Fads1启动子区甲基化水平,并分析其与大鼠 血浆三酰甘油含量之间的关系;体外培养大鼠肝细胞系 BRL-3A,利用医用脂肪乳和5-氮杂胞苷(5-Aza,DNA 甲基转移 酶抑制剂)干预细胞,检测并分析 Fads1启动子区甲基化水平与 Fads1表达的相关性;构建 Fads1启动子区报告基因质 粒,利用 M.SssI(CpG甲基转移酶)干预细胞后,检测 Fads1启动子区转录活性。结果 相较于对照组,高脂饮食组的大 鼠血浆及脂肪乳干预组的 BRL-3A 细胞中三酰甘油含量显著升高,Fads1表达水平明显降低。Fads1启动子区 CpG 岛 DNA 甲基化水平在高脂饮食组大鼠肝脏组织中显著升高,与其血浆三酰甘油含量呈正相关。相比于对照组,5-Aza能上 调 BRL-3A 细胞中 Fads1mRNA 水平,而 M.SssI可以使 Fads1启动子区转录活性显著降低。结论 高脂可促进 Fads1 启动子区甲基化修饰,显著抑制大鼠肝脏 Fads1的表达。该研究揭示了 Fads1基因表达的表观遗传调控模式。 

中图分类号: 

• R589.2