华中科技大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 52 ›› Issue (2): 137-144.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2023.02.001
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摘要: 摘要:目的 研究乳脂球表皮生长因子8(milk fat globule-epidermal growth factor 8,MFG-E8)对主动脉瓣膜间质细胞(aortic valve interstitial cells, AVICs)成骨样分化的影响,并寻找调控其表达的微小 RNA(microRNA,miRNA),探讨 其在钙化性主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease,CAVD)发病机制中的作用。方法 收集因 CAVD 行主动脉瓣置 换手术患者的钙化瓣膜标本及因扩张型心肌病行心脏移植手术患者的非钙化瓣膜标本,通过免疫 组 织 化 学 染 色 及 Western blot实验检测 MFG-E8 在钙化瓣膜及非钙化瓣膜中的表达;分离 AVICs进行体 外 培 养,通 过 小 干 扰 RNA (small interfering RNA,siRNA)沉默 MFG-E8及成骨培养液(osteogenic medium,OM)干预,研究 MFG-E8在 AVICs成 骨样分化中的作用;TargetScan Human网站预测调控 MFG-E8表达的 miRNA 并对其功能进行检测;real-timePCR检测 miRNA 在钙化及非钙化瓣膜中的表达差异。结果 与非钙化瓣膜相比,钙化瓣膜中 MFG-E8表达显著上调;以siRNA 沉默 MFG-E8显著抑制了 OM 诱导的 AVICs成骨样分化;miR-214-5p可影响 MFG-E8表达从而调控 AVICs成骨样分 化;相较于非钙化瓣膜,钙化瓣膜中 miR-214-5p表达显著下调。结论 miR-214-5p通过调控 MFG-E8表达参与主动脉 瓣膜间质细胞成骨样分化,在 CAVD发病机制中可能发挥重要作用。
中图分类号: