目的 探究CDC40在结直肠癌组织中的表达特征及其与临床病理特征的相关性,为结直肠癌的早期诊断、靶向治疗及预后评估提供依据。方法 采用免疫组织化学染色评估70例结直肠癌患者组织中CDC40表达水平,并分析其与临床病理特征关系;运用R软件包进行生存曲线和多因素预后分析;使用结直肠癌细胞系SW620和Caco-2进行细胞培养、CDC40质粒转染、细胞增殖实验、蛋白质印迹及裸鼠成瘤实验,以验证CDC40对细胞增殖的影响,实验数据采用IBM SPSS Statistics Version 22软件进行统计分析。结果 70例患者中CDC40高表达组占51.4 %,其表达高低与肿瘤分化程度、T分期、淋巴结转移及增殖指数Ki67水平相关,与性别、年龄、远处转移无关;多因素和单因素生存分析显示CDC40高表达与患者更差的生存预后相关;体外实验中过表达CDC40促进结直肠癌细胞系增殖;裸鼠成瘤实验表明过表达CDC40促进肿瘤生长。结论 CDC40在结直肠癌发生发展中起重要作用,可作为潜在分子标志物和治疗靶点。

目的 解析P21激活激酶6(P21-activated kinase 6,PAK6)在乳腺癌中的表达、临床意义、潜在的生物学功能和初步的作用机制,并评估其作为乳腺癌预后标志物和治疗靶点的可行性。方法 利用癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)的乳腺癌表达谱数据,分析PAK6的表达及其与患者预后的关系。基于转录组数据和单细胞转录组测序数据分析探索PAK6的潜在生物学功能。在人乳腺癌细胞系MCF7和MDA-MB-231中构建PAK6过表达和敲低模型,利用JC-1染色、细胞凋亡检测和蛋白质印迹法分析PAK6对细胞凋亡和DNA损伤应答的影响。结果 PAK6在乳腺癌组织中显著高表达,且其高表达与患者的总生存期、无进展生存期、疾病特异性生存期和无复发生存期呈负相关(P<0.05)。GSEA结果显示PAK6高表达组富集于DNA复制、细胞周期调控和DNA损伤修复等相关通路。单细胞分析发现PAK6主要在Malignant_C25、Malignant_C28和Malignant_C3恶性肿瘤细胞亚群中高表达,且Malignant_C25亚群富集了细胞周期和DNA复制相关通路,并可能具有向其他细胞类型转变的潜能。体外实验证实,PAK6过表达抑制乳腺癌细胞凋亡,并升高DNA损伤标志物γH2AX的表达水平;而PAK6敲低则促进细胞凋亡并下调γH2AX的表达水平。结论 PAK6在乳腺癌中高表达并与不良预后相关,其可能通过促进DNA复制、加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡和调控DNA损伤应答发挥促癌作用。PAK6有望成为乳腺癌的潜在预后标志物和治疗靶点。

目的 探讨高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)抑制黑色素细胞糖蛋白100(glycoprotein 100,gp100)和Nrf-2/HO-1/GPX4促进细胞铁死亡并放大炎症级联在白癜风发病中的作用及机制。方法 24只5~6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(对照组、模型组、模型+HMGB1处理组和模型+gp100降解肽处理组),每组6只。建立对苯二酚诱导的白癜风小鼠模型。蛋白质印迹检测小鼠皮肤组织HMGB1、gp100、铁死亡相关因子GPX4和SLC7A11、内质网应激相关因子PERK、p-PERK、ATF6和GRP78,以及Nrf-2和HO-1表达水平。ELISA测定小鼠皮肤组织TNF-α、IL-6和MDA的水平。DHE荧光探针法测定小鼠皮肤组织ROS水平。对小鼠皮肤组织进行苏木精-伊红(HE)染色和组织病理学分析。结果 与对照组比较,模型组小鼠皮肤脱色区域评分升高(P<0.01),ROS水平增加,TNF-α、IL-6及MDA水平升高,HMGB1、SLC7A11及内质网应激相关因子p-PERK、ATF6和GRP78表达水平升高(P<0.01),gp100和GPX4表达水平降低(P<0.01);表皮部细胞排列松散、紊乱,组织间隙增大。HMGB1处理组Nrf-2、HO-1、gp100表达降低(P<0.05),p-PERK、ATF6和GRP78表达升高(P<0.05);gp100降解肽处理组ROS水平、MDA水平和SLC7A11相对表达水平升高(P<0.05),且表皮细胞排列更为松散、黑色素细胞大量凋亡,组织间隙较大。结论 HMGB1可能通过介导内质网应激和炎症级联,参与抑制黑色素细胞gp100的表达,下调Nrf-2/HO-1/GPX4促进黑色素细胞铁死亡。

目的 探讨海藻酸盐-银-S-亚硝基谷胱甘肽纳米颗粒(nanoparticles,NPS)凝胶治疗幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染小鼠模型的抗菌活性。方法 制备海藻酸盐纳米颗粒(alginate NPs)凝胶,海藻酸盐-银纳米颗粒(alginate-Ag NPs)凝胶和海藻酸盐-银-S-亚硝基谷胱甘肽纳米颗粒(alginate-Ag-GSNO NPs)凝胶。扫描电镜成像Ag-GSNO纳米颗粒凝胶表面特征。建立H.pylori感染小鼠模型。40只雄性C57BL/6小鼠,随机分为4组,每组10只:vehicle组,model组,alginate-Ag NPs凝胶组,alginate-Ag-GSNO NPs凝胶组。血琼脂培养并进行小鼠胃上皮组织H.pylori感染的菌落形成单位(colony forming units,CFU)计数。HE染色和组织病理学分析小鼠胃上皮组织炎症和损伤。qPCR法测定小鼠胃上皮组织H.pylori感染阳性标志物ureB基因的表达水平。ELISA法测定炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平。蛋白质印迹法测定NLRP3炎症小体的表达水平。结果 海藻酸盐-银纳米颗粒具有球形形貌,粒径范围为100~200 nm。GSNO颗粒呈球形,略有凹陷,尺寸为μm级。与alginate-Ag NPs凝胶组比较,Alginate-Ag-GSNO NPs凝胶组显著降低了小鼠胃上皮组织感染的H.pylori的CFU(P<0.05);小鼠胃上皮组织HE染色评分降低(P<0.05),胃上皮细胞排列较为整齐,存在一定量多形核细胞浸润、淋巴样聚集体和H.pylori感染阳性细胞;小鼠胃上皮组织H.pylori感染阳性标志物ureB基因的表达水平降低(P<0.05);炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平降低(P<0.05);NLRP3炎症小体的相对表达水平降低(P<0.05)。结论 相比较于海藻酸盐-银纳米颗粒凝胶,海藻酸盐-银-S-亚硝基谷胱甘肽纳米颗粒凝胶能更有效地抑制H.pylori 感染小鼠模型H.pylori的定植和对胃上皮组织的损伤。

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)CRNDE通过细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠巨噬细胞焦亡和M1型极化的影响。方法 构建UC小鼠模型,检测结肠长度,进行疾病活动度指数评分以验证模型;另将RAW264.7细胞分为Ctrl组、pcDNA-null组、pcDNA-CRNDE组、pcDNA-CRNDE+LY3214996组。qRT-PCR、蛋白质印迹检测lncRNA CRNDE及cleaved-Caspase-1、cleaved-GSDMD、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达水平,流式细胞术检测F4/80⁺CD86⁺巨噬细胞比例。结果 模型组疾病活动度指数评分升高、结肠缩短,lncRNA CRNDE及cleaved-Caspase-1、cleaved-GSDMD、p-ERK1/2表达上调,F4/80⁺CD86⁺巨噬细胞比例增加(P_均<0.05);在RAW264.7细胞中,pcDNA-CRNDE组的lncRNA CRNDE及cleaved-Caspase-1、cleaved-GSDMD、p-ERK1/2表达较pcDNA-null组上调,加入LY3214996后lncRNA CRNDE及cleaved-Caspase-1、cleaved-GSDMD、p-ERK1/2表达下调(P_均<0.05)。结论 lncRNA CRNDE在UC小鼠中通过激活ERK1/2途径,促进巨噬细胞焦亡和M1型极化,是治疗UC的潜在靶点。

目的 分析金丝桃苷对膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BLCA)细胞增殖的抑制作用和机制。方法 CCK-8和克隆形成实验检测金丝桃苷对BLCA增殖的影响;蛋白质印迹检测不同浓度和时间金丝桃苷干预下细胞中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)表达水平;检测金丝桃苷靶向抑制NOX4对细胞增殖以及mTOR、AKT、S6、NOX4蛋白表达的影响。结果 金丝桃苷组细胞增殖能力、细胞克隆数、移植瘤组织体积和质量、Ki67蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。金丝桃苷作用时间越长或浓度越高,NOX4的表达水平下降越明显(P<0.05)。与对照组比较,金丝桃苷组p-mTOR、p-S6、p-AKT和NOX4表达和克隆细胞数明显下降,NOX4过表达组和金丝桃苷+NOX4过表达组上述指标均明显升高(P<0.05)。结论 金丝桃苷通过抑制NOX4表达抑制BLCA增殖。

目的 探讨肝配蛋白B4(erythropoietin-producing hepatocyte receptor B4,EPHB4)对骨肉瘤恶性进展的调控与作用机制。方法 蛋白质印迹法检测U2OS、SaOS2-LM7、SaOS2、143B中EPHB4的表达变化。将SaOS2-LM7分为对照组、si-NC组、si-EPHB4组、sEPHB4(可溶性EPHB4封闭抗体)组,利用CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖,利用流式细胞术检测细胞凋亡,利用Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭迁移能力。用红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)标记的SaOS2-LM7构建稳定沉默EPHB4的细胞(EPHB4-si-RNA-RFP)。在体内实验中,将24只荷瘤裸鼠分为2组,即control-RFP组和EPHB4-siRNA-RFP组。通过小动物活体成像仪检测1~4周后癌细胞的肺转移情况。免疫组织化学法分析4周后肿瘤组织中EPHB4、分化簇33(cluster of differentiation 33,CD33)、细胞周期蛋白D1(CYCLIN D1)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、MMP-14、β-CATENIN的表达。结果 与U2OS比较,EPHB4在SaOS2-LM7、SaOS2、143B中的表达增加(P_均<0.05)。SaOS2-LM7细胞实验中,与对照组比较,sEPHB4组和si-EPHB4组的EPHB4表达、细胞的增殖活力和EdU阳性率显著降低,凋亡率显著增加,迁移率和侵袭率显著降低(P_均<0.05)。此外,与对照组比较,sEPHB4组和si-EPHB4组的β-CATENIN、CYCLIN D1、MMP-9、MMP-14的相对表达水平也显著降低(P_均<0.05)。在体内实验中,EPHB4-siRNA-RFP组在3周和4周的肺部转移率显著低于control-RFP组(P_均<0.05)。EPHB4-siRNA-RFP组的肿瘤组织中EPHB4、CD33、CYCLIN D1、MMP-9、MMP-14、β-CATENIN的表达均下调(P_均<0.05)。结论 沉默EPHB4能显著抑制骨肉瘤细胞中WNT/β-CATENIN信号通路的激活,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

目的 基于网络药理学方法及实验室验证分析槐果碱对骨肉瘤细胞的作用机制。方法 网络药理学预测槐果碱作用靶点;生物信息学分析5-羟色胺受体3A(HTR3A)与骨肉瘤预后的关系;在骨肉瘤细胞U2OS、MG63中敲低HTR3A,检测其对增殖、克隆、凋亡及细胞周期相关蛋白质的影响。观察槐果碱对骨肉瘤细胞及移植瘤生长的抑制作用,并验证HTR3A在其中作用。结果 HTR3A被预测为槐果碱的关键靶点,其高表达与骨肉瘤患者不良预后相关(log-rankP<0.05,P<0.05);在骨肉瘤细胞中HTR3A显著高表达,敲低HTR3A可抑制细胞增殖与克隆,诱导细胞周期阻滞与凋亡(P<0.05);槐果碱能呈浓度依赖性地下调HTR3A蛋白表达(P<0.05),并在体外和体内有效抑制骨肉瘤生长(P<0.05),过表达HTR3A则可逆转槐果碱对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论 槐果碱可通过抑制HTR3A表达,进而抑制骨肉瘤细胞增殖、克隆并促进其凋亡。HTR3A是槐果碱发挥抗骨肉瘤作用的潜在关键靶点。

目的 探究核仁蛋白14(nucleolar protein 14,NOP14)过表达对卵巢癌SKOV3细胞增殖与迁移的影响及机制。方法 检测卵巢癌细胞系(SKOV3、A2780、HO-8910、OVCAR)中NOP14的表达水平。SKOV3细胞中转染pcDNA-NOP14质粒以构建NOP14过表达细胞系。细胞克隆形成实验和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine,EdU)染色检测细胞增殖能力。无血清成球培养分析肿瘤干细胞特性。流式细胞术检测CD133阳性细胞比例。细胞形态学观察及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)检测评估EMT进程。蛋白质印迹和RT-qPCR检测核受体相互作用蛋白1(nuclear receptor interacting protein 1,NRIP1)及Wnt、β-catenin的表达水平。结果 在卵巢癌细胞系中NOP14 mRNA和蛋白表达均显著低于正常卵巢上皮细胞。NOP14过表达后抑制SKOV3细胞增殖、干细胞特性及EMT转化(间质标志物N-cadherin、Vimentin下调,上皮标志物E-cadherin上调),以及NRIP1、Wnt和β-catenin的表达水平。结论 NOP14可负向调控NRIP1和Wnt及β-catenin的表达,并抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、干细胞特性及EMT进程。

白念珠菌是人类常见的条件致病真菌,其引起的侵袭性感染死亡率高,临床防治面临严峻挑战。日益严重的耐药问题是治疗失败的主要原因之一,因此,揭示其耐药机制并寻找新的药物靶点迫在眉睫。文章围绕MAPK信号通路在白念珠菌药物耐受与宿主互作中的双向调控机制进行综述:一方面,揭示MAPK信号通路如何介导白念珠菌与宿主的相互作用,如免疫逃逸、炎症反应等方式;另一方面,揭示MAPK信号通路介导的白念珠菌耐药机制,如细胞壁合成与重塑、菌丝形成、氧化应激以及生物膜形成等机制,及其用药研究进展,旨在为深入理解白念珠菌的致病性与耐药性提供新的视角,并为针对MAPK通路开发新型抗真菌策略提供理论依据。

转运RNA衍生的小RNA(tRNA-derived small RNA,tsRNA)是由前体或成熟tRNA经特异性核酸内切酶切割产生的非编码小RNA,具有多种生物学功能。在妇科疾病领域,tsRNA被证实在卵巢癌、子宫内膜癌、子宫内膜异位症等疾病中差异表达,并与疾病的发生、发展及预后密切相关。文章通过总结tsRNA在妇科疾病中的研究进展,旨在为其机制研究、早期诊断和精准治疗提供新思路。

蛛网膜下腔出血是一种神经系统的急危重症。蛛网膜下腔出血后引发的脑损伤机制复杂多样,其中神经元的死亡是关键环节。文章综述了近年来关于蛛网膜下腔出血后神经元死亡机制的研究,涵盖了神经元的凋亡、焦亡、自噬、坏死性凋亡及铁死亡等多个方面,并初步探讨了相关干预措施,旨在为蛛网膜下腔出血的临床治疗提供新的思路。

肠道屏障是人体与外界环境交互的关键防线,其功能衰退是衰老过程的重要特征。随着年龄的增长,肠道屏障的结构和功能逐渐受损,表现为肠道通透性增加、免疫功能下降以及肠道微生物群失调,涉及多种生理、细胞和分子多个层面。这些变化不仅影响局部肠道健康,还可能引发全身性的炎症反应和免疫功能衰退,进而加速衰老进程。文章综述了肠道屏障衰老的特征、机制及其对全身健康的影响,并探讨了潜在的干预策略。

大语言模型(large language model,LLM)为医学教育带来新机遇。文章考察LLM在病例生成、个性化教学及智能评估方面的技术基础与应用手段。借助合理挑选模型、提示词,开展多模态融合与学术校正,LLM可生成仿真教学案例,利于临床推理训练;将学生画像与学习行为结合,LLM可实现路径推荐、内容定制的操作,提升教学适配度;LLM助力构建涵盖医学准确性、逻辑结构与因果推理方面的多维评分体系,产出个性化反馈内容。当前LLM仍面临幻觉与知识更新滞后等挑战,未来应加强人机协同、数据安全与标准资源建设,从而推动医学教育向智能化、规范化发展。