目的 探究微小 RNA 502-3p (micro RNA 502-3p, miR-502-3p) 通过靶向结合 Casitas B 细胞淋巴 瘤 (Casitas B-cell lymphoma, CBL) 参与卵巢癌增殖和凋亡的机制。 方法 下载 GSE66957、 GSE119056、 TCGA_ OV 卵巢癌相关数据矩阵, 分析 miR-502-3p、 CBL 与卵巢癌的关系; 构建过表达 miR-502-3p、 CBL 的 SKOV3 和 HO8910 细胞系, 分别采用细胞计数试剂盒 ( cell counting kit 8, CCK-8)、 克隆形成实验、 流 式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况; 通过荷瘤裸鼠实验, 观察过表达 CBL 对肿瘤生长的影响; 验证 miR502-3p 与 CBL 的靶向关系。 结果 生物信息学分析显示, 卵巢癌组织中 CBL 水平高于癌旁组织, miR-502- 3p 水平低于癌旁组织, CBL 水平与患者预后、 细胞增殖基因表达有关 (P< 0. 05)。 miR-502-3p 与 CBL 存在 靶向关系, 与 Vector 组比较, CBL 组肿瘤的体积及重量增加 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-502-3p 组 SKOV3、 HO8910 细胞中 CBL 蛋白表达、 细胞活力、 克隆数降低, 细胞凋亡率升高 (P< 0. 05), 但 CBL 可逆转上述细胞变化。 结论 miR-502-3p 可通过靶向下调 CBL 抑制卵巢癌细胞的增殖, 并诱导其凋亡。 

目的 研究基因重组纤溶酶原 (Kringle 5, K5) 对小鼠的血管生成的抑制作用。 方法 以体外 培养的小鼠内皮细胞为研究对象, 利用划痕实验和黏附能力测定实验观察重组 K5 对内皮细胞迁移、 黏附 能力的影响; 利用体外血管生成体系、 创伤愈合和鸡胚尿囊膜 ( chicken embryo allantoic membrane, CAM) 血管生成能力实验, 检测 K5 对血管生成作用的影响。 结果 200 nmol / L K5 显著抑制内皮细胞的迁移、 黏 附以及新生血管的生长长度。 并且 K5 在 2 ~ 18 mg / kg 浓度范围内对小鼠创伤愈合具有明显的抑制作用。 此 外, 6、 12 与 25 mg / L K5 显著抑制 CAM 血管生成, 25 mg / L K5 的抑制作用最强。 结论 K5 能明显抑制血 管生成, 为临床抑制血管生成治疗提供理论依据。

目的 分析 miR-495-3p / Wnt 抑制因子 (Wnt inhibitor factor 1, WIF1) / Wnt 信号通路轴调节视网 膜母细胞瘤 (retinoblastoma, RB) 细胞增殖、 迁移和侵袭。 方法 生物信息学分析 WIF1 的差异表达及与 临床不良表型之间的关系, 并预测 miRNA 靶标; 双荧光酶素报告实验验证。 构建稳定过表达 WIF1 的 RB 细胞 (Vector 组、 WIF1 组)。 构建稳定过表达 miR-495-3p 的 RB 细胞 (miR-NC 组、 miR-495-3p 组和 miR495-3p + WIF1 组)。 Western 印迹检测 WIF1 蛋白及 Wnt 通路相关蛋白表达, 并进行体外功能试验。 裸鼠移 植瘤实验分析移植瘤体积重量。 免疫组化分析 WIF1 在 RB 组织中水平。 结果 WIF1 低表达, 与迁移、 侵袭 有关, 为 miR-495-3p 靶标, 双荧光酶素报告实验证实 WIF1 是 miR-495-3p 作用靶点。 WIF1 过表达抑制细胞增 殖、 迁移和侵袭, 影响细胞周期, 诱导凋亡。 体内实验显示 WIF1 在 RB 组织中过表达, 其过表达抑制瘤体生 长。 过表达 WIF1 下调 β-catenin、 c-Myc 蛋白水平 (P< 0. 05)。 过表达 miR-495-3p 下调 WIF1 蛋白水平, 上调 β-catenin 和 c-Myc 蛋白水平, 促进细胞增殖迁移、 迁移和侵袭, 抑制细胞凋亡 (P< 0. 05), 增加 WIF1 表达 可逆转 miR-495-3p 的作用 (P< 0. 05)。 结论 miR-495-3p 靶向 WIF1 通过 Wnt 信号通路抑制 RB 细胞增殖、 迁移和侵袭, 并诱导凋亡。

目的 探讨 miR-142-5p 靶向髓细胞白血病因子 1 (myeloid cell leukemin-1, MCL-1) 对人胆管癌 细胞 QBC939 上皮间质化 (epithelial-mesenchymal transition, EMT) 及吉西他滨 (Gemcitabine, GEM) 化疗 敏感性的影响。 方法 体外培养胆管癌细胞 QBC939 及人正常胆管上皮细胞 HIBEC, 随机分为对照组、 miR-142-5p 阴性对照 (NC) 组和 miR-142-5p 模拟物 (mimics) 组。 实时荧光定量 PCR (RT-qPCR) 法检 测各组 QBC939 细胞和 HIBEC 细胞中 miR-142-5p 和 MCL-1 mRNA 表达情况; 划痕实验和 Transwell 实验分别 检测各组 QBC939 细胞迁移和侵袭变化情况; 蛋白印迹分析法检测各组 QBC939 细胞上皮型钙黏蛋白 (E-cadherin)、 神经性钙黏附蛋白 (N-cadherin) 和波形蛋白 (Vimentin) 表达变化; 双荧光素酶报告实验验证 miR-142-5p 与 MCL-1 的靶向关系; 使用浓度为 0. 625 μg / mL GEM 处理转染 miR-142-5p 后的 QBC939 细胞, 同时设置对照组, MTT 检测细胞增殖, Annexin V-FITC/ PI 试剂盒检测细胞凋亡。 结果 与人正常胆管细胞 HIBEC 相比, 胆管癌细胞 QBC939 中 miR-142-5p 呈低表达, MCL-1 mRNA 呈高表达。 经 Targetscan Human 数据库预测显示, miR-142-5p 与 MCL-1 mRNA 3′UTR 区有结合位点。 与 MCL-1-3′UTR-WT + miR-142-5p NC 组比较, MCL-1-3′UTR-WT + miR-142-5p mimics 组荧光素酶活性降低 (P< 0. 05)。 与对照组和 miR-142-5p NC 组相比, miR-142-5p mimics 组 QBC939 细胞 miR-142-5p 表达水平、 E-cadherin 蛋白表达水平显著升高 (P< 0. 05), MCL-1 mRNA 和蛋白表达、 N-cadherin、 Vimentin 蛋白表达水平显著降低 (P< 0. 05), 细胞迁 移、 侵袭能力显著减弱 (P< 0. 05); 与 miR-142-5p NC + GEM 组相比, miR-142-5p mimics + GEM 组 QBC939 细胞存活率显著降低, 凋亡率增加 (P< 0. 05)。 结论 过表达 miR-142-5p 可通过靶向抑制 MCL-1 表达从而 抑制人胆管癌细胞的 EMT、 增加胆管癌细胞对 GEM 的化疗敏感性。 

目的 探讨 miR-130a-3p 通过靶向糖代谢关键酶 PDK1 对肝癌细胞糖代谢以及增殖迁移的影响, 为肝癌的诊断及治疗提供新的方向。 方法 qRT-PCR 技术检测肝癌的临床组织和细胞中 miR-130a-3p 的表 达, 克隆形成、 CCK-8、 Transwell 和细胞划痕实验检测细胞的增殖和迁移; Western 印迹检测相关蛋白的表 达; 乳酸检测试剂盒, ATP 检测试剂盒和 PDH 活性检测试剂盒分别检测细胞中乳酸的生成、 ATP 的生成和 PDH 的活性; 双荧光素酶报告基因实验验证 miR-130a-3p 与 PDK1 3′UTR 靶向结合。 结果 在肝癌组织和 细胞中 miR-130a-3p 呈低表达, 并与患者肿瘤组织的大小和 TNM 分期有关; 过表达 miR-130a-3p 能够增强 肝癌细胞中 PDH 活性, 抑制乳酸和 ATP 的生成, 从而抑制肝癌细胞的增殖和迁移; miR-130a-3p 可以靶向 调控 PDK1; 抑制 PDK1 的表达, 能够逆转 miR-130a-3p 过表达对细胞增殖和迁移能力的增强, 此外对 PDH 活 性、 乳酸和 ATP 的影响也被逆转。 结论 miR-130a-3p 通过靶向调控 PDK1 影响肝癌细胞糖酵解及恶性进展。 

目的 探究龟龄集对阿尔茨海默病 (Alzheimer’s disease, AD) 小鼠皮层和海马 Fas/ FasL 表达及 神经元凋亡的影响。 方法 构建 AD 小鼠模型, 小鼠随机分为对照组、 模型组、 多奈哌齐组及龟龄集低、 中、 高剂量组。 Morris 水迷宫检测干预前后小鼠的学习记忆能力; HE 染色检测小鼠皮层、 海马神经元病理 学改变情况; TUNEL 染色检测神经元凋亡情况; Western 印迹及 Real time PCR 分别检测 Fas、 FasL 的蛋白 表达水平及 mRNA 表达水平。 结果 与模型组比较, 龟龄集各组和多奈哌齐组小鼠学习记忆能力明显提高 (P< 0. 05), 皮层和海马神经元病理学损害及神经元凋亡改善 (P< 0. 05), Fas、 FasL 蛋白和 mRNA 水平下 降 (P< 0. 05)。 结论 龟龄集可能通过抑制 Fas/ FasL 表达抑制 AD 模型小鼠皮层、 海马神经元凋亡, 并改 善其学习记忆能力。 

目的 探讨舒芬太尼对宫颈癌细胞 SiHa 自噬、 凋亡及细胞增殖的影响。 方法 采用 CCK8 法检 测舒芬太尼梯度浓度 (3. 125、 6. 25、 12. 5、 25、 50、 100、 200、 400、 800 nmol / L) 作用下宫颈癌细胞 SiHa 细胞活力, 选取 4 个舒芬太尼作用浓度 (0、 25、 50、 100 nmol / L) 处理 SiHa 细胞 24 h, 采用流式细胞法、 克隆形成实验检测 SiHa 细胞凋亡及增殖情况, 免疫荧光法检测各组细胞 LC3 水平, 采用 Western 印迹检测 自噬相关蛋白 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 与增殖、 凋亡相关蛋白 P21、 Survivin 水平, 采用 RT-PCR 检测 细胞增殖相关基因 Ki67、 PCNA 表达水平。 结果 随着舒芬太尼处理浓度的增加, SiHa 细胞活力逐渐降低。 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞的 LC3Ⅱ/ LC3Ⅰ、 Beclin1、 ATG7 水平显著高于 0 nmol / L 舒芬太 尼处理, 免疫荧光检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 LC3 荧光信号高于 0 nmol / L 舒芬太尼处 理, 流式细胞仪检测结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞凋亡高于 0 nmol / L 舒芬太尼处理。 克隆形成实验结果显示 50、 100 nmol / L 舒芬太尼处理下 SiHa 细胞克隆形成率降低, Survivin 水平与 Ki67、 PCNA 表达水平降低, 而 P21 水平升高。 结论 舒芬太尼对宫颈癌细胞自噬、 凋亡有促进作用, 对细胞增 殖有抑制作用, 可能与调节细胞自噬、 凋亡、 增殖相关蛋白或基因水平有关。 

目的 探究微小 RNA-101-3p (miR-101-3p) 靶向肿瘤坏死因子受体相关因子 6 ( tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6) 对肺炎链球菌 (Streptococcus pneumoniae, SP) 诱导的肺泡上皮细 胞凋亡的影响。 方法 培养 A549 细胞, 双荧光素酶报告基因检测 miR-101-3p 与 TRAF6 靶向关系。 实时荧 光定量逆转录聚合酶链反应 (qRT-PCR) 检测 miR-101-3p 和 TRAF6 mRNA 表达, Western 印迹检测 TRAF6、 活化型半胱天冬酶-3 (C-caspase-3) 和 C-caspase-9 蛋白水平, 流式细胞仪检测细胞凋亡率, 酶联免疫吸附 (ELISA) 法检测白细胞介素-6 ( IL-6) 和 IL-10 含量。 结果 miR-101-3p 靶向负调控 TRAF6 (P< 0. 05)。 SP 诱导后 miR-101-3p 表达降低, TRAF6 表达升高; IL-6 含量增高; IL-10 含量降低; 细胞凋亡率和 Ccaspase-3、 C-caspase-9 水平均升高 (P< 0. 05)。 过表达 miR-101-3p 可改善 SP 引起的 A549 细胞损伤; 过表 达 TRAF6 部分逆转 miR-101-3p 过表达对 SP 诱导的 A549 细胞的保护作用 (P< 0. 05)。 结论 miR-101-3p 靶向 TRAF6 保护肺泡上皮细胞免受 SP 诱导的细胞凋亡和炎性损伤。

目的 检测糖尿病肾病 ( diabetic nephropathy, DN) 患者血清长链非编码 RNA HOX 转录反义 RNA (long non-coding RNA HOX transcript antisense RNA, LncRNA HOTAIR) 的表达情况, 探讨其对 DN 诊 断的价值。 方法 选取 2020 年 1 月 ~ 2021 年 1 月在徐州医科大学附属淮安医院内分泌科和肾内科建卡并住 院治疗的 80 例Ⅱ型糖尿病肾病患者 (DN 组)、 80 例无肾脏损害的Ⅱ型糖尿病患者 (T2DM 组) 为研究对 象, 再选择同期于徐州医科大学附属淮安医院体检中心就诊的 75 例非糖尿病健康者作为对照组。 采用实时 荧光定量 PCR (qRT-PCR) 法检测受试者血清中 LncRNA HOTAIR 表达水平。 采用 ROC 曲线评价血清 LncRNA HOTAIR 对于 DN 的临床诊断价值。 结果 LncRNA HOTAIR 在 T2DM 及 DN 患者中的表达较健康对照 组明显升高 (P< 0. 05), 且 DN 组中 LncRNA HOTAIR 水平显著高于 T2DM 组。 DN 患者血清 LncRNA HOTAIR 随着尿蛋白含量的增加而升高, 其差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 LncRNA HOTAIR 的表达与尿蛋 白含量、 空腹血糖、 糖化血红蛋白、 甘油三脂及低密度脂蛋白的表达量呈正相关关系 (P< 0. 05), 而与肾 小球滤过率呈负相关关系 (P< 0. 05)。 血清 LncRNA HOTAIR 对 DN 诊断的曲线下面积 (AUC) 为 0. 885 (95 % CI: 0. 824 ~ 0. 946), 敏感度为 92. 5 % , 特异性为 86. 3 % 。 结论 血清 LncRNA HOTAIR 水平与 T2DM 患者 DN 的进展有关, 有望成为预测 T2DM 患者发生 DN 的生物标志物。

目的 探索杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响。 方法 将 40 只大鼠随机分为对照 组、 模型组、 杜仲水提物组和 Ravoxertinib 组, 各 10 只。 HE 染色检测大鼠大脑皮质损伤、 TUNEL 染色检 测大鼠大脑皮质细胞凋亡、 ELISA 法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶 ( SOD)、 丙二醛 (MDA) 和半胱 氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 (Caspase-3) 水平; Western 印迹检测大鼠大脑皮质中 ERK1 / 2 信号通路。 结果 HE 染色结果显示, 对照组大鼠脑组织无明显病理变化, 模型组大鼠脑组织病理损伤显著增加 (P< 0. 05), 杜 仲水提物组和 Ravoxertinib 组大鼠脑组织病理损伤明显减轻 (P< 0. 05); 与对照组大鼠相比, 模型组大鼠神 经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显升高, SOD 水平明显降低 (P< 0. 05); 与模型组大鼠比较, 杜仲水提物组大鼠和 Ravoxertinib 组大鼠神经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显下降, SOD 含量明显上升 (P< 0. 05); 与杜仲水提物 组大鼠比较, Ravoxertinib 组大鼠上述指标无明显差异 (P > 0. 05)。 结论 杜仲水提物通过调控 ERK1 / 2 信 号通路, 改变大鼠脑组织神经细胞生物学行为, 调节氧化应激反应, 从而对脑梗死发挥治疗作用。 

目的 探究自体牙-骨移植联合富血小板纤维蛋白影响种植体周围缺损的机制。 方法 将 40 只新 西兰大白兔随机分为实验 A、 B、 C 组和空白对照组, 每组 10 只, 均在全身麻醉的状态下通过微创术拔除 上颌前部单颗牙齿, 实验 A 组大白兔牙窝内植入自体牙-骨移植联合富血小板纤维蛋白, 实验 B 组仅植入 自体牙-骨移植, 实验 C 组仅植入富血小板纤维蛋白, 空白对照组则不植入任何材料。 对比分析各组碱性磷 酸酶 ( alkaline phosphatase, ALP ) 活 性、 Ⅰ 型 胶 原、 骨 保 护 素 ( osteoprotegerin, OPG ) 及 其 配 体 (RANKL) 灰度值、 Runx2、 ALP 以及血小板反应蛋白-1 mRNA 表达水平差异。 结果 随着时间的延长, 实 验组 ALP 活性, Ⅰ型胶原和 OPG 灰度值, Runx2、 ALP 和血小板反应蛋白-1 mRNA 表达水平均高于空白对 照组; 实验 A 组上述各指标值高于实验 B 组和 C 组, 差异有统计学意义 (P< 0. 05)。 各组 RANKL 灰度值 虽然随着时间延长增加, 差异有统计学意义 (P< 0. 05), 但在各时间点, 实验组和空白对照组 RANKL 灰 度值差异无统计学意义 (P> 0. 05)。 结论 联用富血小板纤维蛋白增强了自体牙-骨移植过程中对种植体周 围缺损修复的作用。 

目的 探讨分析可诱导 T 细胞共刺激分子 (inducible T-cell co-stimulator, ICOS) 在结肠癌组织中 的表达情况及其与远期生存的相关性。 方法 选取 2018 年 5 月至 2019 年 5 月期间在大连大学附属新华医 院进行手术切除结肠组织的 206 例结肠癌患者作为研究对象, 取其结肠癌组织及癌旁组织标本, 使用荧光 定量 PCR 检测结肠癌组织及癌旁组织中可诱导 T 细胞共刺激分子表达水平, 分析其表达与临床病理特征的 关系及远期生存的相关性。 结果 结肠癌组织中 ICOS 表达水平 (8. 73 ± 2. 25) 显著低于癌旁组织的 (18. 54 ± 3. 26), 差异有统计学意义 (P< 0. 05); 结肠癌组织中 ICOS 表达水平与肿瘤直径、 远处转移、 临 床分期、 淋巴结转移有关 ( P < 0. 05), 与年龄、 性别、 肿瘤部位、 分化程度差异无统计学意义 ( P > 0. 05); ICOS 表达在 206 例结肠癌组织的中低表达 117 例, 高表达 89 例; ICOS 高表达和低表达与临床病理 因素进行 Logistic 二次回归分析结果显示, ICOS 表达与肿瘤大小、 临床分期、 淋巴结转移、 远处转移有关 (P< 0. 05), 与年龄、 性别、 肿瘤位置、 分化程度无关 (P > 0. 05); 随访截止至 2021 年 9 月 30 日, 206 例 结肠癌患者存活率 83. 01 % (171 / 206), 死亡率 16. 99 % (35 / 206), 中位生存时间为 (23. 5 ± 3. 3) 个 月。 ICOS 高表达的 89 例结肠癌患者的中位生存期为 (27. 4 ± 3. 2) 个月, 95 % CI 为 2. 234 ~ 6. 147; ICOS 低表达的 117 例结肠癌患者的中位生存期为 (16. 3 ± 4. 3) 个月, 95 % CI 为 1. 458 ~ 5. 237, ICOS 高表达结 肠癌患者中位生存期显著高于 ICOS 低表达者 (P< 0. 05)。 结论 ICOS 在结肠癌组织中呈较低表达, 其表 达水平与患者远期生存呈正相关关系, 其水平可作为结肠癌患者预后生存的重要评估指标。

N 6 -甲基腺嘌呤 (N 6 -methyladenosine, m 6A) 修饰是 RNA 分子的转录后变化, m 6A 最早是上世纪 70 年代在细胞 mRNA 上发现的, 但直到全基因组 m 6A 定位方法发展后才被广泛研究。 近年来 m 6A 在调节 mRNA 中的作用及其在各种细胞类型中的功能及其重要性已经得到了证实, m 6A 调控多种生理过程中基因 表达的机制研究也越来越多。 此综述总结了最近一些关于 m 6A 修饰在免疫反应中的作用的研究进展, 讨论 了 m 6A 修饰在调节先天和适应性免疫反应以及免疫系统发育中的功能。

银屑病是常见的慢性、 复发性、 炎症性皮肤病, 角质形成细胞 ( keratinocyte, KC) 增殖分化失 调作为其发病原因之一, 具体机制尚未明确。 细胞外信号调节激酶 ( extracellular signal regulated kinase, ERK) 信号通路在其中发挥着重要作用, 微小 RNA (microRNA, miRNA)、 长链非编码 RNA ( lncRNA)、 细胞因子等作为 ERK 信号通路的上游分子参与调控银屑病表皮角质形成细胞的增殖与分化过程。 文章旨在 对这一通路在银屑病角质形成细胞过度增殖中的作用机制做一综述。

内皮细胞是心脏、 血管、 淋巴管等器官组织的重要组成部分, 在心血管系统生理过程中起至关 重要作用。 内皮间充质转化 (endothelial-mesenchymal transition, EndMT) 调控内皮细胞向间充质细胞转化, 其参与动脉粥样硬化过程。 EndMT 可能为动脉粥样硬化的防治提供新靶点与思路。

神经退行性疾病是一类由急慢性病理因素所引发的, 以神经细胞变性, 丢失、 退化为主要病理 特征的中枢神经系统功能衰退性疾病。 它是第二大类常见的死亡原因, 预防神经退行性疾病已成为一个新 兴的公共卫生领域, 对我们社会造成了巨大的挑战。 褪黑素是松果体激素, 具有多种生理功能, 主要包括 调节昼夜节律, 清除自由基, 抑制生物分子氧化, 抑制神经炎症。 神经退行性疾病患者褪黑素的水平降低, 褪黑素通过调节病理生理机制和信号通路发挥神经保护作用, 提示褪黑素有可能成为新的治疗药物。