医学分子生物学杂志 ›› 2024, Vol. 21 ›› Issue (1): 25-31.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.01.004
摘要: 目的 探究 miR-200c 对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。 方法 利用 RT-qPCR 检测52 例宫颈癌组织及癌旁组织中 miR-200c 的表达水平, 使用 miR-200c 模拟物或抑制物转染宫颈癌细胞系,RT-qPCR 验证转染效率后, 使用 CCK8 检测转染细胞的增殖水平, 流式细胞术检测转染细胞的凋亡水平;生物信息学预测 miR-200c 的靶基因, 荧光素酶报告基因验证其靶向关系; RT-qPCR 检测癌组织中靶基因的表达水平, Pearson 相关性分析 miR-200c 和靶基因的表达关系; RT-qPCR 和蛋白质印迹检测转染靶基因siRNA 或质粒细胞的增殖和凋亡水平。 结果 宫颈癌组织中 miR-200c 的表达显著低于癌旁组织, 转染 miR-200c 模拟物的 HT3 细胞增殖水平显著降低, 凋亡水平显著增加, 而转染 miR-200c 抑制物的 HeLa 细胞增殖水平显著增加, 凋亡水平显著降低; 荧光素酶报告基因实验证实 ZEB1 是 miR-200c 的指标靶标, miR-200c模拟物显著降低 ZEB1 表达, 而抑制物则发挥相反效应; 宫颈癌组织中 ZEB1 的表达显著高于癌旁组织, 且其表达与 miR-200c 呈显著负相关关系; 敲低 ZEB1 显著抑制 HT3 的增殖水平, 促进其凋亡, 而过表达ZEB1 则发挥相反效应。 结论 miR-200c 通过靶向抑制 ZEB1 表达调控宫颈癌细胞的增殖与凋亡, 从而参与宫颈癌的发生发展。
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