医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (6): 519-524.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.06.009
摘要: 目的 探讨驱动蛋白家族 20A (kinesin family 20A, KIF20A) 基因对肝癌 Huh7 细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制。 方法 qPCR 检测不同剂量 (0、 2、 4、 6、 8 Gy) 照射后 Huh7 中 KIF20A mRNA表达量, 通过慢病毒感染构建沉默 KIF20A 的 Huh7 细胞株, RT-qPCR 和蛋白质印迹验证 KIF20A 沉默效果,细胞计数试剂盒 8 (cell counting kit 8, CCK-8) 法、 集落形成实验检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, Transwell 实验、 划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力, 蛋白质印迹检测 PI3K / AKT 信号通路相关蛋白表达。 结果 肝癌 Huh7 细胞中 KIF20A 的 mRNA 表达水平随着 X 射线剂量的增加而逐渐上调 (P< 0. 05)。 感染 KIF20A siRNA 能够显著抑制 Huh7 细胞中 KIF20A mRNA 和蛋白表达 (P< 0. 05)。 随着辐射剂量的增加,细胞存活率逐渐下降 (P< 0. 05), 沉默 KIF20A 的 Huh7 细胞存活率明显降低 (P< 0. 05)。 沉默 KIF20A 的Huh7 细胞集落形成率明显降低 (P< 0. 05), 侵袭和迁移能力明显受到抑制 (P< 0. 05), 凋亡率明显升高(P< 0. 05), 细胞中 PI3K 水平下调 (P< 0. 05), AKT 磷酸化水平减少 (P< 0. 05)。 结论 沉默 KIF20A 能够增强肝癌 Huh7 细胞放射敏感性, 其作用机制可能与 PI3K / AKT 信号通路有关。
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