医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (4): 339-345.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.04.010
摘要: 目的 研究 BMP9 对 P38 MAPK 信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响。 方法 体外培养小鼠 MC3T3-E1 成骨细胞系, 用雷帕霉素 ( rapamycin) 诱导细胞发生自噬, Western 印迹检测 BMP9、 P38、 p-P38 的蛋白表达。 再将细胞随机分组后进行相应处理, 分别为 pcDNA3. 1-BMP9 组 ( pcDNA3. 1-BMP9)、 BMP9 siRNA 组 (BMP9 siRNA)、 P38 激活组 (茴香霉素, 10 μmol / L)、 P38 抑制组 ( SB202190, 10 μmol / L)、 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组 ( pcDNA3. 1-BMP9 + SB-202190, 10 μmol / L)、 BMP9 siRNA + P38 激活组 (BMP9 siRNA + 茴香霉素, 10 μmol / L) 以及对照组。 Western 印迹检测自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 的表达, CCK-8 和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况。 结果 雷帕霉素处理 后的 MC3T3-E1 细胞中 LC3-Ⅱ、 Beclin-1、 BMP9 和 p-P38 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 组、 P38 激活组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白升高 (P< 0. 05), P62 蛋白降低 (P< 0. 05); BMP9 siRNA 组、 P38 抑制组 LC3-Ⅱ和 Beclin-1 蛋白降低 (P< 0. 05), P62 蛋白升高 (P< 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组 LC3-Ⅱ、 Beclin-1 和 P62 蛋白水平与对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 组细胞增殖率升高、 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); BMP9 siRNA 细胞增殖率降低, 凋亡率升 高 (P均 < 0. 05)。 P38 激活组细胞增殖率升高, 凋亡率降低 (P均 < 0. 05); P38 抑制组细胞增殖率降低, 凋 亡率升高 (P均 < 0. 05)。 pcDNA3. 1-BMP9 + P38 抑制组和 BMP9 siRNA + P38 激活组细胞增殖率、 凋亡率与 对照组均无差异 (P均 > 0. 05)。 结论 BMP9 能激活 P38 MAPK 通路, 诱导成骨细胞自噬, 减少细胞凋亡。
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