医学分子生物学杂志 ›› 2023, Vol. 20 ›› Issue (3): 188-195.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2023.03.001
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摘要: 目的 探讨巨噬细胞分化模型中 BVR 的表达情况 方法 体外培养 L929 细胞 2 d, 收集 L929 细 胞上清, 用此培养基来体外培养小鼠骨髓来源巨噬细胞 7 d, 分别用 LPS 100 ng / mL 和 IFN-γ 100 ng / mL、 IL-4 10 ng / mL 和 IL-13 10 ng / mL 刺激 24 h 后收集细胞。 用 Western 印迹检测 INOS 和 ARG-1 的表达; 用流 式细胞术检测 CD45、 F4 / 80、 CD11b、 CD86 和 DECTIN-1 的表达; 用 RT-PCR 检测 INOS、 ARG-1、 FN 和 FIZZ1 的表达来判断 M1 和 M2 的模型是否建立成功, 然后在巨噬细胞模型中检测 BVR 的表达。 同时在 RAW264. 7 细胞系构建的巨噬细胞分化模型中检测 BVR 的表达。 结果 ① Western 印迹发现 LPS 和 IFN-γ 组 (M1 巨噬细胞) INOS 表达增加, IL-4 和 IL-13 组 (M2 巨噬细胞) ARG-1 表达增加; ② 流式细胞术发 现 LPS 和 IFN-γ 组巨噬细胞中 CD86 表达增加, IL-4 和 IL-13 组巨噬细胞中 DECTIN-1 表达增加; ③ RT-PCR 发现 LPS 和 IFN-γ 组巨噬细胞中 INOS 和 TNF-α 表达增加; IL-4 和 IL-13 组巨噬细胞中 ARG-1、 FN 和 FIZZ1 表达增加; ④ RT-PCR 发现在小鼠骨髓来源的巨噬细胞和 RAW264. 7 细胞系巨噬细胞分化模型中 BVR 均在 M1 表达降低, 在 M2 中表达增加。 结论 ① LPS 和 IFN-γ, IL-4 和 IL-13 刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞构建 M1 和 M2 模型成功; ② BVR 在小鼠骨髓来源巨噬细胞和小鼠单核巨噬细胞系构建的巨噬细胞分化模型中 均在 M1 中表达降低, 在 M2 中表达增加。
中图分类号: