摘要： 摘要:目的 观察敲低穹窿主体蛋白(majorvaultprotein,MVP)表达对肾癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能 的作用机制。方法 qRT-PCR和Westernblot检测人肾小管上皮细胞(HK2)和人肾癌细胞株(786-O、769-P、ACHN) 中MVP基因的基础表达水平,筛选MVP显著高表达的细胞株作为实验细胞株;在候选肾癌细胞中敲低MVP表达,通 过细胞克隆形成、EdU、细胞周期、细胞划痕、Transwell实验等方法观察敲低 MVP表达对人肾癌细胞增殖、迁移及侵袭 的影响;通过Westernblot检测PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达变化;通过通路激活剂确定 MVP基因调控肾癌细胞 生物学行为的作用机制。结果 qRT-PCR和Westernblot结果显示,相比 HK2细胞,在786-O、769-P、ACHN细胞中 MVP的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05),且在769-P细胞中最为显著。在769-P细胞中敲低 MVP表 达后,细胞克隆形成能力明显减弱(P<0.01);EdU阳性细胞数明显减少(P<0.01);处于S期的细胞占比减少(P< 0.01),而处于G2 期的细胞占比增加(P<0.01);细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制(均P<0.01);p-PI3K、p-Akt和p mTOR蛋白表达降低(均P<0.01)。在敲低MVP的同时给予PI3K激活剂740Y-P,可见p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋 白表达升高(均P<0.01);因敲低 MVP导致的细胞增殖、迁移、侵袭能力的抑制同样被740Y-P逆转(均P<0.01)。结 论 敲低MVP基因可以抑制人肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭,这种抑癌作用可能是通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通 路的激活而实现。 

中图分类号: 

• R737.9