华中科技大学学报(医学版) ›› 2024, Vol. 53 ›› Issue (2): 207-213.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.23.07.018

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微管抑制及尾桥蛋白磷酸化促进骨肉瘤细胞U2OS微核形成

  

  1. 江汉大学医学部 1口腔医学系 2免疫学教研室,武汉 430056
  • 收稿日期:2023-07-16 出版日期:2024-04-15 发布日期:2024-04-26
  • 通讯作者: E-mail:lilygreen66@163.com
  • 作者简介:阮 荻,男,2001年生,口腔医学专业本科生,E-mail:3435629998@ qq.com
  • 基金资助:
    国家级大学生创新训练项目(No.202211072019);湖北省中医药管理局科研项目(No.ZY2023F142);江汉大学校级自然科学基金项目 (No.2021yb135) 

Microtubule Inhibition and Gephyrin Phosphorylation Promote Micronucleus Formation in Osteosarcoma Cell Line U2OS

  • Received:2023-07-16 Online:2024-04-15 Published:2024-04-26

摘要: 摘要:目的 探讨微管及微管相关蛋白尾桥蛋白在肿瘤细胞微核形成中的作用。方法 利用DAPI染色检测不同 类型细胞自发微核率;利用诺考达唑(nocodazole)抑制微管聚集后,DAPI染色和胞质分裂阻滞(cytokinesis-block,CB)微 核实验观察人骨肉瘤细胞株U2OS中微核形成情况;免疫荧光多重染色检测诺考达唑处理不同时间对U2OS细胞中微 管及尾桥蛋白的影响;在U2OS细胞中过表达尾桥蛋白或利用collybistin使尾桥蛋白磷酸化,再利用免疫荧光及DAPI 染色检测其对微管及微核形成的影响。结果 相对于人胚肾HEK293细胞和原代神经细胞,U2OS自发微核率更高;诺 考达唑处理使U2OS细胞微核数量增加,且与释放时间相关;诺考达唑处理使尾桥蛋白分布改变,逐渐聚集于细胞核; U2OS细胞中磷酸化尾桥蛋白主要表达于分裂期细胞;过表达尾桥蛋白和(或)增加其磷酸化水平并不影响U2OS细胞 中微管蛋白的表达,但过表达尾桥蛋白并增加其磷酸化水平可使微核数量增多。结论 肿瘤细胞内微核形成与微管聚 集能力关系密切,可形成于细胞周期不同时期,具有积累效应。尾桥蛋白磷酸化后细胞中微核数量增多,提示其可能参 与调节肿瘤细胞微核形成。 

关键词: 微管, 微核, 尾桥蛋白, 诺考达唑, collybistin, U2OS ,

中图分类号: