医学分子生物学杂志 ›› 2024, Vol. 21 ›› Issue (6): 557-561.doi: 10.3870/j.issn.1672-8009.2024.06.009
摘要： 目的 探索 miR-660-5p 调控 P53 对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响。 方法 首先将肾小球系膜细胞 SV40-MES-13 细胞分为 2 组: 对照组和高糖组, 用于分析高糖对 SV40-MES-13 细胞活性及 miR- 660-5p / P53 表达的影响。 然后将高糖处理过后的 SV40-MES-13 细胞分为 4 组: miR NC 组、 miR-660-5p mimic 组、 si NC 组与 si P53 组。 实时荧光定量 PCR 实验检测 SV40-MES-13 细胞中 miR-660-5p 和 P53 的表达水平; 噻唑蓝试剂法 (MTT) 分析 SV40-MES-13 细胞的生长能力; 原位末端标记法 ( TUNEL) 以及流式细胞术分析 SV40-MES-13 细胞的凋亡率; Targetscan 检索以及荧光素酶报告基因实验分析 SV40-MES-13 细胞中 miR-660-5p 与 P53 的靶向作用关系; 蛋白质印迹分析 P53 蛋白的表达。 结果 与对照组比较, 高糖处理后导致 SV40-MES-13 细胞增殖活性降低, 凋亡率增加, miR-660-5p 表达降低而 P53 表达增加。 与 miR-660- 5p NC 组比较, miR-660-5p mimic 处理后的 SV40-MES-13 细胞增殖活性增加, 凋亡率降低。 与 si NC 组比较, si P53 处理后的 SV40-MES-13 细胞增殖活性增加, 凋亡率降低。 miR-660-5p 与 P53 存在结合域, 且能抑制 P53 表达。 结论 高糖处理肾小球系膜细胞后, miR-660-5p 表达水平降低, P53 表达水平增加, 上调肾小球系膜细胞的 miR-660-5p 的表达后, 高糖处理后的肾小球系膜细胞增殖活性增加, 凋亡率下降, 并且miR-660-5p 的这一作用与抑制 P53 的表达相关。
中图分类号:
