华中科技大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 52 ›› Issue (2): 206-211.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2023.02.011

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消光系数法与二喹啉甲酸法测定多肽浓度精密度的比较

  

  1. 1华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心,武汉 430030  2四川省绵阳市中医医院口腔科,绵阳 621053  3武汉市中医医院口腔科,武汉 430010  4华中科技大学协和深圳医院口腔科,深圳 518052  5湖南中医药大学口腔医学院(长沙市口腔医院),长沙 410023 
  • 收稿日期:2022-10-13 出版日期:2023-04-15 发布日期:2023-05-16
  • 通讯作者: E-mail:yangyan9511@163.com
  • 作者简介:张璐瑶,女,1993年生,硕士研究生,E-mail:zly952511299@163.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(No.81700961,No.81873714) 

Comparative Study on Precision of the Extinction Coefficient Method and the Bicinchoninic Acid Method in Determination of Polypeptide Concentration 

  • Received:2022-10-13 Online:2023-04-15 Published:2023-05-16

摘要: 摘要:目的 比较研究实验室测定多肽浓度的消光系数法与二喹啉甲酸法(bicinchoninic acid, BCA)的精密度。方法 将牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)与固相合成环肽CYE(NH2-CYENLRSTC-COOH)、CLP(NH2-CLPLWYPSC-COOH)及CHY(NH2-CHYPTYSKC-COOH)溶液梯度稀释后分别使用消光系数法和BCA法进行吸光度测定,通过消光系数公式或标准曲线方程式计算相应浓度值,比较浓度计算值与理论值之间的差异,并计算测定方法的精密度。结果 消光系数法的浓度计算值与理论值之间差异无统计学意义(P>0.05)。BCA法中,以BSA作为标准品得到的多肽浓度计算值与理论值之间有显著差异(P<0.05);以待测多肽自身为标准品求得的多肽浓度计算值与理论值之间无明显差异(P>0.05);以与待测多肽长度相同、分子量相近的多肽绘制个性化标准曲线求得的多肽浓度计算值与理论值之间存在统计学差异(P<0.05),但求得的浓度计算值相比BSA标准曲线的浓度计算值更接近理论值(P<0.05)。各方法的精密度之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 消光系数法推荐用于含有色氨酸和酪氨酸的多肽;当标准品在结构、疏水性等方面的性质越接近待测物,使用个性化标准曲线的BCA法得到的浓度计算值越准确,可用于多肽浓度的快速半定量测定。 

关键词: 二喹啉甲酸法(BCA)法, 多肽, 浓度测定, 个性化标准曲线 

中图分类号: