华中科技大学学报(医学版) ›› 2022, Vol. 51 ›› Issue (3): 303-308.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2022.03.003
摘要: 摘要:目的 探究 Ras蛋白家族成员 Rab20对结直肠肿瘤细胞增殖及干性的影响。方法 应用 TIMER2和 GEPIA2数据库分析 Rab20在人结直肠肿瘤组织及正常组织中的表达;采用 Westernblot方法检测人正常肠上皮细胞与结 直肠癌细胞系 XhCRC、SW620中 Rab20的表达水平;应用 TCGA 和STRING数据库对 Rab20相关基因进行富集分析; 构建敲减 Rab20的 XhCRC、SW620细胞;转染ts045-VSVG-GFP质粒,采用免疫荧光方法检测 Rab20对结直肠癌细胞 囊泡运输的影响;CCK-8和细胞球体形成实验检测 Rab20敲减对结直肠癌细胞增殖及干性的影响;Westernblot法检测 β-catenin、CyclinD1的表达水平。结果 人结直肠癌组织及细胞系中 Rab20的表达水平明显高于正常组织与细胞。 Rab20相关基因富集分析表明 Rab20与胞吞胞吐、囊泡运输等过程相关。敲减 Rab20可明显抑制结直肠癌细胞的囊泡 运输能力。敲减 Rab20后,XhCRC细胞增殖及干性显著抑制,且抑制作用在加入 Wnt3a蛋白后被抵消。同样在敲减 Rab20组中,β-catenin、CyclinD1蛋白表达水平显著降低,而在加入 Wnt3a蛋白后其表达被逆转。结论 Rab20在结直 肠癌中高表达,调控结直肠癌细胞囊泡运输,并通过 Wnt/β-catenin信号通路增强结直肠癌细胞的增殖与干性。
中图分类号: