华中科技大学学报（医学版） ›› 2023, Vol. 52 ›› Issue (3): 301-306.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.2023.03.003
摘要： 摘要:目的 探讨钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)卡格列净在缺氧心肌细胞修复损伤中的作用及机制。方 法 应用 H9C2大鼠心肌细胞构建缺氧-复氧模型,将心肌细胞分为对照组、单纯 SGLT2i组、缺氧-复氧组及缺氧-复氧 +SGLT2i组。采用蛋白免疫印迹和荧光定量 PCR检测心肌细胞老化相关因子SA-β-gal、p16、p21、p53及抗氧化应激相 关核因子2相关因子(NRF2)和血红素氧合酶1(HO1)以及具有转录调节作用的低氧诱导因子1α(HIF1α)表达水平,采 用微量酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),免疫 荧光检测 HIF1α和 NRF2核定位,双荧光素酶报告基因实验检测 HIF1α与 NRF2基因的相互作用。结果 与对照组相 比,缺氧-复氧组心肌细胞老化相关因子SA-β-gal、p16、p21和p53表达水平明显上升,氧化应激水平增强。给予 SGLT2i 预处理后,老化相关因子表达水平下降,氧化应激水平下调。进一步检测发现,缺氧-复氧组抗氧化应激相关分子 NRF2 和 HO1蛋白表达下降,并伴随 HIF1α表达上升;给予 SGLT2i后 NRF2与 HIF1α表达恢复至正常水平;而下调 NRF2 基因表达则消除了SGLT2i对缺氧心肌细胞的保护作用。双荧光素酶报告基因检测发现,HIF1α可直接与 NRF2基因 启动子区域结合,并转录调控其表达。结论 SGLT2i通过抑制低氧诱导的 HIF1α激活,上调 NRF2抗氧化通路,改善 缺氧-复氧心肌细胞的氧化应激损伤和老化,对心肌细胞起保护作用。
中图分类号:
