摘要： 摘要:目的 探究转化生长因子β活化激酶1(TAK1)对卵巢癌顺铂耐药的影响及作用机制。方法 体外培养人卵 巢癌细胞SK-OV-3和SW626,转染对照shRNA 或shTAK1质粒,经不同浓度顺铂(0~32μg/mL)处理24h,用 CCK-8 法检测细胞活力,用 AnnexinⅤ/7-AAD染色法检测细胞凋亡水平;建立顺铂耐药SK-OV-3/DDP细胞,经不同浓度顺铂 (0~32μg/mL)处理24h,用 CCK-8法检测细胞活力;顺铂耐药细胞转染对照shRNA 和shTAK1质粒,用蛋白质免疫 印迹实验检测 TAK1、选择性自噬接头蛋白p62、LC3-Ⅰ和 LC3-Ⅱ的表达,用免疫荧光染色法检测 LC3定位;用自噬抑 制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)处理耐药细胞,检测细胞活力。结果 与转染对照shRNA 的细胞相比,转 染shTAK1的细胞在不同顺铂浓度下的细胞活力均显著下降(均 P<0.05),细胞凋亡水平显著升高(均 P<0.05);与 SK-OV-3细胞相比,SK-OV-3/DDP细胞p62、LC3-Ⅱ表达水平显著升高(均 P<0.05),LC3聚集体形式增加;用3-MA 抑制细胞自噬显著减弱了顺铂诱导的细胞凋亡(均 P<0.05),而对紫杉醇诱导的细胞凋亡没有明显影响(P>0.05);转 染shTAK1的细胞p62、LC3-Ⅱ表达水平显著下降(均 P<0.05),LC3聚集体形式减少。结论 在卵巢癌细胞中下调 TAK1的表达减弱了细胞自噬活性,并逆转了细胞顺铂耐药。 

中图分类号: 

• R737.31