华中科技大学学报（医学版） ›› 2025, Vol. 54 ›› Issue (6): 787-795.doi: 10.3870/j.issn.1672-0741.25.05.034
摘要： 摘要:目的 探讨芍药苷(Pae)通过组织蛋白酶S(CTSS)-脑源性神经营养因子(BDNF)通路介导线粒体依赖途径改善年龄相关性听力损失(AHL)的分子机制。方法 生物信息学方法分析芍药苷、AHL 与线粒体损伤交集靶点。将HEI-OC1细胞分为空白对照(Mock)组、多柔比星(DOXO)组、DOXO+Pae组,测定细胞生物学行为与线粒体功能差异,包括细胞增殖检测试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力、缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡、蛋白质印迹检测细胞衰老标志物(p53和p21WAF1/Cip1),试剂盒测定线粒体膜电位(MMP)与三磷酸腺苷(ATP)水平,蛋白质印迹检测裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleavedCaspase-3)蛋白表达变化。将 HEI-OC1细胞分为 Mock组、DOXO 组、DOXO+oe-CTSS组、DOXO+si-CTSS组,检测细胞生物学行为与线粒体功能差异,蛋白质印迹测定 CTSS与 BDNF蛋白表达水平。构建小鼠 AHL模型,研究芍药苷对体内 AHL进展的影响。结果 生物信息分析结果显示 CTSS为芍药苷、AHL与线粒体损伤交集靶点之一。与 Mock组相比,DOXO 组细胞活力降低、凋亡率增加、p53和p21WAF1/Cip1表达增强、MMP与 ATP水平降低、cleavedCaspase-3表达增强;与 DOXO 组相比,DOXO+Pae组与 DOXO+si-CTSS组细胞活力均增加、凋亡率减少、p53和p21WAF1/Cip1表达减弱、MMP与 ATP水平增加、cleavedCaspase-3表达下降;而 DOXO+oe-CTSS组细胞活力降低、凋亡率增加、p53和p21WAF1/Cip1表达增强、MMP与 ATP水平降低、cleavedCaspase-3表达增高。此外,与 Mock组相比,DOXO 组 CTSS蛋白表达增加、BDNF蛋白表达降低;与 DOXO 组相比,DOXO+oe-CTSS组 CTSS蛋白表达进一步增加、BDNF蛋白表达降低,而 DOXO+si-CTSS组 CTSS蛋白表达下降、BDNF蛋白表达增强。动物实验进一步证实芍药苷能够抑制 AHL进展。结论 芍药苷可能通过 CTSS-BDNF通路影响线粒体功能改善 AHL。
