摘要： 摘要:目的 探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)通过靶向作用于 Krüppel样因子4(Krüppel-likefactor 4,KLF4)信号通路对血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达的影响。方法 将血管平滑肌细胞(vascularsmoothmuscle cells,VSMCs)分为4组:无义序列对照组(control+NC)、miR-29b过表达对照组(control+miR-29b)、无义序列模型组 (ox-LDL+NC)、miR-29b过表达模型组(ox-LDL+miR-29b)。对照组细胞正常培养;模型组细胞采用80mg/L氧化低 密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,ox-LDL)诱导24h建立模型。细胞计数试剂盒(cellcountingkit-8,CCK-8) 检测VSMCs的增殖情况;实时荧光定量PCR检测miR-29b、单核细胞化学趋化因子1(monocytechemoattractantpro tein-1,MCP-1)、MCP-3、α平滑肌肌动蛋白(smoothmuscleα-actin,SMα-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(smoothmuscle myosinheavychain,SM MHC)及KLF4的 mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)试剂盒检测培养上清中MCP-1、MCP-3水平;Westernblot检测蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测 miR-29b对KLF4的靶向作用。结果 ox-LDL刺激VSMCs后,细胞中miR-29b表达量显著下降。与ox-LDL+NC组 相比,ox-LDL+miR-29b组细胞增殖减少,炎症因子 MCP-1和 MCP-3的表达降低,收缩表型蛋白SMα-actin、SM MHC 的表达显著升高,KLF4表达下降。双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-29b能与KLF4mRNA的3'端非翻译区(3' UTR)结合。过表达KLF4可抑制miR-29b的作用。结论 miR-29b可靶向作用于KLF4,调控ox-LDL诱导的VSMCs 增殖、炎症因子的表达及表型蛋白表达的变化。

中图分类号: 

• R363.2