摘要： 摘要:目的 探讨葫芦素B(cucurbitacinB,CuB)通过烟酰胺磷酸核糖基转移酶(nicotinamidephosphoribosyltrans ferase,NAMPT)/叉头转录因子O亚家族成员3a(forkheadtranscriptionfactorOsubfamilymember3a,FoxO3a)轴调控 线粒体依赖性凋亡途径进而影响非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)细胞生物学行为的分子机制。方法 以吉非替尼(gefitinib,GEF)与CuB干预A549细胞,通过网络药理学分析作用靶点与下游通路,并设置不同载体转染组 细胞。CCK-8检测细胞活力,Transwell检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位(mito chondrialmembranepotential,MMP)水平,试剂盒检测细胞ROS水平,Westernblot检测线粒体动力学相关蛋白(DRP1、 Mfn1)以及NAMPT和FoxO3a蛋白表达水平,qRT-PCR检测细胞中NAMPTmRNA表达。通过建立裸鼠异种移植瘤 模型验证CuB在体内的治疗效果。结果 与Control组相比,GEF与CuB干预显著抑制A549细胞活力与侵袭,诱导细 胞凋亡,CuB干预显著降低A549细胞MMP水平,促进ROS产生,并上调A549细胞中DRP1水平,抑制Mfn1表达(均 P<0.05)。网络药理分析预测NAMPT为CuB治疗靶点,其在A549细胞中高表达。与Vector组相比,过表达 NAMPT显著促进A549细胞生长,抑制线粒体依赖性凋亡;与Vector+CuB(100nmol/L)组相比,过表达NAMPT逆转 CuB对A549细胞的作用(P<0.05)。相较于si-NAMPT-NC组,沉默NAMPT显著抑制A549细胞生长,促进线粒体依 赖性凋亡,而敲低FoxO3a促进A549细胞活力与侵袭,逆转si-NAMPT对A549细胞的生长抑制作用(P<0.05)。体内 实验结果显示,CuB以剂量依赖性抑制裸鼠移植瘤的生长。结论 CuB调控NAMPT-FoxO3a轴通过线粒体依赖性凋 亡途径抑制NSCLC进展。

中图分类号: 

• R734.2